摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8页 |
1 文献综述 | 第9-14页 |
1.1 结核病和结核分枝杆菌 | 第9-10页 |
1.1.1 结核病 | 第9-10页 |
1.1.2 结核分枝杆菌 | 第10页 |
1.2 结核分枝杆菌的耐药性 | 第10-11页 |
1.3 蛋白质晶体学 | 第11页 |
1.4 AAA+蛋白酶家族研究进展 | 第11-13页 |
1.5 假想蛋白 | 第13-14页 |
2 材料与方法 | 第14-25页 |
2.1 材料 | 第14-17页 |
2.1.1 质粒、菌株 | 第14页 |
2.1.2 培养基 | 第14-15页 |
2.1.3 溶液 | 第15-16页 |
2.1.4 实验试剂 | 第16-17页 |
2.1.5 实验仪器 | 第17页 |
2.2 方法 | 第17-25页 |
2.2.1 基因的生物信息学分析 | 第17-18页 |
2.2.1.1 基因限制性酶切位点分析 | 第17页 |
2.2.1.2 Rv2667蛋白质理化性质分析 | 第17-18页 |
2.2.1.3 蛋白信号肽预测 | 第18页 |
2.2.1.4 目的蛋白跨膜区分析 | 第18页 |
2.2.1.5 目的蛋白二级结构分析 | 第18页 |
2.2.2 结核分枝杆菌H37Rv基因组提取 | 第18-19页 |
2.2.3 结核分枝杆菌Rv2667基因克隆 | 第19-21页 |
2.2.3.1 Rv2667基因PCR | 第19页 |
2.2.3.2 质粒小量提取 | 第19-20页 |
2.2.3.3 质粒与PCR产物酶切连接与转化大肠杆菌Top10 | 第20-21页 |
2.2.4 Rv2667蛋白诱导表达与镍柱纯化 | 第21-22页 |
2.2.5 Rv2667硒带衍生物的制备 | 第22-23页 |
2.2.6 AKTA系统蛋白纯化 | 第23-24页 |
2.2.7 Bradford蛋白质溶度测定 | 第24页 |
2.2.8 晶体筛选 | 第24页 |
2.2.9 X射线衍射 | 第24-25页 |
3 结果与分析 | 第25-38页 |
3.1 Rv2667生物信息学分析 | 第25-28页 |
3.1.1 Rv2667酶切位点分析 | 第25页 |
3.1.2 Rv2667氨基酸序列理化性质分析 | 第25-26页 |
3.1.3 Rv2667蛋白信号肽分析 | 第26页 |
3.1.4 Rv2667跨膜区预测 | 第26-27页 |
3.1.5 Rv2667二级结构分析 | 第27页 |
3.1.6 Rv2667结构域预测 | 第27-28页 |
3.2 H37Rv基因组提取 | 第28页 |
3.3 Rv2667基因PCR | 第28-29页 |
3.4 Rv2667蛋白的表达纯化 | 第29-30页 |
3.5 Rv2667蛋白浓度测定 | 第30-31页 |
3.6 Rv2667蛋白晶体筛选 | 第31-33页 |
3.7 Rv2667蛋白晶体X射线衍射 | 第33-34页 |
3.8 Se-Rv2667蛋白质衍生物晶体制备与衍射 | 第34-35页 |
3.9 Rv2667蛋白质分子筛分析 | 第35-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
4.1 结核病 | 第38页 |
4.2 Rv2667晶体学研究 | 第38-39页 |
4.3 Rv2667分子筛分析 | 第39-40页 |
5 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
附录 | 第48-50页 |