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结核分枝杆菌Rv2667原核表达、纯化与晶体学研究

摘要第7-8页
Abstract第8页
1 文献综述第9-14页
    1.1 结核病和结核分枝杆菌第9-10页
        1.1.1 结核病第9-10页
        1.1.2 结核分枝杆菌第10页
    1.2 结核分枝杆菌的耐药性第10-11页
    1.3 蛋白质晶体学第11页
    1.4 AAA+蛋白酶家族研究进展第11-13页
    1.5 假想蛋白第13-14页
2 材料与方法第14-25页
    2.1 材料第14-17页
        2.1.1 质粒、菌株第14页
        2.1.2 培养基第14-15页
        2.1.3 溶液第15-16页
        2.1.4 实验试剂第16-17页
        2.1.5 实验仪器第17页
    2.2 方法第17-25页
        2.2.1 基因的生物信息学分析第17-18页
            2.2.1.1 基因限制性酶切位点分析第17页
            2.2.1.2 Rv2667蛋白质理化性质分析第17-18页
            2.2.1.3 蛋白信号肽预测第18页
            2.2.1.4 目的蛋白跨膜区分析第18页
            2.2.1.5 目的蛋白二级结构分析第18页
        2.2.2 结核分枝杆菌H37Rv基因组提取第18-19页
        2.2.3 结核分枝杆菌Rv2667基因克隆第19-21页
            2.2.3.1 Rv2667基因PCR第19页
            2.2.3.2 质粒小量提取第19-20页
            2.2.3.3 质粒与PCR产物酶切连接与转化大肠杆菌Top10第20-21页
        2.2.4 Rv2667蛋白诱导表达与镍柱纯化第21-22页
        2.2.5 Rv2667硒带衍生物的制备第22-23页
        2.2.6 AKTA系统蛋白纯化第23-24页
        2.2.7 Bradford蛋白质溶度测定第24页
        2.2.8 晶体筛选第24页
        2.2.9 X射线衍射第24-25页
3 结果与分析第25-38页
    3.1 Rv2667生物信息学分析第25-28页
        3.1.1 Rv2667酶切位点分析第25页
        3.1.2 Rv2667氨基酸序列理化性质分析第25-26页
        3.1.3 Rv2667蛋白信号肽分析第26页
        3.1.4 Rv2667跨膜区预测第26-27页
        3.1.5 Rv2667二级结构分析第27页
        3.1.6 Rv2667结构域预测第27-28页
    3.2 H37Rv基因组提取第28页
    3.3 Rv2667基因PCR第28-29页
    3.4 Rv2667蛋白的表达纯化第29-30页
    3.5 Rv2667蛋白浓度测定第30-31页
    3.6 Rv2667蛋白晶体筛选第31-33页
    3.7 Rv2667蛋白晶体X射线衍射第33-34页
    3.8 Se-Rv2667蛋白质衍生物晶体制备与衍射第34-35页
    3.9 Rv2667蛋白质分子筛分析第35-38页
4 讨论第38-40页
    4.1 结核病第38页
    4.2 Rv2667晶体学研究第38-39页
    4.3 Rv2667分子筛分析第39-40页
5 结论第40-41页
参考文献第41-47页
致谢第47-48页
附录第48-50页

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