中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
缩略词 | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-32页 |
综述一、植物抗旱分子生物学研究进展 | 第11-26页 |
·植物抗渗透胁迫应答机制 | 第11-21页 |
·信号传导途径 | 第12-14页 |
·胁迫应答基因表达的几种调控途径 | 第14-17页 |
·植物细胞在渗透胁迫下被诱导表达的基因及基因产物 | 第17-21页 |
·植物转基因工程提高植物抗旱性 | 第21-26页 |
·渗透调节剂在基因工程研究中的应用 | 第22-24页 |
·LEA蛋白的积累 | 第24页 |
·转录因子的作用 | 第24-26页 |
综述二、LEA基因及LEA蛋白的研究进展 | 第26-32页 |
·LEA蛋白的种类及其特性 | 第26-28页 |
·LEA蛋白质结构与细胞抗逆功能的关系 | 第28-30页 |
·LEA蛋白在酵母中表达及其与细胞抗逆的关系 | 第30页 |
·LEA基因的植物转化及展望 | 第30-32页 |
第二章 材料与方法 | 第32-51页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·植物材料 | 第32页 |
·宿主菌 | 第32页 |
·质粒载体 | 第32页 |
·各种酶及试剂 | 第32页 |
·寡核苷酸引物 | 第32-33页 |
·常用培养基和溶液的配制 | 第33-36页 |
·培养基配制 | 第33-34页 |
·常用溶液的配制 | 第34页 |
·实验所需试剂及其配制 | 第34-36页 |
·基本实验方法 | 第36-44页 |
·质粒DNA的提取 | 第36-38页 |
·目的基因在质粒中的克隆及在大肠杆菌中的转化 | 第38-40页 |
·重组质粒筛选与鉴定 | 第40-41页 |
·植物表达载体的构建及在农杆菌中的转化 | 第41-42页 |
·植物基因组DNA的提取 | 第42-44页 |
·实验方法 | 第44-51页 |
·大豆LEA基因的克隆 | 第44-46页 |
·PM11、PM30和ZLDE-2基因在大肠杆菌中的表达 | 第46-48页 |
·可表达LEA蛋白的重组菌的离子和渗透胁迫 | 第48页 |
·可表达LEA蛋白的重组菌的低温胁迫 | 第48页 |
·PM11基因转化烟草植株 | 第48-51页 |
第三章 结果与分析 | 第51-83页 |
第一部分 大豆LEA基因的克隆 | 第51-62页 |
·大豆未成熟种子总RNA的分离及其cDNA的合成 | 第51-52页 |
·目的条带的扩增及阳性克隆的鉴定 | 第52-53页 |
·LEA基因的序列分析及表达产物的特性分析 | 第53-62页 |
第二部分 PM11、PM30和ZLDE-2基因在大肠杆菌中的表达 | 第62-70页 |
·含LEA基因的原核表达载体的构建 | 第62-65页 |
·蛋白质表达产物的获得、鉴定及热稳定性分析 | 第65-70页 |
第三部分 PM11、PM30和ZLDE-2蛋白在提高重组菌抗渗透性中的作用 | 第70-76页 |
·对照菌及三种重组菌在几种胁迫固体培养基上的生长状况 | 第70-73页 |
·对照菌及重组菌在几种胁迫液体培养基中的生长状况 | 第73-76页 |
第四部分 利用转基因烟草异源表达研究PM11基因的功能 | 第76-83页 |
·植物表达载体的构建 | 第76-78页 |
·PM11基因转化烟草植株 | 第78-79页 |
·转PM11基因烟草的分子生物学鉴定 | 第79-83页 |
第四章 讨论 | 第83-86页 |
·大豆PM11基因可提高原核细胞和烟草的抗旱耐盐性 | 第83-84页 |
·三种LEA基因在提高细胞抗逆功能的作用不同 | 第84-86页 |
第五章 结论和创新点 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-100页 |
致谢 | 第100-102页 |
作者简介 | 第102-103页 |