| 1． 引言 | 第1-27页 |
| 1．1 马铃薯Y病毒属病毒与植物互作的分子生物学研究进展 | 第9-15页 |
| 1．1．1 基因组的结构与表达 | 第9-11页 |
| 1．1．2 系统侵染 | 第11-13页 |
| 1．1．3 病毒的传播 | 第13页 |
| 1．1．4 植物的症状表现及对病毒的抗性 | 第13-15页 |
| 1．2 植物抗病毒基因工程研究进展 | 第15-21页 |
| 1．2．1 利用病毒来源的基因获得抗病毒转基因植株 | 第15-19页 |
| 1．2．2 利用非病毒来源的基因获得病毒抗性 | 第19-21页 |
| 1．3 转基因植物中RNA介导的病毒抗性 | 第21-23页 |
| 1．3．1 RNA介导的病毒抗性的特点 | 第21页 |
| 1．3．2 RNA介导抗性的分子基础 | 第21-23页 |
| 1．4 马铃薯抗病毒基因工程研究进展 | 第23-25页 |
| 1．4．1 病毒来源的马铃薯转基因研究情况 | 第23-25页 |
| 1．4．2 非病毒来源的马铃薯抗病毒基因工程研究进展 | 第25页 |
| 1．5 本研究的立论依据和主要研究内容 | 第25-27页 |
| 2． 材料与方法 | 第27-40页 |
| 2．1 材料 | 第27-28页 |
| 2．1．1 供试植物病毒 | 第27页 |
| 2．1．2 供试植物 | 第27页 |
| 2．1．3 供试传毒介体 | 第27页 |
| 2．1．4 实验菌株与克隆载体质粒 | 第27-28页 |
| 2．1．5 PCR引物 | 第28页 |
| 2．1．6 酶、试剂及仪器 | 第28页 |
| 2．1．7 培养基 | 第28页 |
| 2．2 方法 | 第28-40页 |
| 2．2．1 马铃薯Y病毒山东分离物生物学特性的研究及株系鉴定 | 第28-29页 |
| 2．2．2 马铃薯Y病毒的提纯 | 第29-30页 |
| 2．2．3 病毒粒体组织超薄切片观察 | 第30页 |
| 2．2．4 马铃薯Y病毒RNA的提取 | 第30页 |
| 2．2．5 在含有甲醛的凝胶上进行电泳 | 第30-32页 |
| 2．2．6 SDS-PAGE检测病毒外壳蛋白亚基的分子量 | 第32-33页 |
| 2．2．7 马铃薯Y病毒抗血清的制备 | 第33-34页 |
| 2．2．8 免疫球蛋白的纯化 | 第34页 |
| 2．2．9 ELISA检测方法 | 第34-35页 |
| 2．2．10 马铃薯Y病毒山东分离物外壳蛋白基因的克隆 | 第35-39页 |
| 2．2．11 免疫型转基因烟草对PVY~N和PVY-SD抗病性比较 | 第39页 |
| 2．2．12 山东省内马铃薯上马铃薯Y病毒田间发病率调查 | 第39-40页 |
| 3． 结果与分析 | 第40-60页 |
| 3．1 马铃薯Y病毒山东分离物生物学特性的研究 | 第40-42页 |
| 3．1．1 病毒分离物的获得 | 第40页 |
| 3．1．2 寄主范围的测定 | 第40-42页 |
| 3．1．3 病毒分离物体外抗性的测定 | 第42页 |
| 3．1．4 蚜虫传毒特性的研究 | 第42页 |
| 3．2 病毒的提纯和粒体大小 | 第42页 |
| 3．3 病毒粒体超薄切片观察 | 第42-43页 |
| 3．4 病毒RNA的提取 | 第43页 |
| 3．5 RNA甲醛变性凝胶电泳 | 第43页 |
| 3．6 SDS-PAGE测定病毒外壳蛋白亚基的分子量 | 第43-44页 |
| 3．7 PVY抗血清纯化的免疫球蛋白工作浓度的选择 | 第44-45页 |
| 3．8 PVY抗血清对烟草病汁液灵敏度测定 | 第45页 |
| 3．9 RT-PCR扩增PVY外壳蛋白基因 | 第45-46页 |
| 3．10 质粒pUCl9与RT-PCR扩增目的片段的酶切电泳 | 第46-47页 |
| 3．11 外源DNA与质粒在载体的连接及向大肠杆菌中的转化 | 第47-48页 |
| 3．12 重组质粒的酶切鉴定 | 第48-50页 |
| 3．13 cDNA的序列测定 | 第50-51页 |
| 3．14 PVY-SDCP基因序列与已报道的PVY的CP基因同源性比较 | 第51-52页 |
| 3．15 PVY系统树的绘制 | 第52-57页 |
| 3．16 TO代免疫型转基因烟草植株对PVY~N和PVY-SD抗病性比较 | 第57-58页 |
| 3．17 马铃薯Y病毒田间带毒率的调查 | 第58-60页 |
| 4． 讨论 | 第60-63页 |
| 4．1 马铃薯Y病毒山东分离物（PVY-SD）株系鉴定 | 第60页 |
| 4．2 关于马铃薯Y病毒的提纯问题 | 第60页 |
| 4．3 马铃薯Y病毒及其检测技术 | 第60-61页 |
| 4．4 PVY-SD外壳蛋白基因的克隆和序列分析 | 第61页 |
| 4．5 TO代免疫转基因烟草植株对PVY~N和PVY-SD抗病性比较 | 第61-62页 |
| 4．6 对山东省马铃薯田间PVY带毒率的初步调查 | 第62-63页 |
| 5． 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 英文摘要 | 第72-74页 |
| 附录 | 第74-84页 |
