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脊髓灰质炎病毒壳体蛋白热动力学分析与缺陷型重组载体的构建研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-11页
前言第11-21页
第一部分 脊髓灰质炎病毒VP4结构蛋白热动力学性质及其在进入细胞过程的作用分析第21-54页
 1 引言第22-24页
 2 材料和方法第24-30页
   ·细胞及培养基第24-25页
   ·病毒生长及纯化第25页
   ·135S颗粒的制备第25-26页
   ·细胞破碎液第26页
   ·中和试验第26-27页
   ·VP4、VP1和pep1抗原合成第27页
   ·抗血清第27-28页
   ·免疫沉淀第28-29页
   ·Western免疫印迹分析第29页
   ·病毒吸附、进入细胞并感染细胞的样品收集处理第29-30页
 3 结果第30-45页
   ·VP4和VP1抗血清的特异性第30-31页
   ·VP4和VP1抗血清中和病毒的活性第31-32页
   ·中和作用的温度依赖性第32-33页
   ·中和作用是VP4和pep1结构在37℃时间向外暴露的结果第33-37页
   ·病毒构象变化的可逆性第37-38页
   ·病毒感染细胞后,其毒粒群体的分布第38-39页
   ·不同分布的病毒颗粒在不同时相的变化第39-43页
   ·细胞外和细胞膜上病毒颗粒的壳蛋白组成第43-45页
 4 讨论第45-53页
 5 结论第53-54页
第二部分 脊髓灰质炎病毒缺陷型重组载体的构建研究第54-79页
 1 引言第55-60页
 2 材料和方法第60-67页
   ·质粒第60-62页
   ·细胞与病毒第62页
   ·重组质粒的构建第62-65页
   ·质粒对细胞的转染及重组病毒的标记第65-66页
   ·共转染后缺陷型病毒颗粒的形成分析第66页
   ·DNA测序分析第66页
   ·Western免疫印迹分析第66-67页
 3 结果第67-75页
   ·瞬时表达系统Ⅰ第67-74页
     ·质粒构建第67-69页
     ·脊灰病毒壳蛋白P1和嵌有HBS基因的脊灰病毒复制酶系统基因在Hela细胞中的单独表达第69-70页
     ·共转染后不同孵育时间的Hela细胞中缺陷型重组病毒颗粒形成率的分析第70-72页
     ·缺陷型重组病毒颗粒的确定第72-73页
     ·缺陷型重组病毒颗粒感染细胞后HBS抗原的表第73-74页
   ·瞬时表达系统Ⅱ第74-75页
     ·质粒的构建第74页
     ·CHO-表达PV中P1蛋白的细胞系已初步建成第74-75页
 4 讨论第75-78页
 5 结论第78-79页
参考文献第79-82页
致谢第82-83页
附件:已发表的三篇相关论文及综述第83-98页

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