摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
前言 | 第14-27页 |
1. 琼胶与琼胶寡糖 | 第14-16页 |
1.1 琼胶 | 第14-15页 |
1.2 琼胶寡糖 | 第15-16页 |
2. 果寡糖 | 第16-18页 |
3 益生元与肠道菌群 | 第18-19页 |
4 益生菌的作用 | 第19-20页 |
5 抗生素与肠道微生物 | 第20页 |
6 肠道菌群与疾病 | 第20-23页 |
7 益生元的作用机制 | 第23-26页 |
7.1 益生元对肥胖的作用机制 | 第23-26页 |
7.2 益生元对‖型糖尿病的作用机制 | 第26页 |
8 研究目的与意义 | 第26-27页 |
第一章 新琼寡糖的制备 | 第27-40页 |
1. 实验材料 | 第27-28页 |
1.1 试剂 | 第27页 |
1.2 仪器 | 第27-28页 |
1.3 菌株 | 第28页 |
1.4 培养基 | 第28页 |
2 实验步骤与方法 | 第28-33页 |
2.1 菌株 AgaB 的复苏及形态观察 | 第28-29页 |
2.2 菌株 AgaB 的发酵 | 第29-30页 |
2.3 发酵上清超滤浓缩及透析除盐 | 第30-31页 |
2.3.1 发酵上清超滤浓缩 | 第30-31页 |
2.3.2 发酵上清透析除盐 | 第31页 |
2.4 制备新琼寡糖 | 第31-32页 |
2.5 降解产物超滤除蛋白及蛋白检测 | 第32页 |
2.5.1 降解产物超滤除蛋白 | 第32页 |
2.5.2 蛋白含量检测-BCA 法 | 第32页 |
2.6 降解产物悬蒸浓缩及保存 | 第32-33页 |
2.6.1 降解产物悬蒸浓缩 | 第32-33页 |
2.6.2 降解产物的保存 | 第33页 |
2.7 新琼寡糖成分鉴定-凝胶过滤法 | 第33页 |
2.8 新琼寡糖含量的测定-硫酸苯酚法 | 第33页 |
3 实验结果 | 第33-39页 |
3.1 菌株 AgaB 的形态观察 | 第33-34页 |
3.2 DNS 法测定 D-半乳糖标准曲线 | 第34-35页 |
3.3 DNS 法测定发酵上清酶活力 | 第35页 |
3.4 TLC 降解产物分析 | 第35-36页 |
3.5 BCA 法测蛋白含量标准曲线 | 第36-37页 |
3.6 凝胶过滤分析溶液中各组分 | 第37-38页 |
3.7 硫酸苯酚法测定糖含量 | 第38-39页 |
4 小结与讨论 | 第39-40页 |
第二章 新琼寡糖益生元效应的体内实验 | 第40-53页 |
1 实验材料 | 第40-41页 |
1.1 实验试剂 | 第40-41页 |
1.2 实验动物 | 第41页 |
1.3 实验仪器 | 第41页 |
1.4 高脂饲料 | 第41页 |
2 实验方法 | 第41-45页 |
2.1 小鼠饮水量测定 | 第41页 |
2.2 实验分组及给药量 | 第41-42页 |
2.2.1 实验给药量 | 第41页 |
2.2.2 实验分组 | 第41-42页 |
2.3 实验中指标的测定 | 第42-44页 |
2.3.1 体重的检测 | 第42页 |
2.3.2 粪便菌群的检测 | 第42-44页 |
2.4 统计学分析 | 第44-45页 |
3 实验结果 | 第45-52页 |
3.1 小鼠体重变化 | 第45页 |
3.2 小鼠粪便观察 | 第45页 |
3.3 小鼠粪便基因组提取 | 第45-48页 |
3.4 荧光定量检测小鼠粪便菌群 | 第48-52页 |
4 小结与讨论 | 第52-53页 |
第三章 新琼寡糖对小鼠生理、生化指标的影响 | 第53-71页 |
1 实验材料 | 第53-54页 |
1.1 实验仪器 | 第53页 |
1.2 实验试剂 | 第53-54页 |
2 实验方法 | 第54-59页 |
2.1 小鼠空腹血糖及葡萄糖耐受检测 | 第54页 |
2.1.1 小鼠空腹血糖的测定 | 第54页 |
2.1.2 小鼠葡萄糖耐受实验 | 第54页 |
2.2 小鼠各器官的检测 | 第54-55页 |
2.3 血清食欲相关激素的检测 | 第55-56页 |
2.3.1 血清胰高血糖素样肽 1(GLP-1)含量测定 | 第55-56页 |
2.3.2 血清多肽 YY(PYY)含量测定 | 第56页 |
2.4 下丘脑中食欲相关基因的检测 | 第56-59页 |
2.4.1 下丘脑 RNA 的提取及检测 | 第56-57页 |
2.4.2 RNA 的反转录 | 第57-58页 |
2.4.3 荧光定量检测下丘脑中食欲相关基因 | 第58-59页 |
2.5 脂肪中脂联素的检测 | 第59页 |
2.5.1 脂肪组织 RNA 的提取及检测 | 第59页 |
2.5.2 脂肪组织 RNA 的反转录 | 第59页 |
2.5.3 荧光定量检测脂肪组织中的脂联素 | 第59页 |
3 实验结果 | 第59-70页 |
3.1 小鼠空腹血糖及葡萄糖耐受检测 | 第59-60页 |
3.2 小鼠各器官检测结果 | 第60-62页 |
3.3 血清指标检测结果 | 第62-64页 |
3.3.1 血清 GLP-1 检测 | 第62-63页 |
3.3.2 血清 PYY 检测 | 第63-64页 |
3.4 小鼠下丘脑及 RNA 提取 | 第64-65页 |
3.5 小鼠下丘脑食欲相关基因的检测结果 | 第65-68页 |
3.6 小鼠脂肪 RNA 的提取 | 第68-69页 |
3.7 小鼠脂肪中脂联素的定量检测 | 第69-70页 |
4 小结与讨论 | 第70-71页 |
总结与展望 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-83页 |
附录 | 第83-88页 |
附录 1 常用试剂、溶液的配制方法 | 第83-84页 |
附录 2 常用分子生物学实验方法 | 第84-87页 |
附录 3 缩略词汇总 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第89-90页 |