缩略词列表 | 第1-11页 |
中文摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-43页 |
·农药残留现状 | 第16-22页 |
·水土农药残留 | 第16-17页 |
·果蔬农药残留 | 第17-19页 |
·中药材农药残留 | 第19-20页 |
·茶叶农药残留 | 第20页 |
·烟草农药残留 | 第20-21页 |
·农药残留对人类的危害 | 第21-22页 |
·农药残留降解资源 | 第22-29页 |
·农药降解微生物 | 第23-25页 |
·真菌降解酶 | 第25-26页 |
·细菌降解酶和降解基因 | 第26-29页 |
·有机磷农药水解酶OPH的研究进展 | 第29-37页 |
·OPH酶促降解机理 | 第30-33页 |
·OPH的重组表达和定向改造 | 第33-35页 |
·OPH在监测环境农残上的应用 | 第35-36页 |
·展望 | 第36-37页 |
·农药残留的植物修复 | 第37-41页 |
·植物直接吸收并降解农药 | 第37-39页 |
·植物根际与微生物的协同降解 | 第39-40页 |
·植物修复技术的展望 | 第40-41页 |
·立题思路 | 第41-43页 |
第二章 有机磷水解酶基因OPD转化番茄、黄瓜降解农药残留的研究 | 第43-98页 |
第一节 表达载体构建与番茄瞬时表达研究 | 第44-57页 |
·材料与方法 | 第44-51页 |
·材料 | 第44-46页 |
·方法 | 第46-51页 |
·结果与分析 | 第51-55页 |
·E8启动子的克隆 | 第51页 |
·OPD表达载体的构建 | 第51-53页 |
·瞬时转化番茄的GUS染色 | 第53页 |
·瞬时表达OPH酶活分析 | 第53-55页 |
·瞬时转化番茄的RT-PCR检测 | 第55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
第二节 转基因番茄、黄瓜表达OPH研究 | 第57-70页 |
·材料与方法 | 第57-63页 |
·材料 | 第57页 |
·方法 | 第57-63页 |
·结果与分析 | 第63-69页 |
·黄瓜再生体系 | 第63页 |
·转基因黄瓜GUS染色与PCR检测 | 第63-64页 |
·转基因黄瓜OPH酶活分析 | 第64-65页 |
·番茄再生体系 | 第65页 |
·转基因番茄GUS染色和PCR检测 | 第65-66页 |
·转基因番茄Southern bloting检测 | 第66页 |
·转基因番茄RT-PCR检测 | 第66-67页 |
·转基因番茄OPH酶活分析 | 第67-68页 |
·OPH降解蝇毒磷反应曲线 | 第68-69页 |
·讨论 | 第69-70页 |
第三节 重组表达OPH酶的理化特征分析 | 第70-83页 |
·材料与方法 | 第70-73页 |
·材料 | 第70页 |
·方法 | 第70-73页 |
·结果与分析 | 第73-81页 |
·温度对OPH降解能力的影响 | 第73-74页 |
·pH对OPH降解能力的影响 | 第74页 |
·有机溶剂和盐离子对OPH降解能力的影响 | 第74-75页 |
·毒死蜱、乐果和对硝基苯酚的标准曲线 | 第75-76页 |
·OPH底物特异性分析 | 第76-77页 |
·OPH酶促降解蝇毒磷动力学参数 | 第77页 |
·OPH酶促降解毒死蜱动力学参数 | 第77-78页 |
·OPH酶促降解对硫磷动力学参数 | 第78页 |
·HPLC检测精密度和回收率 | 第78-80页 |
·有机磷农残降解能力 | 第80页 |
·成熟OPH的亚细胞定位 | 第80-81页 |
·重组表达OPH的翻译后磷酸化修饰 | 第81页 |
·讨论 | 第81-83页 |
第四节 转基因表达蛋白的潜在致敏性评价 | 第83-98页 |
·材料与方法 | 第83-85页 |
·转基因表达的蛋白序列 | 第83-84页 |
·序列比对 | 第84-85页 |
·蛋白质3D结构预测 | 第85页 |
·抗原性预测 | 第85页 |
·结果与分析 | 第85-96页 |
·氨基酸序列完全比对分析 | 第85页 |
·SDAP数据库完全序列比对 | 第85-87页 |
·Farrp数据库完全序列比对 | 第87-89页 |
·NCBI数据库完全序列比对 | 第89-90页 |
·80个氨基酸框架滑行比对 | 第90-91页 |
·6个氨基酸滑行比对 | 第91-92页 |
·氨基酸匹配序列的空间结构特征 | 第92-93页 |
·蛋白质的抗原性特征 | 第93-96页 |
·讨论 | 第96-98页 |
第三章 乐果降解真菌的分离和鉴定 | 第98-106页 |
·材料与方法 | 第98-101页 |
·材料 | 第98-99页 |
·方法 | 第99-101页 |
·结果与分析 | 第101-104页 |
·降解真菌的富集和分离 | 第101页 |
·不同乐果浓度降解测试 | 第101-102页 |
·不同碳源对乐果降解能力的影响 | 第102-103页 |
·菌株F1的ITS序列克隆 | 第103页 |
·菌株F1的ITS序列聚类分析 | 第103-104页 |
·讨论 | 第104-106页 |
第四章 结论与展望 | 第106-108页 |
·研究结论 | 第106页 |
·研究创新 | 第106-107页 |
·工作展望 | 第107-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
参考文献 | 第109-123页 |
附录 | 第123-124页 |