| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-13页 |
| 2 材料、试剂与仪器 | 第13-22页 |
| ·菌株和细胞株 | 第13页 |
| ·主要试剂及配制 | 第13-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·引物设计 | 第21-22页 |
| 3 方法与步骤 | 第22-34页 |
| ·总RNA 的提取 | 第22页 |
| ·RT-PCR 扩增FILIP1L 基因 | 第22-23页 |
| ·PCR 产物凝胶回收 | 第23页 |
| ·PCR 产物及载体双酶切 | 第23-24页 |
| ·连接载体和转化大肠杆菌 | 第24-25页 |
| ·挑取及鉴定阳性克隆 | 第25页 |
| ·质粒提取，双酶切鉴定及测序 | 第25页 |
| ·重组质粒原核表达 | 第25-30页 |
| ·转化原核表达载体BL21 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的原核诱导蛋白表达 | 第26页 |
| ·蛋白质凝胶电泳 | 第26-27页 |
| ·Western blotting 蛋白印迹 | 第27-28页 |
| ·Western blotting 检测诱导表达蛋白 | 第28-29页 |
| ·蛋白纯化样品制备 | 第29页 |
| ·柱纯化 | 第29-30页 |
| ·纯化蛋白超滤浓缩 | 第30页 |
| ·原核表达蛋白的多克隆抗体制备 | 第30-32页 |
| ·多克隆抗体制备 | 第30-31页 |
| ·多克隆抗体的效价检测 | 第31-32页 |
| ·多克隆抗体的特异性检测 | 第32页 |
| ·免疫共沉淀检测相互作用蛋白 | 第32-34页 |
| 4 结果 | 第34-43页 |
| ·RT-PCR 扩增FILIP1L 胞外段基因 | 第34页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第34-36页 |
| ·重组质粒的原核诱导蛋白表达情况 | 第36-37页 |
| ·诱导蛋白的纯化及鉴定 | 第37-40页 |
| ·制备多克隆抗体及效价检测 | 第40-41页 |
| ·比较肿瘤组织与正常组织中 FILIP1L 相关蛋白的差异表达情况 | 第41-43页 |
| 5 讨论 | 第43-44页 |
| 6 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 文献综述 | 第48-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |