| 内容提要 | 第1-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-37页 |
| ·程序性细胞死亡 | 第13-15页 |
| ·细胞信号转导 | 第15-18页 |
| ·细胞程序性死亡的主要信号转导途径 | 第18-37页 |
| ·P13K/Akt/mTOR信号传导通路 | 第18-27页 |
| ·溶酶体在细胞死亡中的介导作用 | 第27-29页 |
| ·线粒体在细胞死亡中的介导作用 | 第29-37页 |
| 第二章 材料和方法 | 第37-49页 |
| ·实验材料 | 第37-39页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器与设备 | 第37页 |
| ·细胞株 | 第37-38页 |
| ·主要试剂的配制 | 第38页 |
| ·Western blot相关试剂 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-49页 |
| ·细胞培养 | 第39-40页 |
| ·MTT检测法 | 第40-41页 |
| ·RT-PCR检测mRNA的表达 | 第41-43页 |
| ·Western blot检测Becli111、LC3、Akt1/磷酸化Akt1、mTOR/磷酸化mTOR的蛋白表达 | 第43-45页 |
| ·DCFH-DA荧光分光光度法检测细胞内ROS水平 | 第45页 |
| ·Hoechst33342 染色检测凋亡细胞核形态 | 第45页 |
| ·AO染色检测溶酶体稳定性 | 第45-46页 |
| ·Rodamine 123 染色检测线粒体膜电势 | 第46页 |
| ·MDC染色检测自噬泡的形成 | 第46页 |
| ·透射电子显微镜 | 第46页 |
| ·BCECF-AM检测细胞浆pH值 | 第46-47页 |
| ·统计学方法 | 第47-49页 |
| 第三章 实验结果 | 第49-77页 |
| 第一节 氧化应激诱导人子宫颈癌细胞Hela细胞凋亡和自噬 | 第49-59页 |
| 1 MTT法检测细胞生存率 | 第49-50页 |
| 2 Hoechst33342 染色检测细胞凋亡 | 第50-52页 |
| 3 DCFH-DA检测细胞内ROS水平 | 第52-53页 |
| 4 cleavaged-caspase-3 的表达 | 第53-54页 |
| 5 Cytosolic Cyt C蛋白的表达 | 第54-55页 |
| 6 Bcl-2、Bax mRNA表达的变化 | 第55-56页 |
| 7 Beclin1 蛋白的表达 | 第56-57页 |
| 8 LC3-Ⅱ蛋白的表达 | 第57-58页 |
| 9 透射电镜细胞形态 | 第58-59页 |
| 第二节 溶酶体/线粒体在氧化应激诱导Hela细胞死亡过程中的作用 | 第59-75页 |
| 1 MTT实验检测细胞生存率 | 第59-61页 |
| 2 AO染色 | 第61-63页 |
| 3 Rodamine 123 染色 | 第63-64页 |
| 4 透射电镜细胞超微结构的观察 | 第64-65页 |
| 5 Akt/mTOR信号转导途径基因的表达 | 第65-66页 |
| 6 Akt/mTOR信号转导蛋白表达 | 第66-68页 |
| 7 线粒体融合基因的表达 | 第68-70页 |
| 8 线粒体分裂基因的表达 | 第70-72页 |
| 9 MDC染色 | 第72-74页 |
| 10 Capase3 蛋白表达 | 第74-75页 |
| 第三节 细胞酸化在氧化应激诱导Hela细胞死亡过程中的作用 | 第75-77页 |
| 第四章 讨论 | 第77-85页 |
| 第五章 结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-98页 |
| 攻读博士学位期间发表文章 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 中文摘要 | 第100-103页 |
| Abstract | 第103-106页 |
