| 缩略语表 | 第7-9页 |
| 中文摘要 | 第9-14页 |
| Abstract | 第14-19页 |
| 前言 | 第20-23页 |
| 文献回顾 | 第23-35页 |
| 第一部分 SETD6/Nrf2在镉诱导细胞Redox稳态失调中的调节作用与机制 | 第35-50页 |
| 1 材料 | 第35-36页 |
| 1.1 细胞系 | 第35页 |
| 1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
| 1.3 主要仪器 | 第36页 |
| 2 方法 | 第36-40页 |
| 2.1 细胞系与细胞培养 | 第36页 |
| 2.2 细胞活力测定 | 第36-37页 |
| 2.3 细胞指数测定 | 第37页 |
| 2.4 细胞ROS测定 | 第37页 |
| 2.5 细胞总SOD活性测定 | 第37页 |
| 2.6 RT-PCR | 第37-38页 |
| 2.7 Westernblot | 第38-39页 |
| 2.8 统计分析 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-46页 |
| 3.1 镉对细胞活力和细胞指数影响的量效与时效关系 | 第40-42页 |
| 3.2 镉对细胞ROS水平影响的量效与时效关系 | 第42-43页 |
| 3.3 镉对细胞SOD活性的影响 | 第43-44页 |
| 3.4 镉对Redox稳态SETD6和Nrf2等关键分子表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.5 镉对Redox稳态相关蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| 4.1 镉暴露能剂量依赖性影响细胞增殖,随处理时间延长损伤加重 | 第47-48页 |
| 4.2 镉暴露对Nrf2表达的影响,低剂量上调,高剂量反而下调 | 第48页 |
| 4.3 镉能影响细胞SETD6的基因和蛋白表达 | 第48页 |
| 4.4 镉能影响细胞DJ-1的基因和蛋白表达 | 第48-50页 |
| 第二部分 硒对镉诱导细胞Redox稳态失调的调节作用与机制 | 第50-60页 |
| 1 材料 | 第50页 |
| 1.1 细胞系 | 第50页 |
| 1.2 主要试剂 | 第50页 |
| 1.3 主要仪器 | 第50页 |
| 2 方法 | 第50-52页 |
| 2.1 细胞培养 | 第50页 |
| 2.2 细胞分组与处理及细胞活力测定 | 第50-51页 |
| 2.3 硒镉联合作用分组与处理及细胞活力测定 | 第51页 |
| 2.4 硒镉联合作用分组与处理及细胞ROS测定 | 第51页 |
| 2.5 硒对细胞Redox稳态影响的处理与相关基因的测定 | 第51-52页 |
| 2.6 Westernblot | 第52页 |
| 2.7 统计分析 | 第52页 |
| 3 结果 | 第52-56页 |
| 3.1 硒对细胞活力的影响 | 第52页 |
| 3.2 硒对镉诱导细胞活力损伤的保护作用 | 第52-53页 |
| 3.3 硒对镉诱导细胞ROS生成的影响 | 第53-54页 |
| 3.4 不同浓度的硒对细胞Redox稳态相关基因的影响 | 第54-56页 |
| 3.5 硒对镉诱导细胞Redox稳态相关蛋白表达的影响 | 第56页 |
| 4 讨论 | 第56-60页 |
| 4.1 低浓度硒对细胞活力无损伤影响 | 第57页 |
| 4.2 硒能改善镉诱导细胞形态变化,减少细胞活力损伤 | 第57页 |
| 4.3 硒能减少镉诱导细胞ROS的生成 | 第57-58页 |
| 4.4 硒在一定剂量范围内能激活抗氧化系统 | 第58页 |
| 4.5 硒能促进DJ-1、Nrf2蛋白表达,对抗镉诱导细胞Redox稳态失衡 | 第58-60页 |
| 第三部分 硒对慢性镉暴露致大鼠肾氧化损伤的保护作用与机制 | 第60-72页 |
| 1 材料 | 第60页 |
| 1.1 实验动物 | 第60页 |
| 1.2 主要试剂 | 第60页 |
| 1.3 主要仪器 | 第60页 |
| 2 方法 | 第60-63页 |
| 2.1 动物分组与处理 | 第60-61页 |
| 2.2 体重与肾脏湿重测定 | 第61页 |
| 2.3 尿液收集 | 第61页 |
| 2.4 血清收集 | 第61页 |
| 2.5 组织匀浆的制备 | 第61-62页 |
| 2.6 肾脏组织切片的制备 | 第62页 |
| 2.7 血清生化相关指标的测定 | 第62页 |
| 2.8 尿液生化相关指标的测定 | 第62页 |
| 2.9 氧化应激相关指标的测定 | 第62页 |
| 2.10 RT-PCR测定肾组织mRNA含量 | 第62页 |
| 2.11 Westernblot测定肾组织蛋白的表达 | 第62-63页 |
| 2.12 统计分析 | 第63页 |
| 3 结果 | 第63-68页 |
| 3.1 体重和肾脏指数变化 | 第63页 |
| 3.2 肾功能变化 | 第63-65页 |
| 3.3 肾脏ROS水平变化 | 第65-66页 |
| 3.4 肾脏氧化应激指标变化 | 第66-67页 |
| 3.5 肾脏组织蛋白表达 | 第67页 |
| 3.6 肾组织病理学变化 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-72页 |
| 4.1 镉和硒对大鼠体重与肾脏系数无显著影响 | 第68-69页 |
| 4.2 硒干预能够减轻镉暴露导致的大鼠肾功能损伤 | 第69页 |
| 4.3 硒能抑制镉诱导大鼠尿液NAG和总蛋白浓度的升高 | 第69页 |
| 4.4 硒能减轻镉诱导大鼠肾脏氧化应激损伤 | 第69-70页 |
| 4.5 SETD6/DJ-1/Nrf2在维持Redox稳态平衡和失调中发挥重要作用 | 第70-71页 |
| 4.6 硒能够减轻镉引起的大鼠肾脏病理改变 | 第71-72页 |
| 第四部分 过表达SETD6对镉诱导细胞Redox稳态失调的调节作用与机制 | 第72-77页 |
| 1 材料 | 第72页 |
| 1.1 细胞系 | 第72页 |
| 1.2 主要试剂 | 第72页 |
| 1.3 主要仪器 | 第72页 |
| 2 方法 | 第72-73页 |
| 2.1 细胞培养 | 第72页 |
| 2.2 慢病毒转染细胞方法 | 第72-73页 |
| 2.3 过表达SETD6细胞的细胞指数测定 | 第73页 |
| 2.4 过表达SETD6细胞的ROS含量测定 | 第73页 |
| 2.5 统计分析 | 第73页 |
| 3 结果 | 第73-75页 |
| 3.1 慢病毒转染能稳定上调细胞中SETD6的蛋白表达 | 第73-74页 |
| 3.2 镉对过表达SETD6细胞的细胞指数的影响 | 第74页 |
| 3.3 镉对过表达SETD6细胞的ROS含量的影响 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-77页 |
| 4.1 SETD6在细胞生存和增殖中发挥重要作用 | 第75-76页 |
| 4.2 过表达SETD6对镉暴露导致的ROS产生无显著影响 | 第76-77页 |
| 小结 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 个人简历和研究成果 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
