中文摘要 | 第4-8页 |
abstract | 第8-12页 |
引言 | 第15-20页 |
1 材料与方法 | 第20-31页 |
1.1 材料 | 第20-24页 |
1.1.1 细胞株 | 第20页 |
1.1.2 主要试剂 | 第20-22页 |
1.1.3 主要仪器 | 第22页 |
1.1.4 主要液体的配制 | 第22-24页 |
1.2 方法 | 第24-30页 |
1.2.1 细胞培养 | 第24页 |
1.2.2 蛋白免疫印迹(Westernblot,WB) | 第24-25页 |
1.2.3 提取RNA、逆转录和实时荧光定量PCR(Q-PCR) | 第25-28页 |
1.2.4 Seahorse检测脂肪细胞呼吸量 | 第28-29页 |
1.2.5 油红染色定量脂滴 | 第29-30页 |
1.2.6 ATP含量的测定 | 第30页 |
1.3 统计学处理 | 第30-31页 |
2 结果 | 第31-47页 |
2.1 棕色脂肪细胞分化成功的表型和基因表达 | 第31-32页 |
2.2 线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞呼吸和脂滴聚集 | 第32-33页 |
2.3 线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化,降低制热基因、线粒体基因以及过氧化物酶体基因的表达 | 第33-35页 |
2.4 线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化过程中转录因子的表达 | 第35-36页 |
2.5 增加ATP或抑制ROS水平不能缓解氧化磷酸化缺陷对棕色脂肪细胞分化的抑制及恢复制热基因表达水平 | 第36-39页 |
2.6 抑制Ca~(2+)的上升不能缓解氧化磷酸化缺陷对棕色脂肪细胞分化的抑制及恢复制热基因表达水平 | 第39-40页 |
2.7 乳酸可以部分抑制棕色脂肪细胞分化 | 第40-41页 |
2.8 线粒体脂肪酸氧化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化和基因表达 | 第41-43页 |
2.9 线粒体氧化磷酸化缺陷通过下调GLUT1/4表达,激活AMPK和抑制mTOR磷酸化水平导致棕色脂肪细胞分化停滞 | 第43-47页 |
3 讨论 | 第47-51页 |
小结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
综述 | 第58-72页 |
参考文献 | 第66-72页 |
攻读学位期间已发表和待发表论文 | 第72-73页 |
附录 英文缩略词表 | 第73-77页 |
致谢 | 第77-78页 |