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香烟水溶性提取物对心、脑和血管内皮的毒性损害以及相关机制的研究

目录第1-6页
缩略词表第6-7页
中文摘要第7-12页
英文摘要第12-19页
第一部分:香烟水溶性提取物对小鼠急性和慢性的毒性作用第19-33页
 前言第19页
 材料和方法第19-23页
  1.动物和试剂仪器第19-20页
  2.香烟水溶性提取物(CSE)的制备第20页
  3.CSE静脉注射对小鼠的急性毒性试验第20页
  4.小鼠对CSE慢性经皮注射的毒性试验第20页
  5.小鼠血浆vWFAg水平的测定第20-21页
  6.血浆脂质过氧化物丙二醛(MDA)水平的测定第21-22页
  7.小鼠全血谷胱甘肽过氧化物酶活性测定第22页
  8.观察CSE对小鼠血浆超微弱化学发光水平的影响第22页
  9.体内微核试验第22页
  10.电镜观察第22页
  11.统计分析第22-23页
 结果第23-28页
  1.急性毒性试验第23页
  2.慢性毒性第23页
  3.体内微核试验和病理组织检查第23页
  4.透射电镜第23-28页
 讨论第28-31页
 参考文献第31-33页
第二部分:香烟水溶性提取物慢性经皮注射引起小鼠心肌损伤第33-43页
 前言第33页
 材料和方法第33-37页
  1.动物和试剂仪器第33-34页
  2.香烟水溶性提取物(CSE)的制备第34页
  3.慢性经皮注射CSE对小鼠毒性试验第34页
  4.小鼠心肌线粒体的制备第34-35页
  5.细胞色素C氧化酶活性测定第35页
  6.血清GOT,LDH和CPK的测定第35页
  7.透射电镜观察第35-37页
 结果第37-40页
  1.CSE暴露对小鼠心肌线粒体细胞色素C氧化酶(COX)活性的影响第37页
  2.心肌损伤标志酶测定第37页
  3.心肌线粒体形态学观察第37-40页
 讨论第40-42页
 参考文献第42-43页
第三部分:香烟水溶性提取物对体外小鼠脑线粒体的损伤和维生素C的作用第43-62页
 前言第43页
 材料和方法第43-48页
  1.动物和试剂第43-44页
  2.香烟水溶性提取物(CSE)的制备第44页
  3.小鼠脑线粒体制备第44-45页
  4.线粒体ATPase酶活性的测定第45页
  5.细胞色素C氧化酶(COX)活性的测定第45-46页
  6.线粒体膜脂质过氧化物丙二醛(MDA)水平的测定第46页
  7.线粒体膜脂质流动性的测定第46页
  8.超微弱化学发光观察线粒体膜脂质和线粒体DNA过氧化反应第46-47页
  9.线粒体肿胀度的测定第47页
  10.透射电镜观察线粒体形态学变化第47页
  11.统计分析第47-48页
 结果第48-57页
  1.CSE或尼古丁对小鼠脑线粒体呼吸酶活性,MDA水平和线粒体膜脂质流动性的影响第48页
  2.CSE或尼古丁对小鼠脑线粒体和线粒体DNA超微弱化学发光强度的影响第48页
  3.CSE或尼古丁对Ca~(2+)诱导的小鼠脑线粒体肿胀反应的影响第48-49页
  4.线粒体形态学的透射电镜分析第49-57页
 讨论第57-59页
 参考文献第59-62页
第四部分:香烟水溶性提取物对大鼠心肌线粒体损伤作用第62-73页
 前言第62页
 材料和方法第62-66页
  1.动物和试剂第62-63页
  2.香烟水溶性提取物(CSE)的制备第63页
  3.心肌线粒体制备第63页
  4.线粒体ATPase酶活性的测定第63-64页
  5.细胞色素C氧化酶(COX)活性的测定第64页
  6.线粒体膜脂质过氧化物丙二醛(MDA)水平的测定第64页
  7.线粒体膜脂质流动性的测定.第64页
  8.超微弱化学发光观察线粒体膜脂质和线粒体DNA过氧化反应第64-65页
  9.线粒体肿胀度的测定第65页
  10.统计分析第65-66页
 结果与讨论第66-71页
  1.CSE和尼古丁对大鼠心肌线粒体ATPase、COX活性、MDA水平及线粒体膜脂质流动性的影响第66页
  2.CSE和尼古丁作用于大鼠心肌线粒体悬液以及线粒体DNA超微弱化学发光强度的观察第66-69页
  3.CSE对钙离子诱导的线粒体肿胀反应的影响第69-71页
 结论第71-72页
 参考文献第72-73页
第五部分:香烟水溶性提取物对原代培养的人脐静脉内皮细胞的损伤作用第73-98页
 前言第73页
 材料和方法第73-78页
  1.试剂第73-74页
  2.香烟水溶性提取物(CSE)的制备第74页
  3.细胞培养第74页
  4.HUVEC存活率和增殖率第74-75页
  5.HUVEC凋亡和细胞周期分析第75页
  6.相差显微镜和荧光显微镜观察HUVEC形态学变化第75页
  7.HUVEC血管形成.第75-76页
  8.罗丹明123测定线粒体膜电位第76页
  9.Fura 2测定细胞内游离Ca~(2+)浓度第76页
  10.流式细胞分析HUVEC p53,Bcl-2/Bax蛋白的表达第76页
  11.Western blot分析HUVEC Bcl-2表达第76-77页
  12.统计分析第77-78页
 结果第78-92页
  1.CSE或尼古丁对HUVEC存活率和增殖率的影响第78页
  2.流式细胞分析CSE或尼古丁处理HUVEC凋亡及细胞周期分布第78-82页
  3.CSE或尼古丁暴露引起的HUVEC形态学变化第82页
  4.CSE或尼古丁对HUVEC血管形成的影响第82-86页
  5.线粒体膜电位和胞浆游离钙离子浓度的测定第86页
  6.HUVEC凋亡相关蛋白的表达第86-92页
 讨论第92-95页
 参考文献第95-98页
综述第98-106页
总结与展望第106-111页
致谢第111-112页
简历第112页

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