目录 | 第1-6页 |
缩略词表 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-12页 |
英文摘要 | 第12-19页 |
第一部分:香烟水溶性提取物对小鼠急性和慢性的毒性作用 | 第19-33页 |
前言 | 第19页 |
材料和方法 | 第19-23页 |
1.动物和试剂仪器 | 第19-20页 |
2.香烟水溶性提取物(CSE)的制备 | 第20页 |
3.CSE静脉注射对小鼠的急性毒性试验 | 第20页 |
4.小鼠对CSE慢性经皮注射的毒性试验 | 第20页 |
5.小鼠血浆vWFAg水平的测定 | 第20-21页 |
6.血浆脂质过氧化物丙二醛(MDA)水平的测定 | 第21-22页 |
7.小鼠全血谷胱甘肽过氧化物酶活性测定 | 第22页 |
8.观察CSE对小鼠血浆超微弱化学发光水平的影响 | 第22页 |
9.体内微核试验 | 第22页 |
10.电镜观察 | 第22页 |
11.统计分析 | 第22-23页 |
结果 | 第23-28页 |
1.急性毒性试验 | 第23页 |
2.慢性毒性 | 第23页 |
3.体内微核试验和病理组织检查 | 第23页 |
4.透射电镜 | 第23-28页 |
讨论 | 第28-31页 |
参考文献 | 第31-33页 |
第二部分:香烟水溶性提取物慢性经皮注射引起小鼠心肌损伤 | 第33-43页 |
前言 | 第33页 |
材料和方法 | 第33-37页 |
1.动物和试剂仪器 | 第33-34页 |
2.香烟水溶性提取物(CSE)的制备 | 第34页 |
3.慢性经皮注射CSE对小鼠毒性试验 | 第34页 |
4.小鼠心肌线粒体的制备 | 第34-35页 |
5.细胞色素C氧化酶活性测定 | 第35页 |
6.血清GOT,LDH和CPK的测定 | 第35页 |
7.透射电镜观察 | 第35-37页 |
结果 | 第37-40页 |
1.CSE暴露对小鼠心肌线粒体细胞色素C氧化酶(COX)活性的影响 | 第37页 |
2.心肌损伤标志酶测定 | 第37页 |
3.心肌线粒体形态学观察 | 第37-40页 |
讨论 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-43页 |
第三部分:香烟水溶性提取物对体外小鼠脑线粒体的损伤和维生素C的作用 | 第43-62页 |
前言 | 第43页 |
材料和方法 | 第43-48页 |
1.动物和试剂 | 第43-44页 |
2.香烟水溶性提取物(CSE)的制备 | 第44页 |
3.小鼠脑线粒体制备 | 第44-45页 |
4.线粒体ATPase酶活性的测定 | 第45页 |
5.细胞色素C氧化酶(COX)活性的测定 | 第45-46页 |
6.线粒体膜脂质过氧化物丙二醛(MDA)水平的测定 | 第46页 |
7.线粒体膜脂质流动性的测定 | 第46页 |
8.超微弱化学发光观察线粒体膜脂质和线粒体DNA过氧化反应 | 第46-47页 |
9.线粒体肿胀度的测定 | 第47页 |
10.透射电镜观察线粒体形态学变化 | 第47页 |
11.统计分析 | 第47-48页 |
结果 | 第48-57页 |
1.CSE或尼古丁对小鼠脑线粒体呼吸酶活性,MDA水平和线粒体膜脂质流动性的影响 | 第48页 |
2.CSE或尼古丁对小鼠脑线粒体和线粒体DNA超微弱化学发光强度的影响 | 第48页 |
3.CSE或尼古丁对Ca~(2+)诱导的小鼠脑线粒体肿胀反应的影响 | 第48-49页 |
4.线粒体形态学的透射电镜分析 | 第49-57页 |
讨论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
第四部分:香烟水溶性提取物对大鼠心肌线粒体损伤作用 | 第62-73页 |
前言 | 第62页 |
材料和方法 | 第62-66页 |
1.动物和试剂 | 第62-63页 |
2.香烟水溶性提取物(CSE)的制备 | 第63页 |
3.心肌线粒体制备 | 第63页 |
4.线粒体ATPase酶活性的测定 | 第63-64页 |
5.细胞色素C氧化酶(COX)活性的测定 | 第64页 |
6.线粒体膜脂质过氧化物丙二醛(MDA)水平的测定 | 第64页 |
7.线粒体膜脂质流动性的测定. | 第64页 |
8.超微弱化学发光观察线粒体膜脂质和线粒体DNA过氧化反应 | 第64-65页 |
9.线粒体肿胀度的测定 | 第65页 |
10.统计分析 | 第65-66页 |
结果与讨论 | 第66-71页 |
1.CSE和尼古丁对大鼠心肌线粒体ATPase、COX活性、MDA水平及线粒体膜脂质流动性的影响 | 第66页 |
2.CSE和尼古丁作用于大鼠心肌线粒体悬液以及线粒体DNA超微弱化学发光强度的观察 | 第66-69页 |
3.CSE对钙离子诱导的线粒体肿胀反应的影响 | 第69-71页 |
结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-73页 |
第五部分:香烟水溶性提取物对原代培养的人脐静脉内皮细胞的损伤作用 | 第73-98页 |
前言 | 第73页 |
材料和方法 | 第73-78页 |
1.试剂 | 第73-74页 |
2.香烟水溶性提取物(CSE)的制备 | 第74页 |
3.细胞培养 | 第74页 |
4.HUVEC存活率和增殖率 | 第74-75页 |
5.HUVEC凋亡和细胞周期分析 | 第75页 |
6.相差显微镜和荧光显微镜观察HUVEC形态学变化 | 第75页 |
7.HUVEC血管形成. | 第75-76页 |
8.罗丹明123测定线粒体膜电位 | 第76页 |
9.Fura 2测定细胞内游离Ca~(2+)浓度 | 第76页 |
10.流式细胞分析HUVEC p53,Bcl-2/Bax蛋白的表达 | 第76页 |
11.Western blot分析HUVEC Bcl-2表达 | 第76-77页 |
12.统计分析 | 第77-78页 |
结果 | 第78-92页 |
1.CSE或尼古丁对HUVEC存活率和增殖率的影响 | 第78页 |
2.流式细胞分析CSE或尼古丁处理HUVEC凋亡及细胞周期分布 | 第78-82页 |
3.CSE或尼古丁暴露引起的HUVEC形态学变化 | 第82页 |
4.CSE或尼古丁对HUVEC血管形成的影响 | 第82-86页 |
5.线粒体膜电位和胞浆游离钙离子浓度的测定 | 第86页 |
6.HUVEC凋亡相关蛋白的表达 | 第86-92页 |
讨论 | 第92-95页 |
参考文献 | 第95-98页 |
综述 | 第98-106页 |
总结与展望 | 第106-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
简历 | 第112页 |