| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-26页 |
| 1 苹果酸脱氢酶研究进展 | 第11-16页 |
| 2 茶树新基因的研究现状 | 第16页 |
| 3 链霉菌简介 | 第16-18页 |
| 4 研究意义和展望 | 第18-21页 |
| 参考文献 | 第21-26页 |
| 第二章 茶树胞质型苹果酸脱氢酶基因(Cs-cMDH)的克隆及原核表达 | 第26-47页 |
| 1 材料和方法 | 第26-34页 |
| ·材料与试剂 | 第26-27页 |
| ·总RNA 的提取与cDNA 的获得 | 第27-28页 |
| ·Cs-cMDH 基因保守片段的扩增 | 第28-29页 |
| ·Cs-cMDH 基因的5′RACE 和3′RACE | 第29-30页 |
| ·Cs-cMDH 基因全长cDNA 的获得 | 第30-31页 |
| ·Cs-cMDH 基因的异源表达 | 第31-34页 |
| ·Cs-cMDH 的氨基酸序列及理化性质分析 | 第34页 |
| ·Cs-cMDH 的氨基酸序列分析及结构预测 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-42页 |
| ·茶树总RNA 的提取 | 第34页 |
| ·全长Cs-cMDH 基因的获得 | 第34-36页 |
| ·Cs-cMDH 的异源表达 | 第36-38页 |
| ·Cs-cMDH 的氨基酸序列及理化性质分析 | 第38-42页 |
| ·基于结构的Cs-cMDH 二级结构及3D 预测 | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 第三章 变铅青链霉菌TK54 苹果酸脱氢酶的表达、纯化及酶动力学研究 | 第47-64页 |
| 1 材料和方法 | 第47-53页 |
| ·材料与试剂 | 第47-48页 |
| ·SlMDH 基因的扩增 | 第48-49页 |
| ·目的基因的纯化和pET-SlMDH 重组质粒的获得 | 第49页 |
| ·SlMDH 的表达与纯化 | 第49-50页 |
| ·纯化蛋白浓度的测定 | 第50页 |
| ·Western blot 分析及SlMDH 分子量的测定 | 第50-51页 |
| ·酶动力学参数的分析 | 第51-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-60页 |
| ·SlMDH 基因的扩增 | 第53-54页 |
| ·重组质粒pET-SlMDH 的获得和鉴定 | 第54页 |
| ·SlMDH 的表达和纯化 | 第54-55页 |
| ·SlMDH 的酶学性质 | 第55-60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附：本人在读期间发表论文、申请专利以及获奖情况一览表 | 第65页 |
