| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 引言 | 第11-21页 |
| ·前言 | 第11-12页 |
| ·绵羊多脊椎性状概述 | 第12-13页 |
| ·国外动物多脊椎现象的研究概况 | 第13-15页 |
| ·转化生长因子β家族及ActRIIB 基因与脊椎数的关系研究进展 | 第13-14页 |
| ·同源盒家族基因概况 | 第14-15页 |
| ·国内动物多脊椎性状研究进展 | 第15-16页 |
| ·该论文中基因的研究进展 | 第16-18页 |
| ·B 细胞易位基因2 | 第16-17页 |
| ·生殖细胞核因子 | 第17-18页 |
| ·试验中所涉及的分子标记方法 | 第18-20页 |
| ·单核苷酸多态性 | 第18页 |
| ·限制性片段长度多态性 | 第18-19页 |
| ·单链构象多态性 | 第19页 |
| ·单体型分析 | 第19-20页 |
| ·本研究的意义和主要内容 | 第20-21页 |
| ·本研究的意义 | 第20页 |
| ·本研究的主要内容 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·试验材料 | 第21-23页 |
| ·试验绵羊来源及采样方法 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·主要分析工具软件 | 第22页 |
| ·药品和酶 | 第22页 |
| ·溶液试剂配制 | 第22-23页 |
| ·试验方法和步骤 | 第23-31页 |
| ·绵羊肌肉和血液中DNA 的提取和检测 | 第23-25页 |
| ·从绵羊肌肉中提取DNA 的步骤 | 第23-24页 |
| ·提取基因组DNA 的OD 测定 | 第24页 |
| ·基因组DNA 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第24-25页 |
| ·Bt92 基因的单核苷酸多态性分析 | 第25-28页 |
| ·Bt92 基因的引物设计 | 第25-26页 |
| ·最佳PCR 条件的建立 | 第26页 |
| ·琼脂糖凝胶检测 | 第26-27页 |
| ·Bt92 基因突变位点的限制性酶切（RFLP）分析 | 第27-28页 |
| ·NR6A1 基因单核苷酸多态性分析 | 第28-31页 |
| ·引物设计及PCR 反应条件 | 第28-29页 |
| ·NR6A1 基因扩增产物SSCP 最佳条件的建立 | 第29-30页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳及染色 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-43页 |
| ·绵羊肌肉样品基因组DNA 的提取结果 | 第31页 |
| ·BTG2 基因的多态性分析 | 第31-37页 |
| ·Bt92 基因序列比对分析 | 第31-32页 |
| ·Bt92 基因突变位点的PCR 扩增 | 第32-33页 |
| ·Bt92 基因A150G 位点的多态性分析 | 第33-34页 |
| ·A150G 位点PCR-RFLP 分析 | 第33页 |
| ·A150G 位点不同表型基因频率和基因型频率 | 第33-34页 |
| ·Bt92 基因C243T 位点的多态性分析 | 第34-35页 |
| ·C243T 位点的PCR-RFLP 分析 | 第34-35页 |
| ·C243T 位点的不同表型基因频率和基因型频率 | 第35页 |
| ·Bt92 基因A607G 位点的多态性分析 | 第35-37页 |
| ·A607G 位点的PCR-RFLP 分析 | 第35-36页 |
| ·A607G 位点的不同表型基因频率和基因型频率 | 第36-37页 |
| ·Bt92 基因3 个突变位点的单体型分析 | 第37页 |
| ·NR6A1 基因的多态性分析 | 第37-43页 |
| ·NR6A1 基因P2、P3 引物的PCR 扩增及多态分析 | 第37-38页 |
| ·NR6A1 基因P1、P4～P8 引物的PCR 扩增 | 第38页 |
| ·NR6A1 基因P1、P4、P6、P7 和P8 引物的PCR-SSCP 结果分析 | 第38-39页 |
| ·NR6A1 基因P5 引物的多态性分析 | 第39-41页 |
| ·NR6A1 基因P5 引物的PCR-SSCP 分析 | 第39-40页 |
| ·NR6A1 基因P5 引物的测序分析 | 第40页 |
| ·NR6A1 基因外显子5 基因型与表型的关联分析 | 第40-41页 |
| ·NR6A1 基因的生物信息学分析 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-51页 |
| ·样本的采集 | 第43页 |
| ·DNA 的提取 | 第43页 |
| ·影响PCR 扩增反应的因素 | 第43-44页 |
| ·模板的质量 | 第43-44页 |
| ·反应的退火温度 | 第44页 |
| ·Mg~(2+)浓度 | 第44页 |
| ·PCR 共溶剂的作用 | 第44页 |
| ·影响SSCP 检测效果的因素 | 第44-47页 |
| ·PCR 扩增产物的长度 | 第44-45页 |
| ·点突变的位置 | 第45页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶的交联度和胶浓度 | 第45页 |
| ·甘油的添加 | 第45-46页 |
| ·SSCP 结果的分析 | 第46页 |
| ·电泳条件 | 第46页 |
| ·上样缓冲液与变性 | 第46-47页 |
| ·PCR-RFLP 反应的影响因素 | 第47页 |
| ·PCR 的扩增效果 | 第47页 |
| ·限制性内切酶的选择 | 第47页 |
| ·酶切体系的确定 | 第47页 |
| ·BTG2 基因与多脊椎性状的关系 | 第47-48页 |
| ·小尾寒羊Bt92 基因突变位点与多脊椎性状的关系 | 第47-48页 |
| ·Bt92 基因的单体型分析 | 第48页 |
| ·3′非编码区与多脊椎性状的关系 | 第48页 |
| ·NR6A1 基因与多脊椎性状的关系 | 第48-49页 |
| ·NR6A1 基因的生物信息学分析 | 第49页 |
| ·与多脊椎性状相关基因间的联系 | 第49-50页 |
| ·试验中存在问题及今后的研究方向 | 第50-51页 |
| ·试验中存在问题和解决方法 | 第50页 |
| ·其他研究方法的探讨 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 在读期间发表论文 | 第57-58页 |
| 作者简历 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
