| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 1.绪言 | 第9-12页 |
| 2.材料与方法 | 第12-24页 |
| 2.1. 实验与所用动物 | 第12页 |
| 2.2. 实验器材 | 第12-15页 |
| 2.2.1. 主要耗材 | 第12页 |
| 2.2.2. 主要实验仪器 | 第12-13页 |
| 2.2.3. 主要试剂 | 第13页 |
| 2.2.4. 常用试剂配方 | 第13-15页 |
| 2.3. 成纤维细胞的取材、传代及鉴定 | 第15-18页 |
| 2.3.1. 成纤维细胞取材与原代培养 | 第15-16页 |
| 2.3.2. 成纤维细胞冻存与复苏 | 第16-17页 |
| 2.3.3. 成纤维细胞鉴定 | 第17-18页 |
| 2.4. OPCs取材及鉴定 | 第18-19页 |
| 2.4.1. OPCs取材 | 第18页 |
| 2.4.2. OPCs的免疫荧光实验 | 第18-19页 |
| 2.5. 成纤维细胞及OPCs的RNA提取 | 第19-20页 |
| 2.6. Mi-RNAs的筛选 | 第20-21页 |
| 2.6.1. Mi-RNAs的第一链DNA(cDNA)的合成 | 第20页 |
| 2.6.2. Mi-RNA的qPCR检测 | 第20-21页 |
| 2.7. 成纤维细胞、OPCs、OLs特异性基因的引物设计 | 第21-22页 |
| 2.7.1. 引物设计 | 第21-22页 |
| 2.7.2. 设计引物的序列如下 | 第22页 |
| 2.8. 转分化实验 | 第22-24页 |
| 2.8.1. 转分化条件的摸索 | 第22-23页 |
| 2.8.2. 分组及转分化诱导过程 | 第23页 |
| 2.8.3. 免疫荧光实验检测 | 第23页 |
| 2.8.4. RT-qPCR检测 | 第23-24页 |
| 2.9. 统计分析数据 | 第24页 |
| 3.实验结果 | 第24-35页 |
| 3.1. 取材的成纤维细胞鉴定 | 第24-25页 |
| 3.1.1. 形态学特征 | 第24页 |
| 3.1.2. 免疫荧光实验鉴定 | 第24-25页 |
| 3.2. 大鼠OPCs免疫荧光实验鉴定结果 | 第25-26页 |
| 3.3. MiRNAs实时荧光定量RT-qPCR结果 | 第26-27页 |
| 3.4. 转分化组细胞鉴定 | 第27-32页 |
| 3.4.1. 转分化所得细胞的光镜结果 | 第27页 |
| 3.4.2. 转分化所得OPCs样细胞免疫荧光鉴定结果 | 第27-30页 |
| 3.4.3. 转分化所得细胞RT-qPCR结果 | 第30-32页 |
| 3.5. 空白组及阴性对照组结果 | 第32-35页 |
| 4.讨论 | 第35-38页 |
| 5.结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-41页 |
| 综述 | 第41-54页 |
| 一、细胞转分化的概念 | 第41-42页 |
| 二、借助于转录因子的转分化 | 第42-45页 |
| 1.神经元的转分化 | 第42-43页 |
| 2.OPCs和OLs的转分化 | 第43页 |
| 3.心肌样细胞的转分化 | 第43-44页 |
| 4.肝细胞样细胞的转分化 | 第44页 |
| 5.造血祖细胞的转分化 | 第44-45页 |
| 三、借助于miRNAs的转分化重编程及iPSCs重编程 | 第45-47页 |
| 1.对重编程有重要作用的miRNAs | 第45-46页 |
| 2.IPSCs的重编程 | 第46页 |
| 3.心肌细胞的转分化 | 第46页 |
| 4.神经元的转分化 | 第46-47页 |
| 四、细胞转分化相对于iPS重编程技术的优势 | 第47-49页 |
| 1.转分化细胞的安全性问题 | 第48页 |
| 2.细胞数量和增殖能力问题 | 第48页 |
| 3.转化分细胞的迁移和与周围组织整合能力问题 | 第48-49页 |
| 五、MiRNAs转染入细胞的途径 | 第49-50页 |
| 1.非病毒载体转染 | 第49页 |
| 2.病毒载体的转染 | 第49-50页 |
| 六、前景和展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 附录1 | 第54-55页 |
| 附录2 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
