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山羊产羔和牛精液品质与卵泡发育性状主基因鉴定及功能研究

摘要第1-15页
Abstract第15-18页
第一章 文献综述第18-51页
 1 动物繁殖调控第18-31页
   ·生殖激素调控第18-25页
     ·下丘脑-垂体-性腺轴激素第19-21页
     ·下丘脑-垂体-性腺轴调节机制第21-23页
     ·抑制素在下丘脑-垂体-性腺轴中的反馈调控作用第23-25页
   ·次要生殖激素调控第25-26页
     ·GH对性成熟的调控第25页
     ·GH对卵泡发育和排卵的调控第25-26页
     ·GH对卵巢类固醇激素分泌的作用第26页
     ·GH对子宫的作用第26页
   ·细胞因子调控第26-30页
     ·主要细胞因子种类及功能第27-28页
     ·细胞因子对动物繁殖的调控第28-30页
   ·基因调控第30-31页
 2 主基因鉴定方法第31-36页
   ·统计分析法第31页
   ·基因组扫描法第31-35页
   ·候选基因法第35-36页
 3 主基因功能研究方法第36-42页
   ·基因转导法第36-37页
   ·基因敲除法第37页
   ·基因敲入法第37页
   ·RNA干扰方法第37-42页
     ·RNA干扰作用机制第38-39页
     ·RNA干扰特点第39-40页
     ·RNA干扰在动物繁殖相关基因功能研究中的应用第40-42页
 4 牛羊繁殖性状候选基因研究进展第42-49页
   ·FecB第42-43页
   ·FecX第43-44页
   ·GH第44-47页
     ·GH的结构第44-45页
     ·GH的功能第45页
     ·GH与牛羊重要经济性状的关系第45-47页
   ·INHA第47页
     ·INHA与抑制素第47页
     ·INHA与繁殖性状的关系第47页
   ·INHβA第47-49页
     ·INHβA与抑制素和活化素第47-48页
     ·INHβA与繁殖性状的关系第48-49页
 5 研究目的和意义第49-51页
第二章 山羊FecB和FecX基因及其连锁的微卫星座位多态性分析第51-72页
 1 引言第51页
 2 材料与方法第51-57页
   ·材料第51-54页
     ·实验动物与样品采集第51-52页
     ·主要仪器设备第52页
     ·主要试剂配制第52-54页
   ·方法第54-56页
     ·山羊基因组DNA提取及检测第54页
     ·FecB和FeeX(FecXH、FecXI、FecXG和FecXB)多态性检测第54-55页
     ·微卫星座位多态性检测第55-56页
   ·统计分析第56-57页
     ·微卫星座位多态性统计分析第56页
     ·微卫星座位多态性与繁殖性状关联分析第56-57页
 3 结果与分析第57-65页
   ·基因组DNA提取质量第57页
   ·FecB基因多态性第57-58页
   ·FecX基因多态性第58-59页
   ·与FecB和FecX连锁的微卫星座位多态性第59-65页
     ·微卫星座位扩增第59-60页
     ·波尔山羊微卫星座位等位基因频率与基因型频率第60-63页
     ·波尔山羊微卫星座位遗传多样性第63页
     ·微卫星座位各基因型产羔数第63-65页
 4 讨论第65-71页
   ·FecB与FecX基因不是山羊繁殖性状主基因第65-67页
     ·FecB在山羊中不存在多态性第65-67页
     ·FeeX(FecXI、FecXH、FecXG和FecXB) 在山羊中不存在多态性第67页
   ·与FecB和FecX连锁的微卫星座位与山羊繁殖性状有关第67-71页
     ·微卫星座位在波尔山羊中的遗传多样性第68-69页
     ·微卫星座位对波尔山羊产羔数性状的影响第69-70页
     ·BMPR-IB和BMP15基因作为山羊繁殖性状主基因的可能性第70-71页
 5 小结第71-72页
第三章 波尔山羊生长激素基因多态性及对生长和繁殖的调控第72-87页
 1 引言第72页
 2 材料与方法第72-74页
   ·材料第72-73页
   ·方法第73-74页
     ·基因组DNA提取第73页
     ·GH基因多态性检测第73-74页
   ·统计分析第74页
     ·GH多态性分析第74页
     ·GH多态性与繁殖性状关联分析第74页
     ·GH多态性与生长性状关联分析第74页
 3 结果与分析第74-81页
   ·GH基因多态性第74-76页
   ·GH基因频率及基因型频率分布第76页
   ·波尔山羊公羊GH各基因型早期生长性状第76-79页
   ·波尔山羊母羊GH各基因型早期生长性状第79-80页
   ·波尔山羊母羊GH各基因型产羔数第80-81页
 4 讨论第81-85页
   ·GH基因部分基因型缺失第81-82页
   ·GH对早期生长性状效应的性别差异第82-84页
     ·GH对波尔山羊公羊早期生长性状影响显著第82-83页
     ·GH对波尔山羊母羊早期生长性状影响不显著第83-84页
     ·GH效应性别差异可能机制第84页
   ·GH基因对波尔山羊母羊繁殖性状的影响第84-85页
   ·波尔山羊生长性状与繁殖性状的相互关系第85页
 5 小结第85-87页
第四章 山羊抑制素α亚基基因多态性及对产羔数的影响第87-99页
 1 引言第87页
 2 材料与方法第87-90页
   ·材料第87页
   ·方法第87-90页
     ·山羊基因组DNA提取第87-88页
     ·INHA基因多态性检测第88-90页
   ·统计分析第90页
 3 结果与分析第90-94页
   ·INHA基因PCR-SSCP多态性第90页
   ·INHA基因SNPs位点第90-91页
   ·INHA基因型频率和基因频率分布第91页
   ·山羊INHA各基因型产羔数第91-94页
 4 讨论第94-97页
   ·INHA是山羊繁殖性状主基因第94-95页
   ·INHA效应在不同品种间存在差异第95-96页
   ·INHA与山羊繁殖性状标记辅助选择第96-97页
   ·候选基因法鉴定主基因功能第97页
 5 小结第97-99页
第五章 牛抑制素βA亚基基因多态性及其对精液品质的影响第99-106页
 1 引言第99页
 2 材料与方法第99-101页
   ·材料第99-100页
   ·方法第100页
     ·冻精解冻及基因组DNA提取第100页
     ·INHβA基因多态性检测第100页
   ·统计分析第100-101页
 3 结果与分析第101-104页
   ·INHβA基因PCR扩增产物第101页
   ·INHβA基因PCR-RFLP多态性第101-102页
   ·INHβA基因型频率和等位基因频率第102页
   ·荷斯坦种公牛INHβA各基因型精液品质性状第102-104页
 4 讨论第104页
   ·荷斯坦种公牛INHβA基因多态性影响精液品质第104页
   ·INHβA基因是荷斯坦种公牛精液品质性状主基因第104页
 5 小结第104-106页
第六章 繁殖性状主基因INHA对牛卵泡细胞发育的作用及作用机制研究第106-138页
 1 引言第106-107页
 2 材料与方法第107-114页
   ·材料第107-108页
     ·实验材料第107页
     ·干扰载体第107页
     ·主要试剂盒第107-108页
   ·方法第108-114页
     ·牛卵泡颗粒细胞的分离和培养第108页
     ·INHA基因RNAi重组干扰质粒构建第108-110页
     ·重组质粒克隆及纯化第110-111页
     ·重组质粒转染牛颗粒细胞第111页
     ·转染后颗粒细胞总RNA提取及检测第111-112页
     ·RT-PCR合成第一链cDNA第112页
     ·颗粒细胞6个基因相对表达量分析第112-113页
     ·颗粒细胞细胞凋亡检测第113页
     ·颗粒细胞细胞周期检测第113页
     ·颗粒细胞类固醇激素分泌量放免测定第113-114页
   ·统计分析第114页
 3 结果与分析第114-122页
   ·INHA基因RNAi重组质粒第114页
   ·重组质粒psiRNA转染牛颗粒细胞第114-115页
   ·颗粒细胞总RNA质量第115页
   ·RNAi后颗粒细胞6个基因相对表达量第115-117页
   ·RNAi后颗粒细胞凋亡情况第117-118页
   ·RNAi后颗粒细胞细胞周期第118-120页
   ·RNAi后颗粒细胞类固醇激素分泌量第120-122页
 4 讨论第122-136页
   ·抑制素RNAi效果显著第122-125页
     ·影响颗粒细胞6个基因表达量第123页
     ·抑制颗粒细胞凋亡第123-124页
     ·影响颗粒细胞类固醇激素分泌量第124-125页
   ·抑制素促进牛颗粒细胞细胞凋亡的作用及作用机制第125-128页
     ·分子调控机制第125-127页
     ·细胞因子调控机制第127-128页
     ·内分泌调控机制第128页
   ·抑制素对卵泡发育的局部调节作用及作用机制第128-130页
   ·抑制素对卵泡闭锁的局部调节作用及作用机制第130-131页
   ·抑制素对发情和排卵的作用及作用机制第131-132页
   ·抑制素对卵巢功能的局部调节作用及作用机制第132-134页
   ·抑制素在动物繁殖领域及人类辅助生殖和卵巢疾病治疗中的应用及应用前景第134-136页
     ·抑制素在动物繁殖领域中的应用及应用前景第134页
     ·抑制素在人类卵巢疾病中的应用及应用前景第134-136页
     ·抑制素在人类辅助生殖中的应用及应用前景第136页
 5 小结第136-138页
结论第138-140页
研究创新点与不足第140-141页
参考文献第141-167页
附录Ⅰ 作者简介第167-168页
附录Ⅱ 在读期间发表的学术论著/论文第168-171页
附录Ⅲ 在读期间申请的国家发明专利第171-172页
附录Ⅳ GeneBank登录基因第172-173页
附录Ⅴ 学术交流第173-174页
缩略词表第174-175页
致谢第175-176页

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