| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-21页 |
| 1. 生殖毒性评价替代法的研究进展 | 第15-17页 |
| 2. 颗粒细胞在生殖中的作用 | 第17-18页 |
| 3. T-2毒素危害作用的研究进展 | 第18-20页 |
| 3. 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 大鼠卵巢颗粒细胞体外生殖毒性评价替代模型的建立与验证 | 第21-47页 |
| 1. 材料与方法 | 第21-27页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·实验耗材 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-27页 |
| ·大鼠卵巢颗粒细胞原代培养 | 第22-23页 |
| ·大鼠卵巢颗粒细胞的鉴定 | 第23-24页 |
| ·卵巢颗粒细胞体外生殖毒性评价替代模型的初步验证 | 第24-25页 |
| ·相关化合物细胞毒性机制的初步探讨 | 第25-27页 |
| ·数据处理 | 第27页 |
| 2. 结果 | 第27-42页 |
| ·大鼠卵巢颗粒细胞的原代培养 | 第27-28页 |
| ·大鼠卵巢颗粒细胞的鉴定 | 第28-30页 |
| ·HE染色 | 第28页 |
| ·FSHR免疫细胞化学法 | 第28-29页 |
| ·颗粒细胞体外生长曲线 | 第29-30页 |
| ·颗粒细胞的激素分泌 | 第30页 |
| ·卵巢颗粒细胞体外生殖毒性评价替代模型的初步验证 | 第30-37页 |
| ·环磷酰胺的细胞毒性 | 第30-32页 |
| ·白消安的细胞毒性 | 第32-33页 |
| ·氯丙嗪的细胞毒性 | 第33-35页 |
| ·T-2毒素的细胞毒性 | 第35-37页 |
| ·氯丙嗪对颗粒细胞毒性机制的初步探讨 | 第37-40页 |
| ·氯丙嗪对颗粒细胞DNA-ladder的影响 | 第37-38页 |
| ·氯丙嗪对凋亡相关基因mRNA的影响 | 第38页 |
| ·氯丙嗪对激素分泌相关基因mRNA的影响 | 第38-39页 |
| ·氯丙嗪对颗粒细胞FSHR表达的影响 | 第39-40页 |
| ·T-2毒素对颗粒细胞毒性机制的初步探讨 | 第40-42页 |
| ·T-2毒素对颗粒细胞DNA-ladder的影响 | 第40页 |
| ·T-2毒素对凋亡相关基因mRNA的影响 | 第40-41页 |
| ·T-2毒素对激素分泌相关基因mRNA的影响 | 第41-42页 |
| ·T-2毒素对颗粒细胞FSHR表达的影响 | 第42页 |
| 3. 讨论 | 第42-47页 |
| ·卵巢颗粒细胞毒性评价参数的探讨 | 第42-43页 |
| ·细胞相对活力 | 第43页 |
| ·细胞调往率 | 第43页 |
| ·激素(E_2、P)分泌水平 | 第43页 |
| ·卵巢颗粒细胞体外生殖毒性评价替代模型的初步验证 | 第43-45页 |
| ·氯丙嗪和T-2毒素对颗粒细胞损伤作用相关机制的初步研究 | 第45-47页 |
| ·氯丙嗪和T-2毒素对细胞凋亡的影响 | 第45-46页 |
| ·氯丙嗪和T-2毒素对激素分泌的影响 | 第46-47页 |
| 第三章 T-2毒素对大鼠卵巢颗粒细胞损伤作用的机制研究 | 第47-81页 |
| 1. 材料与方法 | 第47-56页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·主要抗体 | 第47-48页 |
| ·主要耗材 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-56页 |
| ·大鼠卵巢颗粒细胞原代培养 | 第48页 |
| ·染毒及分组 | 第48页 |
| ·颗粒细胞MDA含量的测定 | 第48页 |
| ·颗粒细胞SOD活性的测定 | 第48-49页 |
| ·颗粒细胞CAT活性的检测 | 第49-50页 |
| ·颗粒细胞GSH-Px活性的检测 | 第50页 |
| ·颗粒细胞ROS生成的测定 | 第50-51页 |
| ·颗粒细胞线粒体膜电位的检测 | 第51页 |
| ·caspase-3,9的活性检测 | 第51-52页 |
| ·蛋白质印迹 | 第52-55页 |
| ·细胞中cAMP的提取与测定 | 第55页 |
| ·孕酮的检测 | 第55页 |
| ·数据处理 | 第55-56页 |
| 2. 结果与分析 | 第56-73页 |
| ·T-2毒素对颗粒细胞MDA含量的影响 | 第56页 |
| ·T-2毒素对颗粒细胞总SOD活性的影响 | 第56-57页 |
| ·T-2毒素对颗粒细胞CAT活性的影响 | 第57页 |
| ·T-2毒素对颗粒细胞GSH-Px活性的影响 | 第57-58页 |
| ·T-2毒素对颗粒细胞ROS生成的影响 | 第58-59页 |
| ·T-2毒素对颗粒细胞线粒体膜电位的影响 | 第59-60页 |
| ·T-2毒素对颗粒细胞Caspase-9的影响 | 第60-61页 |
| ·T-2毒素对颗粒细胞Caspase-3的影响 | 第61-62页 |
| ·T-2毒素对Bax、Bcl-2和P53蛋白表达水平的影响 | 第62-63页 |
| ·Caspase-9抑制剂对T-2毒素诱导颗粒细胞凋亡的影响 | 第63页 |
| ·自由基清除剂Trolox对T-2毒素诱导颗粒细胞凋亡的影响 | 第63-65页 |
| ·T-2毒素对颗粒细胞cAMP的影响 | 第65页 |
| ·T-2毒素对FSH诱导的孕酮和cAMP合成影响 | 第65-66页 |
| ·T-2毒素对Forsklin诱导的孕酮和cAMP合成影响 | 第66-67页 |
| ·T-2毒素对Forsklin诱导的孕酮和cAMP合成影响 | 第67页 |
| ·T-2毒素对8-Br-cAMP诱导的孕酮合成影响 | 第67-68页 |
| ·T-2毒素对EGF诱导的孕酮合成影响 | 第68-69页 |
| ·T-2毒素对Anisomysin诱导的孕酮合成影响 | 第69页 |
| ·T-2毒素对22R-HC诱导的孕酮合成影响 | 第69-70页 |
| ·T-2毒素对孕烯醇酮诱导的孕酮合成影响 | 第70-71页 |
| ·T-2毒素对AC、StAR、3β-HSD、P450scc和P450arom蛋白表达的影响 | 第71-73页 |
| 3. 讨论与分析 | 第73-81页 |
| ·T-2毒素通过ROS介导的线粒体通路诱导大鼠卵巢颗粒细胞凋亡 | 第73-76页 |
| ·FSH-cAMP-PKA信号通路在T-2毒素影响卵巢颗粒细胞甾体激素合成中的作用 | 第76-81页 |
| 第四章 总结 | 第81-83页 |
| 1. 研究的主要结论 | 第81页 |
| 2. 研究的特色与创新点 | 第81-82页 |
| 3. 后续研究计划 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 缩略词表 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 作者简历 | 第94页 |
