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小麦光周期相关cDNA片段的克隆及鉴定

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-8页
英文缩略表第8-10页
1 引言第10-20页
 1.1 拟南芥中调控开花时间的信号途径第10-17页
  1.1.1 光周期促进途径第10-13页
  1.1.2 春化促进途径第13-14页
  1.1.3 自主促进途径第14-15页
  1.1.4 GA途径第15-17页
 1.2 mRNA差异显示技术应用第17-19页
  1.2.1 基因表达第18页
  1.2.2 植物的发育及抗性第18页
  1.2.3 基因的鉴定与克隆第18-19页
 1.3 本研究的目的及意义第19-20页
2 材料与方法第20-32页
 2.1 材料第20-22页
  2.1.1 植物材料第20页
  2.1.2 菌株质粒第20-21页
  2.1.3 酶与生化试剂第21页
  2.1.4 试剂盒第21页
  2.1.5 DDRT-PCR引物第21-22页
 2.2 实验方法第22-32页
  2.2.1 DDRT-PCR第22-23页
  2.2.2 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第23-24页
  2.2.3 染色第24-25页
  2.2.4 回收差异带第25页
  2.2.5 差异带的二次PCR及电泳检测第25-26页
  2.2.6 反向Northern点杂交第26页
  2.2.7 阳性带的克隆第26-28页
  2.2.8 Northern杂交第28-30页
  2.2.9 Southern杂交第30-32页
3 结果与分析第32-42页
 3.1 mRNA差异显示第32-35页
  3.1.1 RNA的提取第32页
  3.1.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳第32-33页
  3.1.3 差异带二次PCR第33-34页
  3.1.4 差异带的反向Northern点杂交第34-35页
 3.2 差异带的克隆及序列分析第35-42页
  3.2.1 重组质粒酶切鉴定第35-36页
  3.2.2 序列测定和分析第36-38页
  3.2.3 TaCOL部分5'端的获得第38-39页
  3.2.4 TaCOL的表达分析第39-42页
4 讨论第42-46页
 4.1 mRNA差异显示过程中一些问题的探讨第42-44页
  4.1.1 RNA的提取与反转录第42页
  4.1.2 PCR扩增条件第42页
  4.1.3 引物选择的偏爱性第42页
  4.1.4 DDRT-PCR扩增产物的显示、回收、再扩增第42-43页
  4.1.5 差异cDNA片段的验证第43-44页
 4.2 TaCOL的表达特点及其代表基因的可能功能第44-46页
5 结论第46-47页
参考文献第47-55页
附录第55-58页

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