摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-20页 |
第一章 前言 | 第20-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-38页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·细胞株 | 第24页 |
·菌株 | 第24页 |
·质粒 | 第24-25页 |
·主要试剂及耗材 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-38页 |
·GnT-Ⅴ siRNA序列的设计 | 第25-26页 |
·GnT-Ⅴ shRNA载体的构建 | 第26-27页 |
·细胞培养与转染 | 第27-28页 |
·RT-PCR测定GnT-Ⅴ mRNA | 第28-30页 |
·Western blot检测GnT-Ⅴ蛋白表达 | 第30-31页 |
·CCK-8检测细胞增殖性 | 第31-32页 |
·异质粘附实验 | 第32-33页 |
·趋化运动实验 | 第33页 |
·划痕愈合实验 | 第33-34页 |
·细胞侵袭实验 | 第34-35页 |
·皮下成瘤实验 | 第35-36页 |
·脾脏保留法制备裸小鼠肝转移模型 | 第36页 |
·统计学分析 | 第36-38页 |
第三章 结果 | 第38-53页 |
·重组体的双酶切及测序鉴定 | 第38页 |
·重组质粒的稳定转染 | 第38页 |
·干扰效果检测 | 第38-41页 |
·GnT-Ⅴ shRNA对细胞增殖的影响 | 第41-43页 |
·GnT-Ⅴ shRNA对细胞粘附性、运动性和侵袭性的影响 | 第43-49页 |
·GnT-Ⅴ shRNA对裸鼠皮下成瘤实验的影响 | 第49-50页 |
·GnT-Ⅴ shRNA对LoVo细胞裸鼠肝转移能力的影响 | 第50-53页 |
第四章 讨论 | 第53-56页 |
第五章 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
硕士期间发表的论文及取得的成果 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-63页 |
统计学证明 | 第63页 |