| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-22页 |
| 第一章 AVND病毒单克隆抗体的制备及鉴定 | 第22-41页 |
| 第一节 病毒的分离与纯化--抗原制备 | 第22-23页 |
| 1 病料来源 | 第22页 |
| 2 病毒的分离与纯化 | 第22页 |
| 3 病毒提纯液的负染观察 | 第22-23页 |
| 4 病毒提纯液蛋白质浓度的测定 | 第23页 |
| 第二节 B_(ALB／C)小鼠的免疫 | 第23页 |
| 1 免疫方案及操作 | 第23页 |
| 2 脾内免疫 | 第23页 |
| 第三节 细胞融合及杂交瘤细胞的培养 | 第23-26页 |
| 1 主要试剂的配制 | 第23-24页 |
| 2 小鼠骨髓瘤细胞的准备 | 第24页 |
| 3 饲养细胞的制备 | 第24-25页 |
| 4 免疫脾细胞悬液的制备 | 第25页 |
| 5 细胞融合 | 第25-26页 |
| 第四节 杂交瘤细胞的筛选 | 第26-27页 |
| 1 病贝和健康贝的采集 | 第26页 |
| 2 健康贝组织样品的处理 | 第26页 |
| 3 间接酶联免疫吸附(ELISA) | 第26-27页 |
| 4 间接免疫荧光检测(IFA) | 第27页 |
| 第五节 杂交瘤细胞的单克隆化(有限稀释法) | 第27页 |
| 第六节 单克隆抗体的鉴定 | 第27-29页 |
| 1 胶体金标记免疫电镜技术对MA_(BS)特异性结合位点的检测 | 第27-28页 |
| 2 单克隆抗体亚型的测定 | 第28页 |
| 3 小鼠腹水单克隆抗体的制备及纯化 | 第28-29页 |
| 4 杂交瘤细胞培养上清液及腹水单克隆抗体的滴度测定 | 第29页 |
| 第七节 结果 | 第29-39页 |
| 1 病毒粒子的电镜负染观察 | 第29-31页 |
| 2 骨髓瘤细胞的培养 | 第31页 |
| 3 融合后的细胞在HAT筛选培养液中的培养 | 第31-33页 |
| 4 杂交瘤细胞的筛选及单克隆化 | 第33-36页 |
| 5 胶体金标记免疫电镜技术对MA_(BS)特异性结合位点的观察 | 第36-38页 |
| 6 单抗的亚型、杂交瘤细胞培养上清液及腹水的滴度 | 第38-39页 |
| 7 纯化腹水抗体的蛋白质浓度 | 第39页 |
| 第八节 讨论 | 第39-41页 |
| 第二章 AVND病毒免疫学检测技术的建立 | 第41-48页 |
| 第一节 间接ELISA检测技术的建立及其检测的灵敏度 | 第41-43页 |
| 1 腹水单抗稀释比例的确定 | 第41页 |
| 2 间接ELISA检测的步骤 | 第41-42页 |
| 3 ELISA对AVND病毒检测的灵敏度 | 第42-43页 |
| 第二节 IFA检测技术的建立 | 第43-44页 |
| 1 样品采集 | 第43页 |
| 2 IFA检测参数的确定 | 第43页 |
| 3 IFA检测的具体步骤 | 第43-44页 |
| 第三节 DOT-IMMUNOBLOT检测技术的建立 | 第44-46页 |
| 1 操作步骤 | 第44页 |
| 2 对病贝组织检测的灵敏度 | 第44-46页 |
| 第四节 讨论 | 第46-48页 |
| 1 间接ELISA检测 | 第46页 |
| 2 IFA检测 | 第46-48页 |
| 第三章 AVND病毒感染栉孔扇贝的免疫学检测 | 第48-66页 |
| 第一节 栉孔扇贝不同生长时期的ELISA检测 | 第48-50页 |
| 1 材料与方法 | 第48页 |
| 2 结果 | 第48-50页 |
| 第二节 患病栉孔扇贝的组织病理学观察 | 第50-53页 |
| 1 组织学切片制备及观察 | 第50页 |
| 2 患病栉孔扇贝的组织病理学观察 | 第50-53页 |
| 第三节 患病栉孔扇贝的IFA检测 | 第53-60页 |
| 1 病毒感染的靶组织 | 第53-55页 |
| 2 细胞病理学变化及组织结构的严重损害 | 第55-57页 |
| 3 AVND病毒在栉孔扇贝体内不同器官和组织的分布及特点 | 第57-60页 |
| 第四节 电镜超薄切片技术对IFA检测组织的回顾性研究 | 第60-63页 |
| 1 实验方法 | 第60页 |
| 2 实验结果 | 第60-63页 |
| 第五节 讨论 | 第63-66页 |
| 1 不同生长季节栉孔扇贝AVND病毒感染率的ELISA检测 | 第63页 |
| 2 患扇病贝的组织学和IFA检测 | 第63-64页 |
| 3 AVND的传播和致病机理 | 第64-66页 |
| 小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 已完成的文章 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
