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CHIP促进心肌素泛素化和降解及抑制平滑肌细胞分化的分子机理

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
前言第8-13页
材料与方法第13-41页
 1 材料第13-22页
   ·原代细胞和细胞系第13页
   ·菌株第13页
   ·质粒第13-14页
   ·抗体第14页
   ·培养基、试剂盒和主要试剂第14-16页
   ·主要溶液的配制第16-19页
   ·引物序列和siRNA序列第19-20页
   ·主要仪器设备第20-22页
 2 实验方法第22-41页
   ·质粒的构建第22-26页
   ·原代SMC和细胞系的复苏、培养、传代和冻存第26-27页
   ·转染和感染第27-28页
   ·RT-PCR检测基因的表达量第28-31页
   ·Western blotting第31-35页
   ·免疫共沉淀第35页
   ·免疫组织化学第35-36页
   ·GST重组蛋白的表达及纯化第36-37页
   ·体外泛素化反应第37-38页
   ·体内泛素化反应第38页
   ·荧光素酶活性检测系统第38-39页
   ·大鼠胸主动脉病毒感染及血管环舒缩功能的测定第39-41页
实验结果第41-53页
   ·CHIP通过降解心肌素蛋白而抑制其依赖的平滑肌细胞标志基因的表达第41-43页
   ·CHIP siRNA增强心肌素依赖的SMC收缩基因的表达和转录活性第43-44页
   ·明确CHIP与心肌素之间的相互作用第44-46页
   ·鉴定CHIP与心肌素相互作用的结构域第46-47页
   ·CHIP促进心肌素的泛素化和降解第47-49页
   ·CHIP泛素化和降解心肌素依赖于其磷酸化第49-50页
   ·CHIP抑制了血管平滑肌收缩基因的表达和血管的收缩舒张功能第50-53页
讨论第53-58页
小结第58-59页
参考文献第59-63页
附录第63-85页
 1 英文名词及缩写第63-65页
 2 发表的文章第65-74页
 3 综述第74-82页
  参考文献第79-82页
 4 致谢第82-83页
 5 个人简历第83-85页

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