| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第11-31页 |
| 1.1 苏云金芽胞杆菌的研究概况 | 第11-12页 |
| 1.2 Cry毒素的分类 | 第12页 |
| 1.3 Cry毒素的空间结构与功能 | 第12-17页 |
| 1.3.1 Cry毒素的空间结构 | 第12-14页 |
| 1.3.2 Cry毒素的Domain Ⅰ | 第14-15页 |
| 1.3.3 Cry毒素的DomainⅡ | 第15-16页 |
| 1.3.4 Cry毒素的DomainⅢ | 第16-17页 |
| 1.4 Cry毒素的杀虫机理模型 | 第17-24页 |
| 1.4.1 Bravo模型 | 第17-18页 |
| 1.4.2 Zhang模型 | 第18页 |
| 1.4.3 Jurat-Fuentes模型 | 第18-19页 |
| 1.4.4 杀蚊模型 | 第19-21页 |
| 1.4.5 杀线虫模型 | 第21-22页 |
| 1.4.6 基于过激免疫的Cry杀虫机理模型 | 第22-24页 |
| 1.5 Cry毒素的结合蛋白 | 第24-27页 |
| 1.5.1 Cry毒素的受体结合蛋白 | 第24-26页 |
| 1.5.2 Cry毒素的其他结合蛋白 | 第26-27页 |
| 1.6 昆虫血淋巴(Hemolymph) | 第27-28页 |
| 1.7 课题研究内容和目的意义 | 第28-31页 |
| 1.7.1 课题研究内容 | 第28页 |
| 1.7.2 课题研究的目的和意义 | 第28-31页 |
| 第2章 材料与方法 | 第31-49页 |
| 2.1 Cry7Ab4毒素活性区的纯化 | 第31-33页 |
| 2.1.1 主要质粒 | 第31页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 2.1.4 主要溶液的配制 | 第32页 |
| 2.1.5 pET-7Ab4的诱导表达 | 第32-33页 |
| 2.1.6 Cry7Ab4的纯化 | 第33页 |
| 2.2 Cry2Ab12毒素活性区的载体构建及表达纯化 | 第33-35页 |
| 2.2.1 质粒 | 第33-34页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第34页 |
| 2.2.3 主要仪器及溶液配制 | 第34-35页 |
| 2.2.4 Cry2Ab12的诱导表达 | 第35页 |
| 2.2.5 Cry2Ab12的蛋白定位及纯化 | 第35页 |
| 2.3 甜菜夜蛾血淋巴中Cry毒素非受体结合蛋白的分离与鉴定 | 第35-41页 |
| 2.3.1 供试昆虫 | 第35-36页 |
| 2.3.2 主要试剂及溶液配制 | 第36页 |
| 2.3.3 主要仪器和器材 | 第36-37页 |
| 2.3.4 甜菜夜蛾血淋巴的提取 | 第37页 |
| 2.3.5 甜菜夜蛾血淋巴Cry毒素结合蛋白的Pull-downessay | 第37-39页 |
| 2.3.6 SDS-PAGE电泳分析Pull-downessay | 第39页 |
| 2.3.7 SDS-PAGE凝胶的银染 | 第39-40页 |
| 2.3.8 蛋白条带的LS-MS/MS鉴定 | 第40页 |
| 2.3.9 Cry毒素与其结合蛋白的分子对接、蛋白质序列比对和空间结构比对 | 第40-41页 |
| 2.4 小菜蛾中肠液Cry毒素结合蛋白的分离与鉴定 | 第41-42页 |
| 2.4.1 供试昆虫 | 第41页 |
| 2.4.2 主要试剂、仪器和器材 | 第41页 |
| 2.4.3 小菜蛾中肠液的提取 | 第41页 |
| 2.4.4 小菜蛾中肠液Cry毒素结合蛋白的Pull-downEssay | 第41页 |
| 2.4.5 SDS-PAGE电泳分析Pull-downessay | 第41页 |
| 2.4.6 SDS-PAGE凝胶的银染 | 第41页 |
| 2.4.7 蛋白条带的LS-MS/MS鉴定 | 第41-42页 |
| 2.4.8 Cry毒素与其结合蛋白的分子对接、蛋白质序列比对及空间结构比对 | 第42页 |
| 2.5 Cry毒素与其非受体结合蛋白之间的互作研究 | 第42-49页 |
| 2.5.1 主要试剂和仪器 | 第42-43页 |
| 2.5.2 Cry1Ab1与Dorsal之间的定性互作研究 | 第43页 |
| 2.5.3 Cry1Ab1与Dorsal之间的定量互作研究 | 第43-44页 |
| 2.5.4 Cry1Ab1与POXC之间的定性互作研究 | 第44页 |
| 2.5.5 Storageprotein的克隆、表达和蛋白纯化 | 第44-49页 |
| 第3章 害虫体内Cry非受体结合蛋白的分离与鉴定 | 第49-74页 |
| 3.1 甜菜夜蛾血淋巴中Cry1Ab1结合蛋白的分离与鉴定 | 第49-52页 |
| 3.1.1 甜菜夜蛾血淋巴中Cry1Ab1结合蛋白的分离 | 第49-50页 |
| 3.1.2 甜菜夜蛾血淋巴中Cry1Ab1结合蛋白的鉴定 | 第50-52页 |
| 3.2 甜菜夜蛾血淋巴中Cry7Ab4结合蛋白的分离与鉴定 | 第52-55页 |
| 3.2.1 Cry7Ab4毒素活性区的纯化 | 第52页 |
| 3.2.2 甜菜夜蛾血淋巴中Cry7Ab4结合蛋白的分离 | 第52-53页 |
| 3.2.3 甜菜夜蛾血淋巴中Cry7Ab4结合蛋白的鉴定 | 第53-55页 |
| 3.3 小菜蛾中肠液中Cry7Ab4结合蛋白的分离与鉴定 | 第55-57页 |
| 3.3.1 小菜蛾中肠液中Cry7Ab4结合蛋白的分离 | 第55-56页 |
| 3.3.2 小菜蛾中肠液中Cry7Ab4结合蛋白的鉴定 | 第56-57页 |
| 3.4 小菜蛾中肠液中Cry2Ab12结合蛋白的分离与鉴定 | 第57-61页 |
| 3.4.1 Cry2Ab12毒素的表达情况和蛋白纯化 | 第57-59页 |
| 3.4.2 小菜蛾中肠液中Cry2Ab12结合蛋白的分离 | 第59-60页 |
| 3.4.3 小菜蛾中肠液中Cry2Ab12结合蛋白的鉴定 | 第60-61页 |
| 3.5 血淋巴结合蛋白与Cry杀甜菜夜蛾活性相关性的探讨 | 第61-68页 |
| 3.5.1 血淋巴储存蛋白与Cry杀甜菜夜蛾的相关性 | 第61-65页 |
| 3.5.2 血淋巴β-1,3-葡聚糖酶与Cry杀甜菜夜蛾的相关性 | 第65-66页 |
| 3.5.3 血淋巴脱脂载脂蛋白与Cry杀甜菜夜蛾的相关性 | 第66-68页 |
| 3.5.4 血淋巴微管蛋白与Cry杀甜菜夜蛾的相关性 | 第68页 |
| 3.5.5 血淋巴延伸因子1-α与Cry杀甜菜夜蛾的相关性 | 第68页 |
| 3.6 中肠液结合蛋白与Cry杀小菜蛾活性相关性的探讨 | 第68-74页 |
| 3.6.1 中肠液储存蛋白与Cry杀小菜蛾的相关性 | 第68-69页 |
| 3.6.2 中肠液脱脂载脂蛋白与Cry杀小菜蛾的相关性 | 第69页 |
| 3.6.3 中肠液脂肪酶1与Cry杀小菜蛾的相关性 | 第69-71页 |
| 3.6.4 中肠液热休克蛋白70与Cry杀小菜蛾的相关性 | 第71-74页 |
| 第4章 甜菜夜蛾体内Cry非受体结合蛋白的克隆表达及其与Cry毒素的互作研究 | 第74-89页 |
| 4.1 Cry1Ab1及其非受体结合蛋白POXC之间的互作研究 | 第74-78页 |
| 4.1.1 Cry1Ab1与POXC之间的定性互作研究 | 第74-75页 |
| 4.1.2 Cry1Ab1与POXC之间互作界面及关键短肽的解析 | 第75-78页 |
| 4.2 Cry1Ab1及其非受体结合蛋白Storageprotein之间的互作研究 | 第78-89页 |
| 4.2.1 Storageprotein的克隆表达与纯化 | 第78-82页 |
| 4.2.2 Cry1Ab1与Storageprotein之间互作界面及关键短肽的解析 | 第82-89页 |
| 第5章 Cry毒素与其在小菜蛾中肠液中的非受体结合蛋白Dorsal的互作研究 | 第89-101页 |
| 5.1 Cry1Ab1与Dorsal之间的定性互作研究 | 第89-91页 |
| 5.2 Cry1Ab1与Dorsal之间的定量互作研究 | 第91-93页 |
| 5.3 Cry1Ab1与Dorsal之间互作界面及关键短肽的解析 | 第93-101页 |
| 第6章 总结与讨论 | 第101-106页 |
| 6.1 血淋巴结合蛋白介导的Cry杀甜菜夜蛾作用假说 | 第101-102页 |
| 6.2 中肠液结合蛋白Dorsal介导的Cry1Ab1杀小菜蛾假说 | 第102-106页 |
| 参考文献 | 第106-119页 |
| 致谢 | 第119-121页 |
| 附录 | 第121页 |
