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miR-24在脂代谢中的功能研究

摘要第6-7页
ABSTRACT第7页
目录第8-11页
第一章 绪论第11-18页
    1.1 家族性高胆固醇血症的发生、诊断与治疗第11-12页
    1.2 PCSK9 的研究进展第12-14页
        1.2.1 PCSK9 的功能第12-14页
        1.2.2 PCSK9 抑制剂类型及相关临床进展第14页
    1.3 microRNA 的生成过程与作用机制第14-16页
    1.4 研究内容与意义第16-18页
第二章 材料和方法第18-37页
    2.1 细胞来源第18页
    2.2 试剂及其配制第18-21页
        2.2.1 试剂盒第18页
        2.2.2 试剂第18-20页
        2.2.3 实验试剂的配制第20-21页
    2.3 实验仪器第21-23页
    2.4 实验方法第23-37页
        2.4.1 细胞培养第23-24页
        2.4.2 细胞转染第24页
        2.4.3 模板 cDNA 的制备第24-27页
        2.4.4 载体构建第27-31页
        2.4.5 双荧光素酶报告基因分析第31-32页
        2.4.6 点突变实验第32-33页
        2.4.7 实时定量 PCR(Real-time PCR)第33-34页
        2.4.8 蛋白质印迹法(Western Blot)第34-35页
        2.4.9 免疫荧光实验第35-36页
        2.4.10 脂内吞实验第36-37页
第三章 结果与讨论第37-56页
    3.1 miR-24 靶基因的筛选与鉴定第37-43页
        3.1.1 miR-24 靶基因的寻找第37-38页
        3.1.2 miR-24 与 PCSK9-mRNA 结合位点的预测第38-40页
        3.1.3 miR-24 靶向作用于 PCSK9 的 5′UTR 和 3′UTR第40-42页
        3.1.4 miR-24 靶基因的筛选与鉴定实验的讨论第42-43页
    3.2 miR-24 对 PCSK9 及其下游蛋白的调控研究第43-50页
        3.2.1 PCSK9 表达载体的构建第43-45页
        3.2.2 HEK-293T 细胞中 miR-24 对外源性 PCSK9 的抑制作用第45-46页
        3.2.3 HepG2 细胞中 miR-24 对内源性 PCSK9 的调控作用第46-47页
        3.2.4 miR-24 对 LDLR 的调控作用第47-49页
        3.2.5 miR-24 对 PCSK9 及其下游蛋白调控研究的讨论第49-50页
    3.3 miR-24 对细胞脂质摄取能力的影响第50-53页
        3.3.1 miR-24 促进肝来源细胞对 LDL 的摄取第50-52页
        3.3.2 HEK-293T 细胞中 miR-24 对脂内吞过程无明显作用第52-53页
        3.3.3 关于脂内吞实验的讨论第53页
    3.4 miR-24 对鼠源 PCSK9 的调控研究第53-56页
        3.4.1 miR-24 对鼠源 PCSK9 蛋白表达的影响第53-54页
        3.4.2 miR-24 对鼠源 PCSK9 的调控研究的讨论第54-56页
第四章 结论与展望第56-59页
    4.1 结论第56-57页
    4.2 展望第57-59页
参考文献第59-65页
缩略词对照表第65-66页
硕士期间公开发表的专利第66-67页
硕士期间公开参与的项目第67-68页
致谢第68页

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