| 中文摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 英文缩略词表(Abbreviations) | 第20-22页 |
| 第一部分 miR-205在宫颈癌组织中的表达及与宫颈癌临床病理因素关系的分析 | 第22-50页 |
| 研究背景 | 第22-23页 |
| 第一节 Smad4相互作用miRNAs的预测与筛选 | 第23-34页 |
| 一 材料与方法 | 第23-31页 |
| 1 相关数据库 | 第23-24页 |
| 2 主要仪器与试剂 | 第24-27页 |
| 3 实验方法 | 第27-31页 |
| 二 结果 | 第31-34页 |
| 1 与Smad4相关的miRNAs的生物信息学预测 | 第31页 |
| 2 miR-205与Smad4的3'非翻译区的结合预测 | 第31-32页 |
| 3 miR-205在6种宫颈癌细胞株中的表达筛选 | 第32-33页 |
| 4 Smad4在6种宫颈癌癌细胞株中的表达 | 第33-34页 |
| 第二节 荧光素酶报告系统检测Smad4与miR-205的相互作用 | 第34-38页 |
| 一 材料与方法 | 第34-36页 |
| 1 细胞株来源 | 第34页 |
| 2 试剂和材料 | 第34页 |
| 3 器械和耗材 | 第34-35页 |
| 4 主要仪器设备 | 第35页 |
| 5 其他主要药品及试剂 | 第35-36页 |
| 6 实验相关数据库使用 | 第36页 |
| 7 定量PCR方法及步骤(QT-PCR) | 第36页 |
| 8 microRNA质粒转染(Iipo2000) | 第36页 |
| 9 荧光素酶报告实验(Lucifers Lucifersae检测) | 第36页 |
| 10 数据处理及统计分析 | 第36页 |
| 二 结果 | 第36-38页 |
| 1 Smad4基因的3'非编码区载体的构建 | 第36-37页 |
| 2 Smad4基因的3'非编码区突变载体的构建 | 第37页 |
| 3 荧光素酶报告系统检测miR-205与Smad43'非编码区的结合情况 | 第37-38页 |
| 第三节 miR-205在宫颈癌组织中的表达及意义 | 第38-46页 |
| 一 组织材料与方法 | 第38-41页 |
| 1 宫颈组织收集 | 第38-39页 |
| 2 宫颈标本处理 | 第39页 |
| 3 主要试剂及仪器设备 | 第39页 |
| 4 实验步骤和方法 | 第39-41页 |
| 二 结果 | 第41-43页 |
| 1 miR-205在宫颈癌组织中表达上调 | 第41页 |
| 2 miR-205的表达水平与宫颈鳞癌的预后相关因素密切相关 | 第41-43页 |
| 3 miR-205和Smad4蛋白在宫颈癌组织中的表达相关分析 | 第43页 |
| 三 讨论 | 第43-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 第二部分 miR-205对宫颈癌生物学行为的影响研究 | 第50-64页 |
| 一 材料与方法 | 第50-55页 |
| 1 实验材料 | 第50-51页 |
| 2 主要液体配制 | 第51页 |
| 3 器械和耗材 | 第51页 |
| 4 主要仪器设备 | 第51-52页 |
| 5 其他主要药品及试剂 | 第52-53页 |
| 6 实验方法 | 第53-55页 |
| 6.1 细胞培养 | 第53页 |
| 6.2 荧光定量PCR | 第53页 |
| 6.3 免疫组化染色方法 | 第53页 |
| 6.4 细胞转染 | 第53-54页 |
| 6.5 细胞増殖实验 | 第54页 |
| 6.6 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第54页 |
| 6.7 细胞侵袭实验 | 第54-55页 |
| 7 数据处理及统计分析 | 第55页 |
| 二 结果 | 第55-58页 |
| 1 miR-205低表达宫颈癌细胞模型的建立 | 第55页 |
| 2 下调miR-205表达抑制宫颈癌细胞增殖 | 第55-56页 |
| 3 下调miR-205的表达可促进宫颈癌细胞凋亡 | 第56-57页 |
| 4 下调miR-205的表达降低宫颈癌细胞的侵袭力 | 第57-58页 |
| 三 讨论 | 第58-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 第三部分 miR-205调控Smad4对宫颈癌细胞生物学行为的影响的机制研究 | 第64-83页 |
| 一 材料与方法 | 第64-70页 |
| 1 实验材料 | 第64页 |
| 2 主要试剂与仪器 | 第64-67页 |
| 3 实验方法 | 第67-70页 |
| 二 结果 | 第70-74页 |
| 1 抑制miR-205表达可上调宫颈癌细胞株中Smad4蛋白的表达 | 第70-71页 |
| 2 miR-205表达抑制后降低Smad4蛋白表达模型的建立 | 第71-72页 |
| 3 miR-205表达抑制后降低Smad4蛋白表达对宫颈癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响 | 第72-74页 |
| 4 miR-205表达抑制后影响宫颈癌生物学行为的机制 | 第74页 |
| 三 讨论 | 第74-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 综述 MicroRNA及siRNA在宫颈癌中的作用 | 第83-104页 |
| 参考文献 | 第98-104页 |
| 个人简历 | 第104页 |
| 博士期间发表论文情况 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105页 |
