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呋喃唑酮,呋喃妥因和加替沙星的化学发光酶联免疫吸附检测法的建立

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-14页
符号说明第14-15页
正文部分第15-79页
 第一部分 前言第15-31页
  第一章 药物概述第15-18页
  第二章 药物残留检测方法第18-31页
   第一节 仪器法第18-23页
     ·高效液相色谱法(HPLC)简介第18-23页
       ·高效液相色谱法(HPLC)发展概况和基本原理第18-19页
       ·色谱分离原理第19-21页
       ·HPLC的特点和优点第21页
       ·HPLC定性定量分析的原理与方法第21-23页
         ·HPLC定性分析的原理与方法第21-22页
         ·HPLC定量分析的原理与方法第22-23页
     ·(高效)液相-质谱联用法(LC-MS)第23页
   第二节 微生物法第23-24页
   第三节 生物免疫检测法-酶联免疫吸附检测法(ELISA)第24-31页
     ·ELISA基本原理第24页
     ·结合化学发光分析的酶联免疫法(CL-ELISA)第24-25页
     ·ELISA的特点第25-26页
     ·ELISA检测类型第26-27页
     ·免疫原的制备第27-29页
       ·载体的选择第27-28页
       ·免疫原的联结方法第28页
       ·免疫原的鉴定方法第28-29页
     ·酶联免疫检测的研究现状第29-30页
     ·本论文设计目的和思路第30-31页
 第二部分 实验部分第31-48页
  第一章 实验材料第31-33页
   第一节 实验材料与设备第31-33页
     ·实验试剂及实验耗材第31-32页
     ·主要仪器设备第32-33页
     ·主要缓冲溶液的配制第33页
  第二章 偶联物的制备第33-38页
   第一节 呋喃唑酮及其代谢产物的偶联物的制备第33-35页
     ·AOZ衍生物的制备第33-34页
     ·呋喃唑酮及其代谢产物(AOZ)免疫原的合成第34页
     ·呋喃唑酮及其代谢产物(AOZ)包被抗原的合成第34-35页
   第二节 呋喃妥因及其代谢产物的偶联物的制备第35-36页
     ·AHD衍生物的制备第35页
     ·呋喃妥因及其代谢产物(AHD)免疫原的合成第35-36页
     ·呋喃妥因及其代谢产物(AHD)包被抗原的合成第36页
   第三节 加替沙星及其代谢产物偶联物的制备第36-38页
     ·加替沙星免疫原的合成第36-37页
     ·加替沙星包被抗原的制备第37-38页
  第三章 多克隆抗体的制备第38-39页
   第一节 抗体的制备过程第38-39页
     ·免疫方案及抗血清的制备第38-39页
     ·抗体的纯化与保存第39页
  第四章 抗体检测第39-48页
   第一节 呋喃唑酮多克隆抗体的检测第39-43页
     ·方阵法优选多克隆抗体最佳测定浓度第39-40页
     ·间接酶联免疫吸附测定法测定多克隆抗体抗体效价第40页
     ·竞争酶联免疫吸附测定法测定呋喃唑酮抗体灵敏性第40页
     ·呋喃唑酮抗体交叉反应率(特异性)的测定第40页
     ·呋喃唑酮回收率的检测第40-43页
       ·标准曲线的建立第42页
       ·水体系中呋喃唑酮残留量的检测第42-43页
         ·LC-MS法测定水体系中呋喃唑酮残留量第42-43页
         ·化学发光ELISA法测定呋喃唑酮残留量第43页
   第二节 呋喃妥因多克隆抗体的检测第43-45页
     ·方阵法优选多克隆抗体最佳测定浓度第43-44页
     ·间接酶联免疫吸附测定法测定多克隆抗体效价第44页
     ·竞争ELISA法测定呋喃妥因抗体灵敏性第44页
     ·呋喃妥因抗体交叉反应率(特异性)的测定第44页
     ·呋喃妥因回收率的检测第44-45页
       ·标准曲线的建立第44-45页
       ·水体系中呋喃妥因残留量的检测第45页
   第三节 加替沙星多克隆抗体的检测第45-48页
     ·方阵法优选多克隆抗体最佳浓度第45-46页
     ·间接酶联免疫吸附测定法测定多克隆抗体效价第46页
     ·竞争酶联免疫吸附测定法测定抗体灵敏性第46页
     ·加替沙星抗体交叉反应率(特异性)的测定第46页
     ·牛奶体系中加替沙星回收率的检测第46-48页
       ·生物基质的影响第46-47页
       ·标准曲线的建立第47页
       ·测定体系中加替沙星残留量的检测第47-48页
         ·LC-MS法测定体系中加替沙星残留量第47页
         ·化学发光ELISA法测定体系中加替沙星残留量第47-48页
 第三部分 结果与讨论第48-79页
  第一章 免疫原的合成与鉴定第48-51页
   第一节 免疫原的合成与鉴定第48-51页
     ·载体蛋白的选择第48页
     ·呋喃唑酮(AOZ)免疫原的合成与鉴定第48-49页
     ·呋喃妥因(AHD)免疫原的合成与鉴定第49-50页
     ·加替沙星免疫原的合成和鉴定第50-51页
  第二章 抗体的制备过程第51-54页
   第一节 免疫方案第51-53页
     ·免疫动物第51页
     ·免疫过程第51-52页
     ·佐剂的应用第52-53页
   第二节 抗血清的制备与冻存第53-54页
     ·器械灭菌第53页
     ·采血方法第53页
     ·饱和硫酸铵纯化第53-54页
     ·抗血清的冻存第54页
  第三章 抗体的检测第54-76页
   第一节 化学发光条件的优化第54-58页
   第二节 影响ELISA检测的因素第58-59页
   第三节 呋喃唑酮抗体的检测结果与分析第59-64页
     ·呋喃唑酮抗体效价的测定第59页
     ·化学发光法测定呋喃唑酮抗体的灵敏度第59-60页
     ·化学发光ELISA法与比色ELISA法的比较第60-61页
     ·呋喃唑酮抗体交叉反应率的测定第61-62页
     ·呋喃唑酮回收率的测定第62-64页
       ·化学发光ELISA法测定的呋喃唑酮回收率第62-63页
       ·LC-MS法测定的呋喃唑酮回收率第63-64页
   第四节 呋喃妥因抗体的检测结果与分析第64-69页
     ·呋喃妥因抗体效价的测定第64页
     ·化学发光法测定呋喃妥因抗体的灵敏度第64-65页
     ·化学发光ELISA法与比色ELISA法的比较第65-66页
     ·化学发光法测定呋喃妥因抗体的交叉率第66-67页
     ·化学发光法测定呋喃妥因抗体的回收率第67-69页
   第五节 加替沙星抗体的检测结果与分析第69-76页
     ·加替沙星抗体的效价测定第69页
     ·化学发光法测定加替沙星抗体的灵敏度第69-70页
     ·化学发光法与比色ELISA法的比较第70页
     ·化学发光法测定加替沙星抗体的交叉率第70-71页
     ·测定加替沙星在体系中的回收率第71-76页
       ·标准曲线的建立第71-72页
       ·消除生物基质的影响第72-73页
       ·加替沙星的回收率第73-76页
         ·化学发光ELISA法测定的加替沙星的回收率第73-74页
         ·LC-MS法测定的加替沙星回收率第74-76页
  第四章 结论第76-79页
附图第79-83页
参考文献第83-91页
致谢第91-92页
本人发表的文章和专利第92-93页
学位论文评阅及答辩情况表第93页

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