| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文章综述 | 第11-23页 |
| 1 细环病毒科研究进展 | 第11-13页 |
| 2 细环病毒属分类研究进展 | 第13-18页 |
| 3 猪细环病毒分类研究进展 | 第18-20页 |
| 4 猪细环病毒基因组特征 | 第20-21页 |
| 5 猪细环病毒流行性学 | 第21页 |
| 6 猪细环病毒的致病性 | 第21-22页 |
| 7 研究的目的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 猪细环病毒K2型ORF3基因的克隆与分析 | 第23-38页 |
| 1 材料与方法 | 第23-27页 |
| 1.1 实验所需试剂 | 第23页 |
| 1.2 样品基因组DNA提取 | 第23-24页 |
| 1.3 猪细环病毒的检测 | 第24页 |
| 1.4 猪细环病毒K2型ORF3基因扩增 | 第24-25页 |
| 1.5 猪细环病毒K2型ORF3基因的克隆 | 第25-26页 |
| 1.6 序列测定与拼接 | 第26页 |
| 1.7 猪细环病毒K2型ORF3基因序列分析 | 第26-27页 |
| 2 结果 | 第27-36页 |
| 2.1 病料的流行病学检测 | 第27-30页 |
| 2.2 PTTSuV k2 ORF3基因的分段扩增 | 第30-32页 |
| 2.3 PTTSuV k2 ORF3序列分析 | 第32-34页 |
| 2.4 PTTSuV K2 ORF3核苷酸同源性比较和遗传进化分析 | 第34-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 基于SYBR Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立 | 第38-47页 |
| 1 主要试剂和仪器 | 第38页 |
| 2 标准品的制备 | 第38页 |
| 3 基于SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立 | 第38-39页 |
| 3.1 引物设计及合成 | 第38页 |
| 3.2 PCR温度条件的优化 | 第38页 |
| 3.3 荧光定量反应条件优化 | 第38-39页 |
| 3.4 标准曲线的建立 | 第39页 |
| 3.5 特异性检测 | 第39页 |
| 3.6 变异系数测定 | 第39页 |
| 4 实时荧光定量PCR的初步应用 | 第39-41页 |
| 4.1 待检测样品DNA提取 | 第39-40页 |
| 4.2 常规PCR检测 | 第40-41页 |
| 4.3 实时荧光定量PCR检测 | 第41页 |
| 5 结果 | 第41-45页 |
| 5.1 退火温度优化 | 第41-42页 |
| 5.2 优化的实时荧光定量PCR条件 | 第42页 |
| 5.3 实时荧光定量PCR标准曲线 | 第42页 |
| 5.4 实时荧光定量溶解曲线分析 | 第42-43页 |
| 5.5 实时荧光定量特异性 | 第43页 |
| 5.6 实时荧光定量PCR重复性与再现性 | 第43-44页 |
| 5.7 临床样品的检测 | 第44-45页 |
| 6 讨论 | 第45-47页 |
| 全文结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简历 | 第55页 |
