摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略语表 | 第11-16页 |
前言 | 第16-21页 |
第一章 :生长分化因子 15 在口腔鳞状细胞癌癌变模型及口腔鳞状细胞癌细胞系中的表达 | 第21-35页 |
1.1 材料与方法 | 第21-31页 |
1.1.1 口腔粘膜癌变模型细胞系及口腔鳞状细胞癌细胞系的培养 | 第21-25页 |
1.1.2 细胞总 RNA 的抽提、逆转录及 GDF15mRNA 相对表达量的检测 | 第25-27页 |
1.1.3 细胞总蛋白的抽提、GDF15 蛋白相对表达量的半定量检测 | 第27-31页 |
1.2 结果 | 第31-34页 |
1.2.1 GDF15mRNA 在口腔鳞状上皮癌变细胞系及口腔鳞癌细胞系中的表达 | 第31-32页 |
1.2.2 GDF15 蛋白在口腔鳞状上皮癌变细胞系及口腔鳞癌细胞系中的表达 | 第32-34页 |
1.3 讨论 | 第34-35页 |
第二章 :生长分化因子 15 在口腔鳞状细胞癌患者血清标本及口腔鳞状细胞癌患者组织标本中的表达及意义 | 第35-66页 |
2.1 材料与方法 | 第35-47页 |
2.1.1 试剂、耗材及主要仪器 | 第35-36页 |
2.1.2 血清标本来源、标本的收集与处理 | 第36页 |
2.1.3 血清ELISA | 第36-37页 |
2.1.4 组织标本来源、取材、切片制备 | 第37-46页 |
2.1.5 免疫组织化学 | 第46-47页 |
2.2 结果 | 第47-61页 |
2.2.1 GDF15 蛋白在健康人、口腔白斑患者、口腔鳞状细胞癌患者血清标本中的表达及意义 | 第47-54页 |
2.2.2 GDF15 蛋白在口腔鳞癌患者组织标本中的表达及意义 | 第54-61页 |
2.3 讨论 | 第61-66页 |
第三章 :GDF15 在促进口腔鳞癌细胞进展中的作用 | 第66-127页 |
3.1 材料与方法 | 第66-76页 |
3.1.1 试剂、耗材及主要仪器 | 第66-68页 |
3.1.2 细胞及细胞培养 | 第68页 |
3.1.3 实时定量 PCR 及免疫印迹 | 第68页 |
3.1.4 慢病毒载体构建及 RNA 干扰技术 | 第68-70页 |
3.1.5 慢病毒载体构建及 GDF15 过表达 | 第70页 |
3.1.6 CCK-8 法测量细胞生长曲线 | 第70-71页 |
3.1.7 流式细胞术检测细胞生长周期 | 第71-72页 |
3.1.8 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第72-73页 |
3.1.9 划痕实验 | 第73-74页 |
3.1.10 重组基底膜侵袭实验 | 第74-75页 |
3.1.11 平板克隆形成实验 | 第75-76页 |
3.1.12 NOD/SCID 小鼠皮下荷瘤实验 | 第76页 |
3.2 结果 | 第76-125页 |
3.2.1 RNAi 干扰 HB96、HN30 细胞系中 GDF15 表达效果 | 第77-81页 |
3.2.2 GDF15 过表达效果 | 第81-84页 |
3.2.3 GDF15 对细胞生长曲线的影响 | 第84-88页 |
3.2.4 GDF15 对细胞周期的影响 | 第88-94页 |
3.2.5 GDF15 对细胞凋亡的影响 | 第94-98页 |
3.2.6 GDF15 对细胞侵袭能力的影响 | 第98-104页 |
3.2.7 GDF15 对细胞迁移能力的影响 | 第104-116页 |
3.2.8 GDF15 对细胞克隆形成能力的影响 | 第116-121页 |
3.2.9 GDF15 对 HN30 细胞成瘤能力的影响 | 第121-123页 |
3.2.10 GDF15 对相关基因表达的影响 | 第123-125页 |
3.3 讨论 | 第125-127页 |
全文总结 | 第127-128页 |
参考文献 | 第128-139页 |
致谢 | 第139-141页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第141-142页 |