缩写词汇表 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
引言 | 第12-14页 |
Ⅰ文献综述 | 第14-27页 |
1 大肠杆菌耐药机制的研究进展 | 第14-18页 |
·病原性大肠杆菌的危害 | 第15页 |
·病原性大肠杆菌对抗生素的耐药现状 | 第15-16页 |
·大肠杆菌(细菌)的耐药性机制 | 第16-18页 |
2 细菌基因盒-整合子系统的研究进展 | 第18-27页 |
·整合子—基因盒的概念 | 第18-19页 |
·整合子的结构 | 第19页 |
·整合子的分类及分布 | 第19-21页 |
·基因盒的结构 | 第21-22页 |
·基因盒的种类 | 第22页 |
·基因盒的移动 | 第22-23页 |
·基因盒的表达 | 第23-24页 |
·整合子与细菌耐药性的传递 | 第24-25页 |
·整合子-基因盒系统的检测方法 | 第25-27页 |
Ⅱ材料与方法 | 第27-36页 |
1 材料 | 第27-28页 |
·供试材料 | 第27页 |
·菌种 | 第27页 |
·试剂 | 第27页 |
·主要溶液及培养基 | 第27-28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
·常用的生物信息分析的相关软件及网站 | 第28页 |
2 方法 | 第28-36页 |
·Ⅰ型整合子阳性参照菌株的确定 | 第28-31页 |
·Ⅰ型整合子遗传标记Ⅰ型整合酶的PCR 扩增 | 第28页 |
·PCR 产物的克隆测序 | 第28-31页 |
·PCR 产物的回收纯化 | 第28-29页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备[61] | 第29-30页 |
·连接反应 | 第30页 |
·转化 | 第30页 |
·阳性克隆菌株的筛选和鉴定 | 第30页 |
·目的片段的测序与数据分析 | 第30-31页 |
·500 株携带毒素基因的大肠杆菌Ⅰ型整合子的PCR 检测 | 第31-32页 |
·模板的制备 | 第31页 |
·Ⅰ型整合酶部分特异性片段的扩增 | 第31-32页 |
·药敏实验 | 第32页 |
·纸片质控 | 第32页 |
·大肠杆菌整合子阳性100 株及阴性100 株的药敏实验 | 第32页 |
·统计学处理 | 第32页 |
·Ⅰ型整合子可变区的检测与分析 | 第32-36页 |
·Ⅰ整合子可变区的扩增及产物回收 | 第32-33页 |
·Ⅰ整合子可变区限制性酶切分析(RFLP) | 第33-34页 |
·Ⅰ型整合子可变区(基因盒)的克隆及测序 | 第34-36页 |
Ⅲ结果与分析 | 第36-50页 |
1Ⅰ型整合子阳性菌株的确定 | 第36-38页 |
2 携带Ⅰ型整合子大肠杆菌的检测结果 | 第38-39页 |
3 药敏实验结果分析(整合子与细菌抗药性的关系) | 第39-42页 |
4 Ⅰ型整合子基因盒的检测、酶切分析及克隆测序结果 | 第42-50页 |
·Ⅰ型整合子可变区扩增结果 | 第42-43页 |
·RFLP 分析结果 | 第43页 |
·可变区克隆测序结果 | 第43-50页 |
Ⅴ讨论与小结 | 第50-55页 |
1 讨论 | 第50-54页 |
·方法的选择 | 第50页 |
·本研究的独特性 | 第50-51页 |
·抗生素使用时间和细菌耐药性 | 第51页 |
·水体中大肠杆菌分离物具有多重耐药性的原因分析 | 第51-52页 |
·细菌耐药性与基因盒的分子生物学分析 | 第52-54页 |
2 小结 | 第54-55页 |
附表 1 整合子药敏实验结果总表 | 第55-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
致谢 | 第67页 |