摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
1.1 小鼠卵母细胞的孤雌激活及其干细胞系的建立研究进展 | 第11-12页 |
1.1.1 小鼠卵母细胞的孤雌激活 | 第11页 |
1.1.2 小鼠孤雌胚胎干细胞的研究背景 | 第11-12页 |
1.2 小鼠多能性干细胞研究进展 | 第12-19页 |
1.2.1 小鼠胚胎干细胞研究背景 | 第12-13页 |
1.2.2 小鼠胚胎干细胞研究进展 | 第13-16页 |
1.2.3 维持小鼠胚胎干细胞多能性的关键因子 | 第16-17页 |
1.2.4 小鼠上胚层干细胞研究背景 | 第17-19页 |
第二章 小鼠孤雌胚胎的制作 | 第19-25页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 实验动物 | 第19页 |
2.1.2 实验器材 | 第19页 |
2.1.3 实验试剂 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-22页 |
2.2.1 培养液的配制 | 第20-22页 |
2.2.2 小鼠卵母细胞孤雌激活 | 第22页 |
2.3 实验结果 | 第22-24页 |
2.3.1 形态学鉴定 | 第22-23页 |
2.3.2 孤雌激活实验结果 | 第23-24页 |
2.4 讨论 | 第24-25页 |
第三章 小鼠孤雌胚胎干细胞系的建立 | 第25-51页 |
3.1 实验材料 | 第25-27页 |
3.1.1 实验器材 | 第25页 |
3.1.2 实验试剂 | 第25-27页 |
3.2 实验方法 | 第27-41页 |
3.2.1 培养液的配制 | 第27-29页 |
3.2.2 小鼠孤雌胚胎二倍体干细胞系的建立 | 第29-31页 |
3.2.3 小鼠孤雌胚胎二倍体干细胞的冻存与复苏 | 第31-32页 |
3.2.4 碱性磷酸酶染色 | 第32页 |
3.2.5 免疫荧光染色 | 第32-33页 |
3.2.6 核型分析 | 第33-34页 |
3.2.7 小鼠孤雌胚胎干细胞的实时荧光定量PCR检测 | 第34-39页 |
3.2.8 畸胎瘤的制备 | 第39页 |
3.2.9 嵌合体的制备 | 第39-40页 |
3.2.10 生长曲线 | 第40-41页 |
3.3 实验结果 | 第41-49页 |
3.3.1 Pa-AFSCs的建系率统计学结果 | 第41页 |
3.3.2 早期细胞系碱性磷酸酶染色鉴定 | 第41-42页 |
3.3.3 形态学鉴定以及碱性磷酸酶染色鉴定 | 第42-43页 |
3.3.4 核型分析结果 | 第43-44页 |
3.3.5 免疫荧光染色结果分析 | 第44-46页 |
3.3.6 RT-qPCR结果分析 | 第46-47页 |
3.3.7 畸胎瘤结果分析 | 第47-48页 |
3.3.8 嵌合体结果分析 | 第48-49页 |
3.3.9 生长曲线结果分析 | 第49页 |
3.4 讨论 | 第49-51页 |
第四章 更具多能性的孤雌胚胎干细胞系的诱导 | 第51-62页 |
4.1 实验材料 | 第51-52页 |
4.1.1 实验器材 | 第51页 |
4.1.2 实验试剂 | 第51-52页 |
4.2 实验方法 | 第52-54页 |
4.2.1 培养液的配制 | 第52页 |
4.2.2 更具多能性的胚胎干细胞系的诱导 | 第52-53页 |
4.2.3 碱性磷酸酶染色 | 第53页 |
4.2.4 免疫荧光染色 | 第53页 |
4.2.5 实时荧光定量PCR检测 | 第53-54页 |
4.2.6 嵌合体的制备 | 第54页 |
4.3 实验结果 | 第54-61页 |
4.3.1 形态学鉴定 | 第54-55页 |
4.3.2 碱性磷酸酶染色鉴定 | 第55-56页 |
4.3.3 免疫荧光染色结果分析 | 第56-58页 |
4.3.4 RT-qPCR结果分析 | 第58-59页 |
4.3.5 嵌合体结果分析 | 第59-61页 |
4.4 讨论 | 第61-62页 |
全文结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
致谢 | 第68页 |