| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-29页 |
| 1．1 新城疫病毒分子生物学概述 | 第14-20页 |
| 1．2 RNA病毒反遗传操作研究进展 | 第20-23页 |
| 1．3 新城疫病毒反遗传操作技术研究进展 | 第23-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-38页 |
| 2．1 试验材料 | 第29-30页 |
| 2．1．1 病毒 | 第29页 |
| 2．1．2 载体 | 第29页 |
| 2．1．3 菌株与质粒 | 第29页 |
| 2．1．4 实验动物 | 第29页 |
| 2．1．5 主要试剂 | 第29页 |
| 2．1．6 主要仪器 | 第29-30页 |
| 2．2 方法 | 第30-38页 |
| 2．2．1 病毒的增殖 | 第30页 |
| 2．2．2 NDV F48E9株RNA的提取 | 第30页 |
| 2．2．3 NDV F48E9株全基因组的RT-PCR扩增 | 第30-32页 |
| 2．2．4 NDV F48E9株全基因组分段克隆 | 第32-33页 |
| 2．2．5 阳性重组子的筛选与鉴定 | 第33-34页 |
| 2．2．6 NDV F48E9株cDNA低拷贝表达载体的构建 | 第34页 |
| 2．2．7 序列比较 | 第34-35页 |
| 2．2．8 NP-P基因间隔区序列测定 | 第35-38页 |
| 3 实验结果 | 第38-53页 |
| 3．1 NDV F48E9株全基因组cDNA克隆 | 第38-40页 |
| 3．1．1 NDV F48E9株各基因的RT-PCR扩增 | 第38页 |
| 3．1．2 NDV F48E9株3’端和5’端的RT-PCR扩增 | 第38页 |
| 3．1．3 NDV F48E9株主要基因cDNA的克隆与鉴定 | 第38-39页 |
| 3．1．4 NDV F48E9株全基因组cDNA核苷酸序列测定 | 第39-40页 |
| 3．2 F48E9株全基因组cDNA低拷贝表达载体的构建 | 第40-44页 |
| 3．2．1 F48E9株基因组3’端亚克隆结果 | 第40-41页 |
| 3．2．2 F48E9株基因组3’端和NP基因的连接 | 第41页 |
| 3．2．3 F48E9株3’端+NP+P连接 | 第41页 |
| 3．2．4 F48E9株3’端+NP+P+M连接 | 第41-42页 |
| 3．2．5 F48E9株L基因与5’端cDNA的连接 | 第42页 |
| 3．2．6 F48E9株基因组全长cDNA低拷贝表达载体的构建 | 第42-44页 |
| 3．2．7 F48E9株全基因组的核苷酸序列测定 | 第44页 |
| 3．3 序列比较 | 第44-50页 |
| 3．3．1 同源性比较 | 第44-45页 |
| 3．3．2 F基因遗传变异分析 | 第45-48页 |
| 3．3．3 HN基因遗传变异分析 | 第48-49页 |
| 3．3．4 L基因遗传变异分析 | 第49-50页 |
| 3．4 NP-P基因间隔区序列测定 | 第50-53页 |
| 3．4．1 NP-P基因间隔区序列RT-PCR扩增及鉴定结果 | 第50页 |
| 3．4．2 NP-P基因间隔区序列比较结果 | 第50页 |
| 3．4．3 NP-P基因间隔区序列核苷酸序列同源性比较 | 第50-53页 |
| 4 讨论 | 第53-59页 |
| 4．1 F48E9全基因组cDNA核苷酸序列 | 第53页 |
| 4．2 NDV分离株同源性比较 | 第53-54页 |
| 4．2．1 六株NDV分离株编码基因的核苷酸及氨基酸同源性比较 | 第53页 |
| 4．2．2 F48E9株与其它毒株基因组核苷酸同源性比较 | 第53-54页 |
| 4．3 NP-P基因间隔区6碱基的插入 | 第54页 |
| 4．4 F基因遗传变异分析 | 第54-56页 |
| 4．4．1 F蛋白裂解位点处氨基酸的组成与毒力直接相关 | 第55页 |
| 4．4．2 不同NDV毒株F蛋白的糖基化位点稍有变化 | 第55页 |
| 4．4．3 不同毒株半胱氨酸残基（Cys）的数目与位置有所差异 | 第55-56页 |
| 4．5 HN基因遗传变异分析 | 第56-57页 |
| 4．5．1 糖基化位点的变化 | 第56页 |
| 4．5．2 半胱氨酸数目的变化 | 第56-57页 |
| 4．6 L基因遗传分析 | 第57页 |
| 4．7 基因起始与终止信号的序列比较 | 第57-58页 |
| 4．8 方法学上的改进 | 第58-59页 |
| 4．8．1 F48E9株3’端RT-PCR | 第58页 |
| 4．8．2 不同连接策略的比较 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 附录 | 第69-90页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 作者简历 | 第92页 |
