| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 第1章 前言 | 第13-31页 |
| 1.1 昆虫蜕皮激素概述 | 第13-15页 |
| 1.2 昆虫核受体概述 | 第15-16页 |
| 1.3 蜕皮激素受体概述 | 第16-19页 |
| 1.3.1 EcR的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3.2 USP的研究进展 | 第18页 |
| 1.3.3 蜕皮激素膜受体的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4 蜕皮激素信号通路 | 第19-20页 |
| 1.5 ERR的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.6 RNAi的研究概况 | 第21-25页 |
| 1.6.1 RNAi的分子机理 | 第22页 |
| 1.6.2 dsRNA的吸收机制 | 第22-23页 |
| 1.6.3 dsRNA的导入方法 | 第23-24页 |
| 1.6.4 RNAi在昆虫中的应用现状 | 第24-25页 |
| 1.7 拟黑多刺蚁概述 | 第25-28页 |
| 1.7.1 拟黑多刺蚁简介 | 第25页 |
| 1.7.2 拟黑多刺蚁内脏结构 | 第25-28页 |
| 1.8 本实验的目的和意义 | 第28-29页 |
| 1.9 本实验的研究内容与技术路线 | 第29-31页 |
| 1.9.1 本实验研究内容 | 第29-30页 |
| 1.9.2 本实验采取的技术路线 | 第30-31页 |
| 第2章 Westem blot检测EcR在蛋白质水平的表达 | 第31-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-34页 |
| 2.1.1 供试动物 | 第31-32页 |
| 2.1.2 主要的仪器设备 | 第32页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第32页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第32-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.2.1 总蛋白的提取 | 第34页 |
| 2.2.2 蛋白浓度的测定 | 第34-35页 |
| 2.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第35-37页 |
| 2.2.4 转移电泳 | 第37页 |
| 2.2.5 免疫反应 | 第37-38页 |
| 2.2.6 显色反应 | 第38页 |
| 2.2.7 数据处理 | 第38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-40页 |
| 2.3.1 不同发育期虫体总蛋白的定量 | 第38-39页 |
| 2.3.2 EcR蛋白在不同发育阶段拟黑多刺蚁体内的定量结果 | 第39-40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-43页 |
| 第3章 免疫组织化学法检测EcR蛋白的组织分布 | 第43-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 3.1.1 供试动物 | 第43页 |
| 3.1.2 主要的仪器设备 | 第43-44页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第44页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-46页 |
| 3.2.1 取材和固定 | 第44-45页 |
| 3.2.2 组织脱水 | 第45页 |
| 3.2.3 OCT胶包埋 | 第45页 |
| 3.2.4 冰冻切片 | 第45页 |
| 3.2.5 免疫反应 | 第45-46页 |
| 3.2.6 数据处理 | 第46页 |
| 3.3 结果与分析 | 第46-51页 |
| 3.3.1 EcR蛋白在拟黑多刺蚁脑部的定位结果与分析 | 第46-50页 |
| 3.3.2 EcR蛋白在拟黑多刺蚁胸神经节的定位结果与分析 | 第50页 |
| 3.3.3 EcR蛋白在拟黑多刺蚁性腺中的定位结果与分析 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-55页 |
| 第4章 RNAi探究拟黑多刺蚁中EcR和USP与ERR的功能相关性 | 第55-79页 |
| 4.1 实验材料 | 第55-57页 |
| 4.1.1 供试动物 | 第55页 |
| 4.1.2 主要的仪器设备 | 第55-56页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第56页 |
| 4.1.4 溶液配制 | 第56-57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-61页 |
| 4.2.1 总RNA的提取 | 第57页 |
| 4.2.2 RNA质量的检测 | 第57-58页 |
| 4.2.3 第一链cDNA的合成 | 第58页 |
| 4.2.4 RT-PCR扩增目的片段 | 第58-59页 |
| 4.2.5 PCR产物检测、纯化与测序 | 第59页 |
| 4.2.6 dsRNA的体外合成 | 第59-60页 |
| 4.2.7 dsRNA最适浓度的确定与虫体导入 | 第60-61页 |
| 4.2.8 dsRNA的稳定性检测 | 第61页 |
| 4.2.9 RNAi后基因表达的检测 | 第61页 |
| 4.2.10 数据处理 | 第61页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第61-75页 |
| 4.3.1 总RNA提取结果 | 第61-62页 |
| 4.3.2 含T7启动子序列的DNA片段检测结果 | 第62-63页 |
| 4.3.3 dsRNA的稳定性检测结果 | 第63页 |
| 4.3.4 RNA干扰效率的检测 | 第63-69页 |
| 4.3.5 EcR-RNAi后,EcR蛋白与ERR蛋白表达水平的变化 | 第69-73页 |
| 4.3.6 USP-RNAi后,ERR蛋白表达水平的变化 | 第73-75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-79页 |
| 总结 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-97页 |
| 附录 | 第97-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第113页 |
