| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 1 引言 | 第11-14页 |
| 2 实验材料 | 第14-17页 |
| ·主要仪器设备及材料 | 第14-15页 |
| ·主要实验试剂 | 第15-17页 |
| 3 实验方法 | 第17-40页 |
| 第一部分 Cpn 真核表达重组体的构建及鉴定 | 第17-30页 |
| ·真核表达重组体pcDNA3.1(+)-MOMP 的构建及鉴定 | 第17-22页 |
| ·真核表达重组体pcDNA3.1(+)-IL-2 的构建及鉴定 | 第22-25页 |
| ·真核表达重组体pcDNA3.1(+)-MOMP-IL-2 的构建及鉴定 | 第25-30页 |
| 第二部分 原核表达重组体的构建及鉴定 | 第30-35页 |
| ·原核表达pET-30a/MOMP、pET-30a/IL-2 及 pET-30a | 第30-32页 |
| ·原核重组蛋白抗原的制备 | 第32-35页 |
| 第三部分 MOMP 单基因核酸疫苗和MOMP-IL-2 融合核酸疫苗免疫活性的比较研究 | 第35-40页 |
| ·核酸疫苗的制备及纯化 | 第35-36页 |
| ·核酸疫苗的免疫接种 | 第36-37页 |
| ·免疫活性评价 | 第37-40页 |
| 4 实验结果 | 第40-50页 |
| 第一部分 Cpn 真核表达载体的构建及鉴定 | 第40-50页 |
| 1 目的基因的PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·Cpn MOMP 基因及L-MOMP 的 PCR 扩增 | 第40页 |
| ·人IL-2 基因及 IL-2-L 的 PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·融合基因MOMP-IL-2 的 PCR 扩增 | 第41页 |
| 2 真核重组质粒的构建及鉴定 | 第41-43页 |
| ·真核重组质粒的PCR 及双酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·真核重组质粒测序及比对分析 | 第42-43页 |
| 3 原核表达重组体的构建、表达及鉴定 | 第43-45页 |
| ·原核重组体的PCR 及双酶切鉴定 | 第43页 |
| ·原核重组体在E.coli BL21 中的表达 | 第43-44页 |
| ·原核重组蛋白的Western blot 鉴定 | 第44页 |
| ·重组蛋白MOMP 的初步纯化 | 第44-45页 |
| 4 真核表达载体pcDNA3.1(+)/MOMP、pcDNA3.1(+)/ MOMP-IL-2 在小鼠组织内的表达 | 第45-46页 |
| 5 pcDNA3.1(-)/MOMP核酸疫苗免疫活性的初步研究 | 第46-49页 |
| ·血清特异性抗体的检测 | 第46-47页 |
| ·细胞免疫水平检测 | 第47-49页 |
| 6 PCR 检测MOMP 基因在BALB/c 小鼠肌细胞中存在 | 第49-50页 |
| 5 讨论 | 第50-53页 |
| 6 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录 | 第58-68页 |
| 文献综述 | 第68-73页 |
| 研究成果及发表论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
