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大豆LEA基因的克隆及其抗旱、耐盐功能的研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-7页
缩略词第7-11页
第一章 文献综述第11-32页
 综述一、植物抗旱分子生物学研究进展第11-26页
   ·植物抗渗透胁迫应答机制第11-21页
     ·信号传导途径第12-14页
     ·胁迫应答基因表达的几种调控途径第14-17页
     ·植物细胞在渗透胁迫下被诱导表达的基因及基因产物第17-21页
   ·植物转基因工程提高植物抗旱性第21-26页
     ·渗透调节剂在基因工程研究中的应用第22-24页
     ·LEA蛋白的积累第24页
     ·转录因子的作用第24-26页
 综述二、LEA基因及LEA蛋白的研究进展第26-32页
   ·LEA蛋白的种类及其特性第26-28页
   ·LEA蛋白质结构与细胞抗逆功能的关系第28-30页
   ·LEA蛋白在酵母中表达及其与细胞抗逆的关系第30页
   ·LEA基因的植物转化及展望第30-32页
第二章 材料与方法第32-51页
   ·实验材料第32-33页
     ·植物材料第32页
     ·宿主菌第32页
     ·质粒载体第32页
     ·各种酶及试剂第32页
     ·寡核苷酸引物第32-33页
   ·常用培养基和溶液的配制第33-36页
     ·培养基配制第33-34页
     ·常用溶液的配制第34页
     ·实验所需试剂及其配制第34-36页
   ·基本实验方法第36-44页
     ·质粒DNA的提取第36-38页
     ·目的基因在质粒中的克隆及在大肠杆菌中的转化第38-40页
     ·重组质粒筛选与鉴定第40-41页
     ·植物表达载体的构建及在农杆菌中的转化第41-42页
     ·植物基因组DNA的提取第42-44页
   ·实验方法第44-51页
     ·大豆LEA基因的克隆第44-46页
     ·PM11、PM30和ZLDE-2基因在大肠杆菌中的表达第46-48页
     ·可表达LEA蛋白的重组菌的离子和渗透胁迫第48页
     ·可表达LEA蛋白的重组菌的低温胁迫第48页
     ·PM11基因转化烟草植株第48-51页
第三章 结果与分析第51-83页
 第一部分 大豆LEA基因的克隆第51-62页
   ·大豆未成熟种子总RNA的分离及其cDNA的合成第51-52页
   ·目的条带的扩增及阳性克隆的鉴定第52-53页
   ·LEA基因的序列分析及表达产物的特性分析第53-62页
 第二部分 PM11、PM30和ZLDE-2基因在大肠杆菌中的表达第62-70页
   ·含LEA基因的原核表达载体的构建第62-65页
   ·蛋白质表达产物的获得、鉴定及热稳定性分析第65-70页
 第三部分 PM11、PM30和ZLDE-2蛋白在提高重组菌抗渗透性中的作用第70-76页
   ·对照菌及三种重组菌在几种胁迫固体培养基上的生长状况第70-73页
   ·对照菌及重组菌在几种胁迫液体培养基中的生长状况第73-76页
 第四部分 利用转基因烟草异源表达研究PM11基因的功能第76-83页
   ·植物表达载体的构建第76-78页
   ·PM11基因转化烟草植株第78-79页
   ·转PM11基因烟草的分子生物学鉴定第79-83页
第四章 讨论第83-86页
   ·大豆PM11基因可提高原核细胞和烟草的抗旱耐盐性第83-84页
   ·三种LEA基因在提高细胞抗逆功能的作用不同第84-86页
第五章 结论和创新点第86-88页
参考文献第88-100页
致谢第100-102页
作者简介第102-103页

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