| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 1 绪论 | 第7-14页 |
| 1.1 HSP27的结构和功能 | 第7-11页 |
| 1.1.1 HSP27的结构 | 第7-8页 |
| 1.1.2 HSP27的功能 | 第8-11页 |
| 1.2 肿瘤细胞迁移 | 第11-12页 |
| 1.2.1 流体剪切应力对肿瘤细胞细胞转移的影响 | 第11页 |
| 1.2.2 肿瘤细胞迁移的分子基础 | 第11-12页 |
| 1.3 荧光共振能量转移技术 | 第12-13页 |
| 1.4 本文的研究目的 | 第13-14页 |
| 2 HSP27相关探针的设计 | 第14-28页 |
| 2.1 HSP27自聚合探针的设计原理 | 第14页 |
| 2.2 材料 | 第14-17页 |
| 2.2.1 引物 | 第14-16页 |
| 2.2.2 试剂与仪器 | 第16-17页 |
| 2.3 方法 | 第17-22页 |
| 2.3.1 PCR扩增 | 第18页 |
| 2.3.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第18-19页 |
| 2.3.3 凝胶回收提纯 | 第19页 |
| 2.3.4 酶切体系 | 第19-20页 |
| 2.3.5 连接酶切产物 | 第20页 |
| 2.3.6 质粒转导 | 第20页 |
| 2.3.7 质粒提取 | 第20-21页 |
| 2.3.8 细胞培养与转染 | 第21-22页 |
| 2.4 结果 | 第22-27页 |
| 2.4.1 ECFP-HSP27重组质粒的成功制备 | 第22-23页 |
| 2.4.2 HSP27-ECFP及HSP27-Ypet重组质粒的成功制备 | 第23-25页 |
| 2.4.3 HSP27突变体荧光探针成功制备 | 第25-27页 |
| 2.5 讨论 | 第27-28页 |
| 3 剪切应力作用下HSP27对细胞迁移的影响 | 第28-48页 |
| 3.1 材料和方法 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-34页 |
| 3.2.1 剪切应力加载系统 | 第29-31页 |
| 3.2.2 细胞迁移实验 | 第31-32页 |
| 3.2.3 图像采集 | 第32页 |
| 3.2.4 图像处理 | 第32-33页 |
| 3.2.5 数据处理与分析 | 第33页 |
| 3.2.6 实验设计 | 第33-34页 |
| 3.3 实验结果 | 第34-45页 |
| 3.3.1 剪切应力诱导HSP27极性分布 | 第34-35页 |
| 3.3.2 HSP27磷酸化对剪切应力诱导HSP27极性分布的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.3 抑制HSP27磷酸化可以抑制剪切应力诱导的HSP27解聚 | 第36-38页 |
| 3.3.4 HSP27磷酸化对剪切应力诱导的actin极性分布的影响 | 第38-40页 |
| 3.3.5 HSP27磷酸化对剪切应力诱导的FAK激活的影响 | 第40-43页 |
| 3.3.6 FAK激活和actin对剪切应力诱导的HSP27解聚的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.7 HSP27磷酸化对剪切应力诱导的细胞迁移影响 | 第44-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-57页 |
