| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-29页 |
| ·研究意义 | 第11页 |
| ·多粘类芽孢杆菌及其促生机理 | 第11-12页 |
| ·多粘类芽孢杆菌 | 第11-12页 |
| ·多粘类芽孢杆菌的促生作用机理 | 第12页 |
| ·微生物的检测方法 | 第12-15页 |
| ·传统方法 | 第12页 |
| ·分子生物学方法 | 第12-15页 |
| ·PCR扩增技术 | 第12-13页 |
| ·DNA测序法 | 第13-14页 |
| ·变性梯度凝胶电泳 | 第14页 |
| ·抗生素标记法 | 第14页 |
| ·外源基因标记 | 第14页 |
| ·标记核酸探针杂交技术 | 第14-15页 |
| ·荧光原位杂交 | 第15-23页 |
| ·FISH技术简介 | 第15-16页 |
| ·FISH技术的操作步骤 | 第16-20页 |
| ·FISH探针的选择和制备 | 第17-19页 |
| ·样品的固定 | 第19页 |
| ·样品的预处理 | 第19页 |
| ·杂交 | 第19-20页 |
| ·漂洗 | 第20页 |
| ·观察 | 第20页 |
| ·FISH芽孢检测的研究 | 第20-21页 |
| ·FISH技术的应用 | 第21-22页 |
| ·FISH在环境微生物多样性检测方面的应用 | 第21-22页 |
| ·FISH在污水处理中的应用 | 第22页 |
| ·FISH在医学上的应用 | 第22页 |
| ·FISH在微生物有机肥中的应用 | 第22页 |
| ·环境样品中FISH定量分析的主要影响因素 | 第22-23页 |
| ·操作过程 | 第22-23页 |
| ·探针的特异性 | 第23页 |
| ·荧光显微镜 | 第23页 |
| ·计数 | 第23页 |
| ·样品浓度 | 第23页 |
| ·菌体自发荧光 | 第23页 |
| ·研究内容 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-29页 |
| 第二章 FISH检测多粘类芽孢杆菌方法的建立及其优化 | 第29-41页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·材料与方法 | 第29-31页 |
| ·供试菌株 | 第29页 |
| ·探针 | 第29页 |
| ·样品的收集与制备 | 第29-30页 |
| ·固定方法的确定 | 第30页 |
| ·分散方法的确定 | 第30页 |
| ·杂交温度和杂交时间的优化 | 第30-31页 |
| ·杂交缓冲液和杂交洗涤液的优化 | 第31页 |
| ·观察 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-36页 |
| ·样品收集时进行1xPBS冲洗和未进行冲洗的杂交结果 | 第31-32页 |
| ·不同固定方法的杂交结果 | 第32-33页 |
| ·不同分散方法的杂交结果 | 第33-34页 |
| ·不同杂交时间和杂交温度对杂交效率的影响 | 第34-35页 |
| ·杂交液中甲酰胺浓度和洗涤液中NaCl浓度对杂交效率的影响 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36页 |
| ·小结 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 第三章 FISH快速检测多粘类芽孢杆菌芽孢的研究 | 第41-53页 |
| ·引言 | 第41页 |
| ·材料与方法 | 第41-43页 |
| ·供试菌株 | 第41页 |
| ·探针 | 第41页 |
| ·样品的收集与制备 | 第41-42页 |
| ·扫描电镜观察各种预处理的芽孢表面结构及形态变化 | 第42-43页 |
| ·萌发预处理不同时间对SQR21芽孢杂交效率的影响 | 第43页 |
| ·萌发预处理对营养体细胞杂交的影响 | 第43页 |
| ·FISH检测猪粪有机肥中SQR21的变化 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-49页 |
| ·不同预处理对SQR21芽孢形态及荧光原位杂交效果的影响 | 第43-46页 |
| ·萌发处理不同时间对SQR21芽孢荧光原位杂交效率的影响 | 第46页 |
| ·萌发预处理对SQR21菌体荧光原位杂交的影响 | 第46-47页 |
| ·FISH检测猪粪有机肥中多粘类芽孢杆菌的变化 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 第四章 FISH技术检测有机肥和土壤中的SQR21 | 第53-63页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·材料与方法 | 第53-55页 |
| ·供试有机肥和土壤 | 第53页 |
| ·样品的制备方法 | 第53-55页 |
| ·土壤中SQR21的FISH检测 | 第55页 |
| ·猪粪有机肥中SQR21的FISH检测 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-59页 |
| ·不同方法收集猪粪有机肥和土壤中SQR21的杂交结果 | 第55-56页 |
| ·土壤中SQR21的FISH检测 | 第56-57页 |
| ·猪粪有机肥中多粘类芽孢杆菌的FISH检测 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59页 |
| ·小结 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 全文结论 | 第63-65页 |
| 附录 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
