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海洋细菌抗真菌活性物质的筛选

致谢第1-10页
中文摘要第10-11页
英文摘要第11-13页
前言第13-16页
第一部分 海洋细菌抗真菌活性物质的筛选第16-56页
 一. 材料与方法第16-31页
  1 菌种筛选第16-22页
   ·取样地点第16页
   ·样品处理第16-18页
     ·第四批样品的处理第16-17页
     ·第五批样品的处理第17页
     ·第六批样品的处理第17-18页
   ·培养基第18-19页
   ·菌种分离第19-20页
     ·第四批样品菌种分离第19页
     ·第五批样品菌种分离第19-20页
     ·第六批样品菌种分离第20页
   ·菌种发酵第20页
   ·菌种保藏第20-21页
   ·培养物离心第21页
   ·样品的抑菌活性测定第21-22页
     ·供试病原菌株第21页
     ·检测平皿的制作第21页
     ·标准抗生素的制备方法第21-22页
     ·样品的抑菌活性测定第22页
  2 菌株041381的来源,形态特征与生长特征第22-23页
   ·菌种来源第22页
   ·形态特征第22页
   ·生长特征第22-23页
     ·生长曲线第22页
     ·耐盐度实验第22-23页
  3 菌株041381发酵条件究第23-24页
   ·种子液的制备第23页
   ·最适发酵培养基的选择第23页
   ·碳源实验第23页
   ·氮源实验第23页
   ·氮源的量改变第23-24页
   ·通氧量和活性的关系第24页
   ·不同发酵时间对菌株041381产抗真菌物质的影响第24页
   ·不同发酵温度对菌株041381产抗真菌物质的影响第24页
   ·不同NaCl浓度对菌株041381产抗真菌活性物质的影响第24页
  4 菌株041381活性物质的理化性质第24-26页
   ·菌株041381发酵上清液的理化分析第24-25页
     ·极性第24-25页
     ·沉淀第25页
     ·盐析第25页
   ·菌株041381所产活性物质粗品的理化分析第25-26页
     ·粗品的制备第25页
     ·粗品的热稳定性第25页
     ·粗品的酸碱稳定性第25页
     ·粗品的溶解性第25-26页
  5 活性物质的抑菌活性和细胞毒性第26页
   ·抗细菌活性第26页
   ·抗真菌活性第26页
   ·最小抑菌浓度(MIC)第26页
   ·细胞毒性第26页
  6 菌株041381所产活性物质的分离纯化第26-28页
   ·Sephadex G-75层析柱分离第26-27页
   ·对样品、对照,、纯品进行SDS-PAGE电泳第27-28页
     ·样品、对照,、纯品的制备第27页
     ·SDS-PAGE电泳第27-28页
  7 仪器第28-29页
  8 参考文献第29-31页
 二 结果与讨论第31-56页
  1 具有抗真菌活性菌种的筛选第31-38页
   ·第四批样品的采集和筛选第31-33页
     ·第四批样品的采集第31页
     ·第四批样品的菌种分离第31-32页
     ·第四批样品的筛选第32-33页
   ·第五批样品的采集和筛选第33-35页
     ·第五批样品的采集第33页
     ·第五批菌种的分离第33-34页
     ·第五批活性菌株的筛选第34-35页
   ·第六批样品的采集和筛选第35-37页
     ·第六批样品的采集第35页
     ·第六批菌种分离第35-36页
     ·第六批菌种筛选第36-37页
   ·复筛结果第37页
   ·三批菌种分离筛选小结第37-38页
  2 菌株041381的形态特征与生长特征第38-40页
   ·形态特征第38-39页
   ·生长特征第39-40页
     ·生长曲线第39页
     ·耐盐度实验结果第39-40页
  3 菌株041381发酵条件的优化第40-47页
   ·最适培养基,最适培养方式的选择第40-41页
   ·碳源的实验第41页
   ·氮源的实验第41-42页
   ·氮源的量改变第42-43页
   ·通氧量与活性的关系第43-44页
   ·培养时间对产抗菌活性物质的影响第44页
   ·发酵温度对产抗菌活性物质的影响第44-45页
   ·不同NaCl浓度对产抗菌活性物质的影响第45-47页
  4 菌株041381所产活性物质的理化性质第47-50页
   ·菌株041381发酵上清液的理化性质第47-49页
     ·极性第47页
     ·沉淀第47-48页
     ·盐析第48-49页
   ·菌株041381所产活性物质粗品的理化性质第49-50页
     ·热稳定性第49页
     ·酸碱稳定性第49-50页
     ·粗品的溶解性第50页
  5 活性物质的抑菌活性和细胞毒性第50-52页
   ·抗细菌活性第50-51页
   ·抗真菌活性第51页
   ·最小抑菌浓度(MIC)第51页
   ·细胞毒性第51-52页
  6 活性物质的分离纯化第52-53页
   ·Sephadex G-75层析柱分离第52页
   ·SDS-PAGE电泳第52-53页
  7 菌株041381的小结第53-54页
  8 参考文献第54-56页
第二部分 美蓝-酶标仪法的建立第56-74页
 一 材料与方法第57-62页
  1 材料第57页
   ·标准抗生素第57页
   ·标准抗生素第57页
   ·染料第57页
   ·培养基第57页
  2 方法第57-61页
   ·可行性实验第57-58页
   ·美蓝法筛选抗酵母类真菌活性物质条件的确定第58-60页
     ·美蓝最大吸收波长的确定第58页
     ·白色念珠菌生长曲线的测定第58页
     ·本方法三个重要参数的确定第58-60页
       ·技术路线第58页
       ·靶菌液的稀释,抗生素的稀释第58页
       ·种板第58-59页
       ·抗生素与靶菌液作用第59页
       ·酶标仪测定空白板吸光值第59页
       ·加入美蓝第59页
       ·保温第59页
       ·酶标仪测定吸光值第59页
       ·处理数据,SAS分析,确定三个重要参数第59-60页
     ·用本方法筛选具有抗酵母类真菌活性物质的判定界限第60页
   ·本方法的影响因素第60-61页
     ·接种靶菌液浓度的影响第60-61页
     ·保温时间的影响第61页
     ·抗生素与靶菌液作用时间的影响第61页
     ·进板方式的影响第61页
     ·抗生素与靶菌液作用方式的影响第61页
  3 本研究使用的仪器设备第61-62页
 二 结果第62-68页
  1 可行性实验第62-63页
  2 美蓝的最大吸收波长的确定第63-64页
  3 白色念珠菌的生长曲线第64页
  4 本方法三个重要参数的确定第64-65页
  5 用本方法筛选具有抗酵母类真菌活性物质的判定界限第65-66页
  6 本方法的最终建立第66页
  7 接种菌液浓度的影响第66页
  8 保温时间的影响第66-67页
  9 抗生素与靶菌液作用时间的影响第67-68页
  10 进板方式的影响第68页
  11 培养方式的影响第68页
 三 讨论第68-72页
  1 本方法的适用范围第68页
  2 本方法的应用实例第68-71页
  3 本方法与琼脂挖块法,MTT法的比较第71-72页
 四 参考文献第72-74页
结论第74-75页
文献综述第75-93页
 一 抗真菌药物的现状第75-82页
 二 海洋微生物抗真菌活性物质的筛选第82-89页
 三 参考文献第89-93页

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