| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 1 引言 | 第12-20页 |
| ·大肠杆菌研究进展 | 第12-13页 |
| ·大肠杆菌生化特性 | 第12页 |
| ·大肠杆菌病危害及防治难问题 | 第12-13页 |
| ·大肠杆菌耐药性 | 第13-17页 |
| ·耐药性的产生 | 第13页 |
| ·耐药性产生的遗传机制 | 第13-14页 |
| ·细菌产生耐药性的生化机制 | 第14-16页 |
| ·大肠杆菌耐药性现状及耐药性检测意义 | 第16-17页 |
| ·氟苯尼考研究进展 | 第17-18页 |
| ·氟苯尼考研究现状 | 第17页 |
| ·氟苯尼考耐药机制 | 第17-18页 |
| ·分子生物学技术的应用 | 第18-19页 |
| ·分子生物学技术 | 第18页 |
| ·整合子系统对细菌耐药性的影响 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 不同动物源大肠杆菌的分离鉴定及耐药谱测定 | 第20-37页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·病料来源 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20页 |
| ·微量生化发酵管 | 第20页 |
| ·标准O 型分型血清及标准菌株 | 第20页 |
| ·抗生素药敏片 | 第20页 |
| ·仪器设备 | 第20-21页 |
| ·方法、步骤 | 第21-26页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·大肠杆菌分离纯化 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌生化鉴定 | 第23页 |
| ·菌种保存 | 第23-24页 |
| ·分离菌O 血清型鉴定 | 第24页 |
| ·分离菌耐药谱测定 | 第24-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-35页 |
| ·细菌分离、纯化 | 第26-27页 |
| ·细菌生化特性 | 第27-31页 |
| ·细菌O 血清型鉴定 | 第31-32页 |
| ·细菌耐药谱测定 | 第32-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 3 IntⅠ基因、flor 基因和 cmlA 基因的克隆 | 第37-47页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·菌株 | 第37页 |
| ·酶及试剂 | 第37页 |
| ·仪器设备 | 第37-38页 |
| ·方法步骤 | 第38-43页 |
| ·试剂配制及培养基制备 | 第38-39页 |
| ·基因组DNA 提取 | 第39页 |
| ·质粒DNA 提取 | 第39-40页 |
| ·引物设计及合成 | 第40页 |
| ·PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·产物回收 | 第41-42页 |
| ·flor 基因与pGEM-T easy 载体的连接 | 第42页 |
| ·感受态细胞的制备及质粒转化 | 第42-43页 |
| ·鉴定 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-45页 |
| ·引物设计及合成 | 第43-44页 |
| ·DNA 提取 | 第44页 |
| ·PCR 扩增产物 | 第44-45页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 4 不同动物源大肠杆菌耐氟苯尼考基因的测序及分析 | 第47-54页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·菌株 | 第47页 |
| ·酶及试剂 | 第47页 |
| ·仪器设备 | 第47-48页 |
| ·方法、步骤 | 第48-49页 |
| ·试剂配制及培养基制备 | 第48-49页 |
| ·筛选耐氟苯尼考大肠杆菌 | 第49页 |
| ·flor 基因序列的测定 | 第49页 |
| ·基因序列的比对及分析 | 第49页 |
| ·基因工程菌的构建及耐药性检测 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-53页 |
| ·氟苯尼考耐药性检测 | 第49页 |
| ·本研究中不同动物源待测菌flor 基因的比对 | 第49-51页 |
| ·本研究中待测菌flor 基因与cmlA 基因的比对 | 第51页 |
| ·本研究中待测菌flor 基因与已报道flor 基因的比对 | 第51-52页 |
| ·基因进化树 | 第52页 |
| ·基因工程菌的构建及耐药性检测 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 攻读学位论文期间发表论文情况 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
