茶树多酚氧化酶的基因克隆与原核表达
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词 | 第10-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-22页 |
| 1 茶树多酚氧化酶的生化性质研究 | 第11-13页 |
| ·多酚氧化酶的酶学分类研究 | 第11-12页 |
| ·多酚氧化酶的细胞定位研究 | 第12页 |
| ·多酚氧化酶同工酶的研究 | 第12页 |
| ·多酚氧化酶的酶学性质研究 | 第12-13页 |
| 2 多酚氧化酶的分子生物学研究进展 | 第13-17页 |
| ·多酚氧化酶的分子结构研究进展 | 第13-14页 |
| ·多酚氧化酶的基因结构与特性研究进展 | 第14-15页 |
| ·多酚氧化酶的蛋白结构研究进展 | 第15页 |
| ·多酚氧化酶的基因克隆研究进展 | 第15-16页 |
| ·多酚氧化酶的表达与调控研究研究进展 | 第16-17页 |
| 3 多酚氧化酶的生理功能研究 | 第17-19页 |
| ·多酚氧化酶在茶叶加工中的应用研究 | 第17-18页 |
| ·多酚氧化酶与植物抗病性的研究 | 第18页 |
| ·多酚氧化酶与植物光和作用的研究 | 第18-19页 |
| ·多酚氧化酶的其它功能的研究 | 第19页 |
| 4 多酚氧化酶的应用研究进展 | 第19-20页 |
| ·多酚氧化酶在茶叶中的应用研究 | 第19页 |
| ·多酚氧化酶在食品加工中的应用研究 | 第19-20页 |
| ·多酚氧化酶在工业中的应用研究 | 第20页 |
| 5 本研究的目的意义 | 第20-22页 |
| 第2章 茶树多酚氧化酶的基因克隆与表达载体构建 | 第22-40页 |
| 1 前言 | 第22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-28页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·试验方法 | 第23-28页 |
| 3.结果与分析 | 第28-38页 |
| ·PPO的基因克隆结果 | 第28-29页 |
| ·PPO基因表达载体的构建 | 第29-32页 |
| ·安徽一号和宜红早PPO的生物信息学分析 | 第32-38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| ·茶树PPO基因不含有内含子 | 第38页 |
| ·安徽一号PPO基因序列的差异 | 第38页 |
| ·PPO转运肽结构的分析 | 第38-39页 |
| 5 小结 | 第39-40页 |
| 第3章 茶树多酚氧化酶的蛋白表达与酶活性测定 | 第40-55页 |
| 1 前言 | 第40页 |
| 2 材料方法 | 第40-46页 |
| ·试验材料 | 第40-44页 |
| ·试验方法 | 第44-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-52页 |
| ·多酚氧化酶基因原核表达结构 | 第46-48页 |
| ·宜红早PPO/pET32a蛋白的大量表达与纯化 | 第48-49页 |
| ·包涵体的变性与复性 | 第49-50页 |
| ·茶树多酚氧化酶酶活性测定结果 | 第50-52页 |
| 4.讨论 | 第52-54页 |
| ·PPO原核表达载体的选择 | 第52页 |
| ·PPO原核表达易形成包涵体 | 第52-53页 |
| ·PPO蛋白表达条件的优化 | 第53页 |
| ·PPO工程蛋白具有酶活性 | 第53-54页 |
| 5 小结 | 第54-55页 |
| 第4章 茶树多酚氧化酶亚蛋白的原核表达 | 第55-67页 |
| 1 前言 | 第55页 |
| 2 材料与方法 | 第55-57页 |
| ·试验材料 | 第55页 |
| ·试验方法 | 第55-57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-65页 |
| ·PPO亚蛋白的缺失位点选择 | 第57页 |
| ·PPO基因克隆结果 | 第57-58页 |
| ·PPO亚蛋白表达载体构建结果 | 第58-61页 |
| ·PPO亚蛋白原核表达的结果与分析 | 第61-63页 |
| ·PPO-1532亚蛋白包涵体的纯化与分析 | 第63-64页 |
| ·多酚氧化酶亚蛋白的活性测定 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-66页 |
| 5 小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 附表1 多酚氧化酶基因序列比对 | 第75-78页 |
| 附表2 多酚氧化酶PPO蛋白序列比对 | 第78-79页 |
