中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-10页 |
一、 前言 | 第10-35页 |
1 过氧化氢酶研究概况 | 第10-11页 |
2 过氧化氢酶的分类 | 第11-16页 |
·单功能含血红素过氧化氢酶类(典型过氧化氢酶类) | 第12-13页 |
·过氧化氢酶一过氧化物酶类 | 第13-15页 |
·含锰过氧化氢酶 | 第15-16页 |
3 过氧化氢酶在自然界的分布和对生物机体的生理作用 | 第16-17页 |
4 过氧化氢酶的晶体结构 | 第17-19页 |
·过氧化氢酶单体结构 | 第17页 |
·过氧化氢酶四聚体的四级结构 | 第17-18页 |
·血红素辅基及其周围基团 | 第18-19页 |
5 过氧化氢酶的催化机制 | 第19-20页 |
6 过氧化氢酶催化过程中的电子转移以及NADPH的作用 | 第20-23页 |
·NADPH与典型过氧化氢酶结合的方式 | 第20-23页 |
·NADPH在过氧化氢酶催化机制中的作用 | 第23页 |
7 过氧化氢酶和超氧化物歧化酶 | 第23-26页 |
·超氧阴离子自由基的毒性作用 | 第23-25页 |
·超氧化物歧化酶对体内超氧阴离子自由基的清除 | 第25-26页 |
·过氧化氢酶和超氧化物歧化酶相互作用的研究 | 第26页 |
8 荧光光谱在蛋白质分子构象研究中的应用 | 第26-27页 |
9 微量热法在蛋白质研究中的应用 | 第27-31页 |
·微量热法在蛋白质去折叠/折叠研究中的应用 | 第28-30页 |
·微量热法在蛋白质-蛋白质相互作用研究中的应用 | 第30-31页 |
10 生物传感器在研究蛋白质与蛋白质相互作用中的应用 | 第31-33页 |
11 本课题的研究内容及其意义 | 第33-35页 |
二、 材料与方法 | 第35-45页 |
1 试剂与材料 | 第35页 |
2 实验仪器 | 第35页 |
3 实验方法 | 第35-45页 |
·不同浓度变性剂对过氧化氢酶的变性 | 第35-36页 |
·盐酸胍诱导过氧化氢酶去折叠的紫外光谱研究 | 第36页 |
·不同浓度变性剂对过氧化氢酶活力的影响 | 第36页 |
·不同浓度脲和盐酸胍诱导过氧化氢酶去折叠的荧光光谱研究 | 第36-40页 |
·内源荧光发射光谱研究 | 第36-37页 |
·同步荧光光谱研究盐酸胍诱导过氧化氢酶去折叠 | 第37-38页 |
·荧光偏振法研究脲和盐酸胍诱导过氧化氢酶去折叠 | 第38-39页 |
·荧光相图法研究有还原剂存在时脲诱导溶菌酶去折叠 | 第39-40页 |
·荧光相图法研究脲和盐酸胍诱导过氧化氢酶去折叠 | 第40页 |
·等温滴定量热法研究低浓度盐酸胍对过氧化氢酶的变性作用 | 第40-42页 |
·低浓度盐酸胍诱导蛋白质形成中间态的热力学模型 | 第40-41页 |
·低浓度盐酸胍诱导过氧化氢酶形成中间态的等温滴定量热实验 | 第41-42页 |
·过氧化氢酶与超氧化物歧化酶作用的等温滴定量热实验 | 第42页 |
·过氧化氢酶与超氧化物歧化酶作用的荧光滴定实验 | 第42-43页 |
·过氧化氢酶与超氧化物歧化酶作用的共振镜生物传感器实验 | 第43-45页 |
·缓冲溶液的配制 | 第43页 |
·超氧化物歧化酶的固定 | 第43-44页 |
·过氧化氢酶与固定在芯片上的超氧化物歧化酶的结合反应 | 第44-45页 |
三、 结果 | 第45-59页 |
1 盐酸胍变性的过氧化氢酶的紫外光谱 | 第45页 |
2 不同浓度盐酸胍和脲中过氧化氢酶的残余活力研究 | 第45-46页 |
3 有还原剂存在时脲诱导溶菌酶去折叠的研究 | 第46页 |
4 同步荧光光谱研究盐酸胍对过氧化氢酶的变性作用 | 第46-48页 |
5 盐酸胍诱导过氧化氢酶去折叠的内源荧光研究 | 第48-50页 |
6 脲诱导过氧化氢酶去折叠的内源荧光研究 | 第50-53页 |
7 低浓度盐酸胍诱导过氧化氢酶形成中间态的热力学研究 | 第53-55页 |
8 荧光滴定法研究过氧化氢酶和超氧化物歧化酶相互作用的热力学 | 第55页 |
9 等温滴定量热法研究过氧化氢酶与超氧化物歧化酶相互作用的热力学 | 第55-57页 |
10 共振镜生物传感器法研究过氧化氢酶与超氧化物歧化酶相互作用的热力学和动力学 | 第57-59页 |
四、 讨论 | 第59-66页 |
1 乙醇对过氧化氢酶活性与构象的影响 | 第59-60页 |
2 温度诱导过氧化氢酶去折叠 | 第60页 |
3 过氧化氢酶Ⅰ从低催化活性形式向高催化活性形式的热转变 | 第60-61页 |
4 过氧化氢酶活性部位的柔性 | 第61页 |
5 脲和盐酸胍对过氧化氢酶的变性作用 | 第61页 |
6 蛋白质的内源荧光变化 | 第61-62页 |
7 过氧化氢酶的复性 | 第62页 |
8 脲和盐酸胍诱导蛋白质去折叠及其稳定和激活蛋白质机制的比较 | 第62-63页 |
9 盐酸胍的稀释热 | 第63页 |
10 低浓度盐酸胍诱导过氧化氢酶形成中间态的热力学 | 第63-64页 |
11 超氧化物歧化酶结合了过氧化氢酶以后性质的变化 | 第64页 |
12 三种方法研究过氧化氢酶与超氧化物歧化酶相互作用的比较 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-80页 |
在读期间发表和待发表的论文目录 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |