一. 英文缩略表 | 第1-8页 |
二. 中文摘要 | 第8-10页 |
三. 英文摘要 | 第10-13页 |
四. 引言 | 第13-21页 |
1 病原学 | 第13-15页 |
2 流行病学 | 第15-16页 |
3 临床症状和病理变化 | 第16-17页 |
4 诊断 | 第17-19页 |
·、酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第17页 |
·、PCR方法 | 第17-18页 |
·、血清中和实验 | 第18页 |
·、免疫荧光试验(IFA) | 第18页 |
·、免疫印迹(工B) | 第18页 |
·、免疫电镜(IEM) | 第18-19页 |
5 疫苗 | 第19-21页 |
五. 实验研究 | 第21-57页 |
实验一 中国不同地区不同月龄猪中戊型肝炎病毒感染情况的调查与分析 | 第21-29页 |
1 材料与方法 | 第22-24页 |
·研究对象 | 第22页 |
·样品的处理 | 第22页 |
·抗--HEV抗体的检测 | 第22-24页 |
2 结 果 | 第24-26页 |
·不同地区猪场血清抗体检查结果 | 第24-25页 |
·不同猪场血清抗体检查结果 | 第25页 |
·不同月龄猪HEV抗体阳性率 | 第25-26页 |
3 讨 论 | 第26-29页 |
实验二:HEV ORF2基因片断的克隆与原核表达载体的构建 | 第29-57页 |
1 材料与方法 | 第30-39页 |
·试剂及仪器 | 第30-31页 |
·试剂 | 第30-31页 |
·仪器 | 第31页 |
·溶液配制 | 第31-32页 |
·引物设计与合成 | 第32页 |
·病毒的处理与RNA的提取 | 第32-33页 |
·RT-PCR以及巢式PCR | 第33-34页 |
·PCR产物的纯化和克隆 | 第34-37页 |
·PCR产物的纯化 | 第34-35页 |
·PCR产物的克隆 | 第35页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
·PCR产物的转化 | 第36页 |
·碱法少量提取质粒DNA | 第36-37页 |
·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第37页 |
·克隆基因的序列分析 | 第37页 |
·原核表达载体的构建 | 第37-39页 |
·酶切重组质粒PGEM-ItEV和PET一30a(+) | 第38页 |
·回收胶的步骤 | 第38-39页 |
·表达质粒与目的基因的连接 | 第39页 |
2 结果 | 第39-53页 |
·HEV ORF2部分基因的PCR扩增和克隆结果 | 第40页 |
·PGEM-HEV序列的测定与分析 | 第40-52页 |
·重组质粒PEl-HEV的PCR鉴定 | 第52-53页 |
·构建后的PEI-HEV的测定与分析 | 第53页 |
3 讨论 | 第53-57页 |
六. 结论 | 第57-58页 |
七. 参考文献 | 第58-69页 |
八. 附录 | 第69-71页 |
九. 致谢 | 第71-72页 |
十. 攻读学位期间发表的论文情况 | 第72页 |