中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第8-10页 |
1 引言 | 第10-20页 |
1.1 拟南芥中调控开花时间的信号途径 | 第10-17页 |
1.1.1 光周期促进途径 | 第10-13页 |
1.1.2 春化促进途径 | 第13-14页 |
1.1.3 自主促进途径 | 第14-15页 |
1.1.4 GA途径 | 第15-17页 |
1.2 mRNA差异显示技术应用 | 第17-19页 |
1.2.1 基因表达 | 第18页 |
1.2.2 植物的发育及抗性 | 第18页 |
1.2.3 基因的鉴定与克隆 | 第18-19页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-32页 |
2.1 材料 | 第20-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 菌株质粒 | 第20-21页 |
2.1.3 酶与生化试剂 | 第21页 |
2.1.4 试剂盒 | 第21页 |
2.1.5 DDRT-PCR引物 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-32页 |
2.2.1 DDRT-PCR | 第22-23页 |
2.2.2 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23-24页 |
2.2.3 染色 | 第24-25页 |
2.2.4 回收差异带 | 第25页 |
2.2.5 差异带的二次PCR及电泳检测 | 第25-26页 |
2.2.6 反向Northern点杂交 | 第26页 |
2.2.7 阳性带的克隆 | 第26-28页 |
2.2.8 Northern杂交 | 第28-30页 |
2.2.9 Southern杂交 | 第30-32页 |
3 结果与分析 | 第32-42页 |
3.1 mRNA差异显示 | 第32-35页 |
3.1.1 RNA的提取 | 第32页 |
3.1.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第32-33页 |
3.1.3 差异带二次PCR | 第33-34页 |
3.1.4 差异带的反向Northern点杂交 | 第34-35页 |
3.2 差异带的克隆及序列分析 | 第35-42页 |
3.2.1 重组质粒酶切鉴定 | 第35-36页 |
3.2.2 序列测定和分析 | 第36-38页 |
3.2.3 TaCOL部分5'端的获得 | 第38-39页 |
3.2.4 TaCOL的表达分析 | 第39-42页 |
4 讨论 | 第42-46页 |
4.1 mRNA差异显示过程中一些问题的探讨 | 第42-44页 |
4.1.1 RNA的提取与反转录 | 第42页 |
4.1.2 PCR扩增条件 | 第42页 |
4.1.3 引物选择的偏爱性 | 第42页 |
4.1.4 DDRT-PCR扩增产物的显示、回收、再扩增 | 第42-43页 |
4.1.5 差异cDNA片段的验证 | 第43-44页 |
4.2 TaCOL的表达特点及其代表基因的可能功能 | 第44-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
附录 | 第55-58页 |