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绵羊毛囊培养方法的建立及雌二醇对毛囊Bcl-2、Bax表达的影响

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
1 引言第11-45页
   ·毛囊结构研究的进展第11-25页
     ·毛囊的基本结构第11页
     ·毛囊的组织发生第11-13页
     ·毛与毛囊的周期性变化第13-14页
     ·影响毛囊生长相关因子的研究进展第14-18页
     ·毛囊干细胞的研究进展第18-20页
     ·毛囊体外培养的研究现状第20-22页
     ·毛囊的分离方法第22页
     ·毛囊的培养第22-24页
     ·毛囊体外培养主要的研究模型第24-25页
   ·毛囊体外培养研究的价值及前景第25-27页
     ·离体毛囊体外培养的应用第26页
     ·离体毛囊体外培养在雄激素源性脱发治疗中的应用第26页
     ·离体毛囊体外培养在痤疮治疗中的应用第26-27页
   ·毛囊体外培养的研究要解决的问题第27-28页
   ·毛囊细胞凋亡的研究进展第28-31页
     ·细胞凋亡的研究第28页
     ·细胞凋亡的基因调控第28-31页
   ·毛囊细胞凋亡的研究现状及研究意义第31-34页
   ·PCR 技术进展第34-38页
     ·定量PCR 方法研究进展第35-36页
     ·竞争性RT-PCR 方法原理第36-37页
     ·基因组文库第37页
     ·cDNA 基因文库第37-38页
     ·PCR 法分离目的基因第38页
   ·定量PCR第38-42页
     ·常用的实时定量PCR 方法第39-41页
     ·影响QRTPCR 的因素第41-42页
     ·Ct 值第42页
   ·RT-PCR 简介第42-43页
     ·RT-PCR 引物的选择第43页
     ·RT-PCR 影响因素第43页
   ·我们开展绵羊皮肤毛囊培养的目的与意义第43-45页
2 实验一不同培养条件对体外培养绵羊毛囊生长的影响第45-67页
   ·材料与方法第45页
     ·材料第45页
     ·实验药品与试剂第45页
     ·仪器设备第45页
   ·实验方法第45-48页
     ·溶液的配置第46页
     ·绵羊皮肤毛囊的分离第46-47页
     ·Sacpic 染色第47-48页
     ·绵羊皮肤毛囊HE 染色第48页
   ·实验结果第48-64页
     ·培养毛囊的形态观察第48-61页
     ·培养毛囊的组织结构观察第61-64页
   ·讨论第64-66页
     ·能挑选出完好无损健康的生长期毛囊是体外培养毛囊研究的首要问题第64页
     ·绵羊皮肤毛囊培养液的选择是体外培养毛囊研究的核心问题第64页
     ·绵羊皮肤毛囊培养液相关因子的加入第64-65页
     ·绵羊皮肤毛囊培养条件的选择第65页
     ·毛囊的体外生长特点的分析第65-66页
   ·结论第66-67页
3 实验二17-β-雌二醇对体外培养毛囊生长影响的形态学上的观察第67-83页
   ·材料与方法第67-68页
     ·材料第67页
     ·仪器与主要试剂第67-68页
   ·实验方法第68-69页
     ·溶液的配置第68页
     ·绵羊皮肤毛囊的分离第68-69页
   ·实验结果第69-81页
     ·培养毛囊的形态观察第69-79页
     ·不同浓度17-β-雌二醇组与对照组之间的对比观察结果第79-81页
   ·讨论第81-82页
     ·生理状态下雌激素和实验中 17-β-雌二醇的浓度确定第81页
     ·雌激素对毛囊和毛发生长的影响第81页
     ·雄激素对毛囊和毛发生长的影响第81-82页
   ·结论第82-83页
4 实验三 蒙古绵羊皮肤毛囊 Bcl-2、Bax 基因表达第83-91页
   ·材料与方法第83-86页
     ·实验动物及组织第83页
     ·主要仪器和试剂第83页
     ·PCR 引物的设计及合成第83-84页
     ·蒙古绵羊皮肤毛囊群总 RNA 的提取及检测第84-86页
     ·RT-PCR 产物 cDNA 的序列测定第86页
     ·序列分析第86页
   ·结果第86-89页
     ·蒙古绵羊皮肤毛囊总 RNA 的检测结果第86页
     ·蒙古绵羊皮肤毛囊 RT-PCR 扩增结果第86-88页
     ·蒙古绵羊皮肤毛囊 PCR 产物的序列分析结果第88-89页
   ·讨论第89-90页
     ·Bcl-2、Bax 的表达第89-90页
     ·蒙古绵羊皮肤毛囊 Bcl-2、Bax 基因表达情况第90页
     ·提取样品总RNA 时注意的问题第90页
   ·结论第90-91页
5 实验四 实时定量 PCR 检测 17-β-雌二醇对培养毛囊 Bcl-2、Bax 表达的影响第91-113页
   ·材料和方法第92-93页
     ·实验材料处理同本论文4.1.1第92页
     ·实验材料第92-93页
     ·仪器及试剂第93页
     ·PCR 引物的设计及合成第93页
   ·实验设计第93-98页
     ·添加雌激素 17-β-雌二醇第93页
     ·毛囊总RNA 的提取第93-94页
     ·荧光定量 RT-PCR 检测培养的毛囊 Bcl-2、Bax 表达的定量方法第94-98页
   ·结果第98-108页
     ·荧光定量 RT-PCR 检测培养的毛囊 Bcl-2、Bax 表达定量方法的确定第98-103页
     ·添加 17-β-雌二醇对培养毛囊 Bcl-2 和 Bax 表达的影响第103-108页
   ·讨论第108-112页
     ·毛囊群的培养第108-109页
     ·Bcl-2 的表达第109页
     ·Bax 的表达第109-110页
     ·Bcl-2、Bax 基因在毛囊中表达的意义第110-111页
     ·PCR 反应体系的探讨第111-112页
   ·结论第112-113页
6 全文总结第113-114页
致谢第114-115页
参考文献第115-133页
附录第133-136页
作者简介第136页

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