| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 英文缩略词表 | 第16-17页 |
| 第一部分 研究背景 | 第17-30页 |
| 1 蛋白尿是慢性肾脏病进展的独立危险因素 | 第17页 |
| 2 足细胞损伤与CKD进展密切相关 | 第17-18页 |
| 3 足细胞损伤是导致蛋白尿的关键环节 | 第18-20页 |
| 4 miRNA参与基因敲除模型足细胞损伤引起的蛋白尿 | 第20-21页 |
| 5 足细胞病的治疗:免疫抑制?还是足细胞保护 | 第21-22页 |
| 6 中医学对慢性肾脏病病因病机的研究 | 第22-26页 |
| ·对慢性肾脏病病因的认识 | 第22-24页 |
| ·对慢性肾脏病病机研究 | 第24-26页 |
| ·孙伟以"肾虚湿(热)瘀"立论 | 第26页 |
| 7 慢性肾病动物模型评价与选择 | 第26-28页 |
| 8 雷公藤制剂治疗蛋白尿新机制 | 第28-30页 |
| 第二部分 PAN肾病大鼠肾皮质miRNA的差异性表达 | 第30-53页 |
| 1 实验材料 | 第30-31页 |
| ·实验药物与试剂 | 第30页 |
| ·实验动物 | 第30-31页 |
| 2. 实验方法 | 第31-41页 |
| ·实验分组 | 第31页 |
| ·PAN肾病大鼠模型的建立 | 第31-32页 |
| ·给药剂量及方法 | 第32页 |
| ·尿蛋白及血生化指标检测 | 第32页 |
| ·肾小球超微结构检查(透射电镜) | 第32页 |
| ·miRNA芯片检测 | 第32-37页 |
| ·Real-time RT-PCR验证候选miRNA | 第37-41页 |
| ·统计学分析 | 第41页 |
| 3. 结果 | 第41-52页 |
| ·PAN模型鼠一般情况 | 第41-42页 |
| ·足细胞超微结构变化 | 第42页 |
| ·miRNA芯片分析 | 第42-45页 |
| ·荧光Real-time PCR验证芯片结果 | 第45-50页 |
| ·模型组和雷高组聚类图 | 第50-52页 |
| 4. 小结 | 第52-53页 |
| 第三部分 Dicer对PAN肾病大鼠足细胞nephrin介导蛋白尿的调控 | 第53-67页 |
| 1. 实验材料 | 第53-54页 |
| ·实验动物与分组 | 第53页 |
| ·试剂与药物 | 第53-54页 |
| 2 实验方法 | 第54-60页 |
| ·PAN肾病大鼠模型的建立 | 第54页 |
| ·24h尿蛋白排泄量和血清生化指标检测 | 第54页 |
| ·肾小球超微结构检查(透射电镜) | 第54页 |
| ·肾组织nephrin、podocin、dicer、synaptopodin免疫荧光染色 | 第54-55页 |
| ·RNA的提取 | 第55-56页 |
| ·肾皮质nephrin、podocin、dicer核酸检测(RT-PCR) | 第56-57页 |
| ·肾皮质nephrin、podocin、dicer蛋白检测(Western Blotting) | 第57-60页 |
| ·主要试剂 | 第57-58页 |
| ·仪器 | 第58页 |
| ·实验步骤 | 第58-60页 |
| ·统计学分析 | 第60页 |
| 3. 结果 | 第60-66页 |
| ·PAN大鼠一般情况 | 第60-61页 |
| ·足细胞超微结构变化 | 第61页 |
| ·dicer、nephrin、podocin免疫荧光染色 | 第61-62页 |
| ·RNA提取以及质量检测 | 第62页 |
| ·肾皮质dicer与SD分子核酸变化 | 第62-64页 |
| ·肾皮质dicer与SD蛋白表达 | 第64-66页 |
| 4. 小结 | 第66-67页 |
| 第四部分 Dicer酶对PAN肾病大鼠足细胞骨架蛋白表达及足细胞凋亡的调控 | 第67-72页 |
| 1. 实验材料 | 第67-68页 |
| ·试剂与药物 | 第67-68页 |
| 2 实验方法 | 第68-70页 |
| ·PAN肾病大鼠模型的建立 | 第68页 |
| ·24h尿蛋白排泄量和血清生化指标检测 | 第68页 |
| ·肾小球超微结构检查(透射电镜) | 第68-69页 |
| ·肾组织凋亡检测(TUNEL法) | 第69-70页 |
| ·肾组织dicer、nephrin、podocin、synaptopodin免疫荧光染色 | 第70页 |
| ·统计学方法 | 第70页 |
| 3. 结果 | 第70-71页 |
| ·24h尿蛋白排泄量 | 第70页 |
| ·肾组织dicer、nephrin、synaptopodin免疫荧光染 | 第70页 |
| ·肾组织TUNEL染色 | 第70-71页 |
| 5. 小结 | 第71-72页 |
| 第五部分 雷公藤制剂经dicer酶干预PAN肾病大鼠足细胞nephrin表达及对足细胞的保护机制 | 第72-81页 |
| 1. 实验材料 | 第72-73页 |
| ·实验动物 | 第72页 |
| ·试剂与药物 | 第72页 |
| ·主要仪器设备 | 第72-73页 |
| 2. 实验方法 | 第73-74页 |
| ·大鼠PAN肾病模型制作 | 第73页 |
| ·实验分组与给药方法 | 第73页 |
| ·24h尿蛋白排泄量和血清生化指标检测 | 第73-74页 |
| ·足细胞超微结构病理(电镜) | 第74页 |
| ·肾组织nephrin、podocin、dicer、synaptopodin免疫荧光染色 | 第74页 |
| ·组织总RNA的提取 | 第74页 |
| ·肾组织dicer、nephrin、podocin、synaptopodin mRNA检测 | 第74页 |
| ·肾组织dicer、nephrin、podocin synaptopodin蛋白检测 | 第74页 |
| ·统计学方法 | 第74页 |
| 5. 结果 | 第74-80页 |
| ·大鼠一般情况 | 第74-75页 |
| ·24h尿蛋白排泄量测定 | 第75-76页 |
| ·足细胞超微结构 | 第76页 |
| ·肾组织免疫荧光染色 | 第76-77页 |
| ·肾皮质dicer、nephrin、podocin synaptopodin mRNA表达 | 第77-79页 |
| ·肾皮质dicer、nephrin、podocin、synaptopodin蛋白表达 | 第79-80页 |
| 6. 小结 | 第80-81页 |
| 第六部分 雷至胶囊对雷公藤多苷治疗PAN肾病减毒增效机制实验研究 | 第81-91页 |
| 1. 实验材料 | 第82页 |
| 2. 实验方法 | 第82-84页 |
| ·实验分组 | 第82页 |
| ·大鼠PAN肾病模型制作 | 第82页 |
| ·给药剂量及方法 | 第82-83页 |
| ·标本留取及处理 | 第83页 |
| ·光镜检查 | 第83-84页 |
| ·电镜 | 第84页 |
| ·统计学处理 | 第84页 |
| 3. 结果 | 第84-91页 |
| ·大鼠一般情况 | 第84页 |
| ·24h尿蛋白定量结果 | 第84-85页 |
| ·总蛋白、白蛋白及血脂变化 | 第85-86页 |
| ·肝肾功能 | 第86-87页 |
| ·血常规 | 第87-88页 |
| ·组织病理结果 | 第88-91页 |
| ·肾组织病理 | 第88-90页 |
| ·肝组织病理 | 第90-91页 |
| 讨论 | 第91-99页 |
| 1 对PAN肾病模型评价 | 第91-92页 |
| 2 PAN肾病肾皮质相关miRNA的筛选及功能预测 | 第92-93页 |
| 3 Dicer可能通过miRNA负向调控nephrin表达及蛋白尿 | 第93-94页 |
| 4 miR-24～miR-23a在调控足细胞凋亡及骨架蛋白调控中的协同效应 | 第94-95页 |
| 5. 雷公藤制剂对PAN肾病组织病理、dicer及SD分子表达的影响 | 第95-97页 |
| 6 雷至胶囊组方分析及其减毒增效理论依据 | 第97-98页 |
| 7 雷至胶囊在PAN肾病大鼠的减毒增效作用 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-105页 |
| 创新点 | 第105-106页 |
| 全文结论 | 第106-108页 |
| 不足与展望 | 第108-109页 |
| 综述 肾脏疾病相关mirc0RNA的表达及功能研究新进展 | 第109-118页 |
| 参考文献 | 第115-118页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 作者简介 | 第120页 |
