| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 符号与缩略语说明 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| 1. α-半乳糖苷酶的研究进展 | 第11-22页 |
| ·α-半乳糖苷酶的概述 | 第11页 |
| ·α-半乳糖苷酶的来源 | 第11-13页 |
| ·α-半乳糖苷酶的酶学特性 | 第13-16页 |
| ·α-半乳糖苷酶催化的底物专一性 | 第13-14页 |
| ·α-半乳糖苷酶的转移酶活性 | 第14页 |
| ·α-半乳糖苷酶活测定方法 | 第14-15页 |
| ·α-半乳糖苷酶的性质差异 | 第15-16页 |
| ·α-半乳糖苷酶的分类 | 第16-18页 |
| ·α-半乳糖苷酶的分子特性 | 第18-19页 |
| ·α-半乳糖苷酶的表达与调控 | 第19-20页 |
| ·α-半乳糖苷酶的结构与功能 | 第20-22页 |
| ·α-半乳糖苷酶基因的表达系统 | 第22页 |
| 2. α-半乳糖苷酶的应用 | 第22-27页 |
| ·α-半乳糖苷酶的医学研究进展 | 第22-24页 |
| ·α-半乳糖苷酶与Fabry疾病的研究进展 | 第22-23页 |
| ·α-半乳糖苷酶与血型转换的研究进展 | 第23-24页 |
| ·α-半乳糖苷酶与异种器官移植的研究进展 | 第24页 |
| ·α-半乳糖苷酶在食品工业上的应用 | 第24-25页 |
| ·α-半乳糖苷酶在豆粕饲料中的应用 | 第25-27页 |
| 第二章 α-半乳糖苷酶的乳酸菌筛选及其酶的特性研究 | 第27-39页 |
| 1. 材料与方法 | 第27-30页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·菌株 | 第27页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第27页 |
| ·培养基成分及培养条件 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-30页 |
| ·产α-半乳糖苷酶菌株的筛选 | 第28页 |
| ·α-半乳糖苷酶性质的测定 | 第28-29页 |
| ·产酶菌株产酸能力测定 | 第29-30页 |
| ·高产酶菌株的α-半乳糖苷酶温度及pH稳定性研究 | 第30页 |
| ·金属离子对高产酶菌株α-半乳糖苷酶的影响 | 第30页 |
| 2 实验结果与分析 | 第30-37页 |
| ·产酶菌株的筛选 | 第30-31页 |
| ·六株菌α-半乳糖苷酶特性研究 | 第31-34页 |
| ·α-半乳糖苷酶酶活的计算公式 | 第31-32页 |
| ·α-半乳糖苷酶的最适反应温度 | 第32-33页 |
| ·α-半乳糖苷酶的最适pH值 | 第33-34页 |
| ·产酸能力 | 第34-35页 |
| ·高产酶菌株g4-1α-半乳糖苷酶的pH和温度的稳定性 | 第35-36页 |
| ·金属离子对高产酶菌株g4-1α-半乳糖苷酶活性的影响 | 第36-37页 |
| 3. 本章小结与讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 干酪乳杆菌α-半乳糖苷酶基因的克隆及其表达 | 第39-58页 |
| 1. 材料与方法 | 第39-47页 |
| ·实验材料 | 第39-41页 |
| ·菌种 | 第39页 |
| ·质粒 | 第39页 |
| ·引物合成 | 第39-40页 |
| ·试剂盒,工具酶和试剂 | 第40-41页 |
| ·仪器 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-47页 |
| ·乳酸菌总DNA的提取 | 第41页 |
| ·α-半乳糖苷酶基因片段的扩增 | 第41-42页 |
| ·aga/基因PCR产物电泳及回收纯化 | 第42-43页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第43页 |
| ·TA克隆 | 第43-45页 |
| ·pET29a-aga/表达系统的构建 | 第45-47页 |
| ·pET-29a-aga/的重组表达 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-58页 |
| ·干酪乳杆菌g4-1总DNA的提取 | 第47-48页 |
| ·aga Ⅰ基因的TA克隆 | 第48-52页 |
| ·aga Ⅰ基因的PCR扩增 | 第48-49页 |
| ·TA克隆 | 第49-50页 |
| ·测序分析 | 第50-52页 |
| ·表达系统pET-29a-aga/的构建 | 第52-56页 |
| ·目标条带的酶切回收 | 第52页 |
| ·表达载体pET-29a的连接转化 | 第52-54页 |
| ·pET-29a-aga/阳性克隆的验证 | 第54-56页 |
| ·阳性克隆pET-29a-aga/的诱导表达 | 第56页 |
| ·阳性克隆pET-29a-aga/的低温诱导表达 | 第56-58页 |
| ·SDS-PAGE蛋白质电泳检测 | 第57-58页 |
| ·α -半乳糖苷酶酶活力测定活性测定 | 第58页 |
| 3. 本章小结 | 第58页 |
| 全文参考文献 | 第58-65页 |
| 全文结论 | 第65-67页 |
| 创新之处 | 第67-69页 |
| 存在问题与展望 | 第69-71页 |
| 附录:agaI序列 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
