O型口蹄疫病毒VP1蛋白原核表达及结构预测
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一章 口蹄疫研究进展 | 第12-33页 |
| ·口蹄疫病毒生物学特征 | 第12页 |
| ·口蹄疫病毒基因组结构和功能 | 第12-15页 |
| ·口蹄疫病毒VP1基因的重要性 | 第15-16页 |
| ·诊断 | 第16-19页 |
| ·凝集试验 | 第16页 |
| ·琼脂扩散试验 | 第16-17页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第17-19页 |
| ·透明带TM色谱测试技术 | 第19页 |
| ·免疫电压生物传感器 | 第19页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第19-22页 |
| ·核酸探针法 | 第20页 |
| ·核酸指纹图法(T1酶谱法) | 第20页 |
| ·核酸序列分析法 | 第20-21页 |
| ·多肽分析法 | 第21页 |
| ·RT-PCR | 第21-22页 |
| ·防治 | 第22-28页 |
| ·传统疫苗 | 第22-23页 |
| ·新型疫苗 | 第23-27页 |
| ·RNA干扰 | 第27-28页 |
| ·蛋白质结构测定方法 | 第28-30页 |
| ·X射线晶体衍射法 | 第28页 |
| ·核磁共振技术 | 第28-29页 |
| ·冷冻电镜三维重构技术 | 第29页 |
| ·圆二色性光谱法 | 第29-30页 |
| ·蛋白质三维结构理论预测方法 | 第30-32页 |
| ·同源模建 | 第30-31页 |
| ·折叠识别法 | 第31页 |
| ·从头预测法 | 第31-32页 |
| ·展望 | 第32-33页 |
| 第二章 原核表达载体的构建及表达 | 第33-54页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·菌种与质粒 | 第33页 |
| ·生物试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-45页 |
| ·VP1基因的PCR扩增 | 第33-36页 |
| ·VP1基因的T载体克隆 | 第36-39页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第39-42页 |
| ·VP1序列测定 | 第42页 |
| ·PET-28a-VP1表达条件的优化 | 第42-44页 |
| ·PET-41a-VP1表达条件的优化 | 第44页 |
| ·重组PET-28a-VP1蛋白的变性Ni柱纯化 | 第44-45页 |
| ·Western-blot分析 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-52页 |
| ·VP1基因的PCR扩增结果 | 第45-46页 |
| ·VP1基因原核表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·PET-28a-VP1诱导表达与可溶性分析 | 第47-50页 |
| ·pET-41-VP1的诱导表达 | 第50-51页 |
| ·镍离子亲和层析纯化 | 第51页 |
| ·VP1蛋白的western-blot | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第三章 口蹄疫病毒VP1蛋白结构预测及分析 | 第54-69页 |
| ·材料与方法 | 第54页 |
| ·VP1氨基酸序列 | 第54页 |
| ·结构预测与分析 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-65页 |
| ·VP1蛋白一级结构分析 | 第54-57页 |
| ·VP1蛋白二级结构分析 | 第57-63页 |
| ·蛋白质二级结构的不规则评估 | 第63-64页 |
| ·蛋白质结构模型评估 | 第64-65页 |
| ·VP1蛋白柔性、抗原性及表面可及性分析 | 第65页 |
| ·VP1蛋白三级空间结构 | 第65-68页 |
| ·VP1蛋白三维模型 | 第65-66页 |
| ·不同旋转角度的VP1蛋白三维模型 | 第66-67页 |
| ·VP1蛋白空间结构预测结果评估 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-69页 |
| 第四章 结论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-84页 |
| 附录 | 第84-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 作者简介 | 第88页 |
