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三角梅核糖体失活蛋白转基因番茄抗病虫功能研究

摘要第10-12页
Abstract第12-13页
第1章 前言第14-35页
    1.1 核糖体失活蛋白定义、分布及类型第14-16页
        1.1.1 核糖体失活蛋白发现第14页
        1.1.2 核糖体失活蛋白类型第14-16页
    1.2 核糖体失活蛋白多种酶活特性第16-20页
        1.2.1 RNA N-糖苷酶活性第16-17页
        1.2.2 核糖核酸酶(RNase)活性第17-18页
        1.2.3 超螺旋DNA的解旋酶活性第18-19页
        1.2.4 超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活性第19页
        1.2.5 其他酶学活性第19-20页
    1.3 核糖体失活蛋白生物学功能第20-24页
        1.3.1 抗病毒功能第20-22页
        1.3.2 抗肿瘤功能第22-24页
        1.3.3 抗孕功能及其他功能第24页
    1.4 核糖体失活蛋白在农业上的应用第24-26页
        1.4.1 抗植物病毒、细菌、真菌作用第25-26页
        1.4.2 抗昆虫作用第26页
        1.4.3 农业生产上的其他作用第26页
    1.5 核糖体失活蛋白转基因的应用与优势第26-28页
        1.5.1 核糖体失活蛋白转基因的研究应用第26-27页
        1.5.2 核糖体失活蛋白转基因应用的优势第27-28页
    1.6 三角梅RIPs第28-30页
        1.6.1 三角梅简介第28页
        1.6.2 三角梅核糖体失活蛋白简介第28-29页
        1.6.3 三角梅核糖体失活蛋白基因的多态性第29页
        1.6.4 三角梅核糖体失活蛋白生物活性及功能第29-30页
        1.6.5 三角梅核糖体失活蛋白应用第30页
    1.7 番茄转基因抗病虫育种研究第30-33页
        1.7.1 番茄及其病虫危害第30-31页
        1.7.2 番茄抗病虫转基因育种的方法及优势第31-32页
        1.7.3 番茄抗病虫转基因育种存在的问题第32-33页
    1.8 本研究的内容及意义第33-35页
        1.8.1 研究内容第33-34页
        1.8.2 研究意义第34-35页
第2章 材料与方法第35-54页
    2.1 实验材料第35-38页
        2.1.1 植物材料第35页
        2.1.2 菌株与质粒第35页
        2.1.3 主要试剂第35-36页
        2.1.4 主要仪器第36-37页
        2.1.5 常用溶液及培养基的配制方法第37-38页
    2.2 实验方法与步骤第38-54页
        2.2.1 三角梅总RNA提取及电泳检测第38页
        2.2.2 逆转录合成cDNA第一链第38-39页
        2.2.3 RT-PCR引物第39-40页
        2.2.4 三角梅RIPs—Bouganin基因的克隆第40-41页
        2.2.5 Bouganin基因与pMD-18T Vector的载体重组第41-43页
        2.2.6 植物表达载体pCAMBIA-1301-Bou-J和pCAMBIA-1301-Bou-K的构建第43-47页
        2.2.7 植物表达载体pCAMBIA-1301-Bou-J和pCAMBIA-1301-Bou-K转化农杆菌GV3101第47-48页
        2.2.8 农杆菌介导的番茄转基因第48-50页
        2.2.9 转基因番茄阳性植株的鉴定第50-51页
        2.2.10 转基因番茄抗蚜虫实验第51-52页
        2.2.11 转基因番茄抗番茄灰霉菌实验第52页
        2.2.12 转基因番茄抗烟草花叶病毒实验第52-53页
        2.2.13 数据分析第53-54页
第3章 结果与分析第54-74页
    3.1 表达载体及转化载体构建第54-60页
        3.1.1 提取三角梅总RNA第54-55页
        3.1.2 RNA逆转录第55-56页
        3.1.3 RT-PCR产物检测第56页
        3.1.4 克隆载体构建结果第56-59页
        3.1.5 表达载体构建结果第59-60页
    3.2 获取转基因番茄再生植株第60-65页
        3.2.1 培育过程第60-63页
        3.2.2 转基因番茄再生植株阳性鉴定第63-64页
        3.2.3 大田种植第64-65页
    3.3 转基因番茄再生植株抗性鉴定第65-72页
        3.3.1 蚜虫抗性鉴定第65-67页
        3.3.2 灰霉菌抗性鉴定第67-70页
        3.3.3 烟草花叶病毒抗性鉴定第70-72页
    3.4 三角梅RIPs多态性研究第72-74页
        3.4.1 三角梅RIPs基因多态性第72-73页
        3.4.2 三角梅RIPs功能多态性第73-74页
第4章 结论与展望第74-75页
参考文献第75-83页
致谢第83页

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