缩略词表 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
前言 | 第11-17页 |
第一部分 MiR-19a抑制人类结肠癌细胞及过表达miR-17-92小鼠结直肠粘膜中KRAS的表达 | 第17-42页 |
1.引言 | 第17-18页 |
2.主要实验材料与实验仪器 | 第18-20页 |
2.1 主要实验材料 | 第18-19页 |
2.2 关键仪器 | 第19-20页 |
3.实验步骤 | 第20-34页 |
3.1 构建pGL3KRAS3’-UTR及pGL3KRAS3’-UTRMUT重组质粒 | 第20-24页 |
3.2 蛋白质相关实验和方法 | 第24-25页 |
3.3 RNA相关实验和方法 | 第25-31页 |
3.4 细胞相关实验和方法 | 第31-34页 |
4 结果 | 第34-37页 |
4.1 .MiR-19a能与人类结肠癌细胞系(HCT116)中KRAS3’UTR相结合 | 第34页 |
4.2 .构建过表达miR-19a的HCT116细胞 | 第34-35页 |
4.3 .过表达miR-19aHCT116细胞中KRAS的表达量下降 | 第35-36页 |
4.4 .过表达miR-17-92小鼠结直肠粘膜中KRAS表达量下降 | 第36-37页 |
5 讨论 | 第37-42页 |
第二部分 体外实验发现miR-19a通过阻断KRAS抑制血管形成 | 第42-49页 |
1.引言 | 第42-44页 |
2.主要实验材料与实验仪器 | 第44-45页 |
2.1 主要实验材料 | 第44页 |
2.2 主要实验仪器 | 第44-45页 |
3.操作步骤 | 第45页 |
4.结果 | 第45-46页 |
5.讨论 | 第46-49页 |
第三部分 MiR-19a抑制裸鼠中结直肠肿瘤的生长。 | 第49-59页 |
1.引言 | 第49页 |
2.主要实验材料与实验仪器 | 第49-51页 |
2.1 主要实验材料 | 第49-50页 |
2.2 关键仪器 | 第50-51页 |
3.实验步骤 | 第51-54页 |
3.1 裸鼠成瘤实验 | 第51页 |
3.2 蛋白免疫印迹( Western blotting) | 第51-52页 |
3.3 石蜡切片 | 第52-53页 |
3.4 HE染色法 | 第53页 |
3.5 免疫组织化学染色 | 第53-54页 |
4 结果 | 第54-56页 |
5.讨论 | 第56-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-72页 |
综述 | 第72-84页 |
参考文献 | 第80-84页 |
附录 试剂配方 | 第84-88页 |
致谢 | 第88页 |