| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-25页 |
| 目录 | 第25-30页 |
| 前言 | 第30-32页 |
| 第一章 抗增殖蛋白参与定心方减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的初步机制 | 第32-52页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·实验动物 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-41页 |
| ·定心方水煎剂制备 | 第34-35页 |
| ·动物分组及处理 | 第35页 |
| ·动物模型制作方法 | 第35-36页 |
| ·心律失常评分方法 | 第36页 |
| ·组织蛋白样品提取 | 第36页 |
| ·BCA法蛋白定量 | 第36-37页 |
| ·蛋白质印迹检测 | 第37-41页 |
| ·溶液配制 | 第37-38页 |
| ·western blot蛋白质印迹 | 第38-41页 |
| ·统计方法 | 第41页 |
| ·实验结果 | 第41-45页 |
| ·心律失常评分 | 第41-42页 |
| ·prohibitin与MAPK通路蛋白的表达 | 第42-44页 |
| ·prohibitin与MAPK通路的相关性 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-50页 |
| ·小结 | 第50-52页 |
| 第二章 体外实验平台建立 | 第52-87页 |
| 第一节 定心方含药血清制备及优化 | 第52-62页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·实验动物 | 第52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·定心方水煎剂制备 | 第53页 |
| ·动物分组及处理 | 第53页 |
| ·原代心肌细胞培养 | 第53-54页 |
| ·MTT检测 | 第54-55页 |
| ·统计方法 | 第55页 |
| ·实验结果 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第二节 定心方含药血清成分分析 | 第62-77页 |
| ·实验材料 | 第62-63页 |
| ·实验动物 | 第62页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-70页 |
| ·血清采集 | 第63页 |
| ·供试品溶液配制 | 第63页 |
| ·色谱质谱条件 | 第63-64页 |
| ·精密度实验 | 第64-65页 |
| ·线性关系考察 | 第65-68页 |
| ·稳定性实验 | 第68-69页 |
| ·回收率实验 | 第69页 |
| ·供试品溶液浓度测定 | 第69-70页 |
| ·结果 | 第70-71页 |
| ·讨论 | 第71-76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| 第三节 SIRNA转染原代心肌细胞浓度的筛选 | 第77-87页 |
| ·实验材料 | 第77页 |
| ·实验动物 | 第77页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第77页 |
| ·实验方法 | 第77-80页 |
| ·心肌细胞培养 | 第77-78页 |
| ·siRNA转染 | 第78页 |
| ·转染效率及凋亡率检测 | 第78-79页 |
| ·siRNA干扰效率蛋白表达验证 | 第79页 |
| ·统计方法 | 第79-80页 |
| ·结果 | 第80-84页 |
| ·荧光显微镜观察转染心肌细胞效果 | 第80-82页 |
| ·流式细胞仪检测转染心肌细胞效率 | 第82-83页 |
| ·流式细胞仪检测凋亡率 | 第83-84页 |
| ·siRNA转染后蛋白表达检测 | 第84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 第三章 抗增殖蛋白参与定心方减轻心肌细胞氧化应激损伤的初步机制 | 第87-100页 |
| ·材料 | 第87-88页 |
| ·实验动物 | 第87页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第87-88页 |
| ·实验方法 | 第88-90页 |
| ·含药血清制备 | 第88页 |
| ·原代心肌细胞培养 | 第88页 |
| ·实验分组及处理 | 第88-89页 |
| ·细胞凋亡率检测及蛋白免疫印迹检测 | 第89-90页 |
| ·统计方法 | 第90页 |
| ·实验结果 | 第90-94页 |
| ·细胞凋亡率 | 第90-91页 |
| ·prohibitin与MAPK通路蛋白表达 | 第91-94页 |
| ·prohibitin蛋白表达 | 第91-92页 |
| ·pERK蛋白表达 | 第92页 |
| ·pJNK蛋白表达 | 第92页 |
| ·pP38蛋白表达 | 第92-94页 |
| ·prohibitin与MAPK通路相关性分析 | 第94页 |
| ·讨论 | 第94-99页 |
| ·小结 | 第99-100页 |
| 全文总结 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-117页 |
| 附录 | 第117-118页 |
| 攻读学位期间成果 | 第118-120页 |
| 致谢 | 第120-122页 |
| 统计学证明 | 第122页 |