中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
前言 | 第8-13页 |
材料与方法 | 第13-41页 |
1 材料 | 第13-22页 |
·原代细胞和细胞系 | 第13页 |
·菌株 | 第13页 |
·质粒 | 第13-14页 |
·抗体 | 第14页 |
·培养基、试剂盒和主要试剂 | 第14-16页 |
·主要溶液的配制 | 第16-19页 |
·引物序列和siRNA序列 | 第19-20页 |
·主要仪器设备 | 第20-22页 |
2 实验方法 | 第22-41页 |
·质粒的构建 | 第22-26页 |
·原代SMC和细胞系的复苏、培养、传代和冻存 | 第26-27页 |
·转染和感染 | 第27-28页 |
·RT-PCR检测基因的表达量 | 第28-31页 |
·Western blotting | 第31-35页 |
·免疫共沉淀 | 第35页 |
·免疫组织化学 | 第35-36页 |
·GST重组蛋白的表达及纯化 | 第36-37页 |
·体外泛素化反应 | 第37-38页 |
·体内泛素化反应 | 第38页 |
·荧光素酶活性检测系统 | 第38-39页 |
·大鼠胸主动脉病毒感染及血管环舒缩功能的测定 | 第39-41页 |
实验结果 | 第41-53页 |
·CHIP通过降解心肌素蛋白而抑制其依赖的平滑肌细胞标志基因的表达 | 第41-43页 |
·CHIP siRNA增强心肌素依赖的SMC收缩基因的表达和转录活性 | 第43-44页 |
·明确CHIP与心肌素之间的相互作用 | 第44-46页 |
·鉴定CHIP与心肌素相互作用的结构域 | 第46-47页 |
·CHIP促进心肌素的泛素化和降解 | 第47-49页 |
·CHIP泛素化和降解心肌素依赖于其磷酸化 | 第49-50页 |
·CHIP抑制了血管平滑肌收缩基因的表达和血管的收缩舒张功能 | 第50-53页 |
讨论 | 第53-58页 |
小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
附录 | 第63-85页 |
1 英文名词及缩写 | 第63-65页 |
2 发表的文章 | 第65-74页 |
3 综述 | 第74-82页 |
参考文献 | 第79-82页 |
4 致谢 | 第82-83页 |
5 个人简历 | 第83-85页 |