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过表达miR-19a通过抑制KRAS减少结直肠癌血管生成

缩略词表第5-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
前言第11-17页
第一部分 MiR-19a抑制人类结肠癌细胞及过表达miR-17-92小鼠结直肠粘膜中KRAS的表达第17-42页
    1.引言第17-18页
    2.主要实验材料与实验仪器第18-20页
        2.1 主要实验材料第18-19页
        2.2 关键仪器第19-20页
    3.实验步骤第20-34页
        3.1 构建pGL3KRAS3’-UTR及pGL3KRAS3’-UTRMUT重组质粒第20-24页
        3.2 蛋白质相关实验和方法第24-25页
        3.3 RNA相关实验和方法第25-31页
        3.4 细胞相关实验和方法第31-34页
    4 结果第34-37页
        4.1 .MiR-19a能与人类结肠癌细胞系(HCT116)中KRAS3’UTR相结合第34页
        4.2 .构建过表达miR-19a的HCT116细胞第34-35页
        4.3 .过表达miR-19aHCT116细胞中KRAS的表达量下降第35-36页
        4.4 .过表达miR-17-92小鼠结直肠粘膜中KRAS表达量下降第36-37页
    5 讨论第37-42页
第二部分 体外实验发现miR-19a通过阻断KRAS抑制血管形成第42-49页
    1.引言第42-44页
    2.主要实验材料与实验仪器第44-45页
        2.1 主要实验材料第44页
        2.2 主要实验仪器第44-45页
    3.操作步骤第45页
    4.结果第45-46页
    5.讨论第46-49页
第三部分 MiR-19a抑制裸鼠中结直肠肿瘤的生长。第49-59页
    1.引言第49页
    2.主要实验材料与实验仪器第49-51页
        2.1 主要实验材料第49-50页
        2.2 关键仪器第50-51页
    3.实验步骤第51-54页
        3.1 裸鼠成瘤实验第51页
        3.2 蛋白免疫印迹( Western blotting)第51-52页
        3.3 石蜡切片第52-53页
        3.4 HE染色法第53页
        3.5 免疫组织化学染色第53-54页
    4 结果第54-56页
    5.讨论第56-59页
结论第59-60页
参考文献第60-72页
综述第72-84页
    参考文献第80-84页
附录 试剂配方第84-88页
致谢第88页

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