| 缩略语表 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 文献回顾 | 第14-25页 |
| 一、前列腺癌现状 | 第14-15页 |
| 二、自噬通路的研究现状 | 第15-16页 |
| 三、自噬相关基因 beclin1 的研究现状 | 第16-20页 |
| 四、自噬在各种肿瘤的治疗中的作用 | 第20-22页 |
| 五、链霉亲和素在医学中的应用 | 第22页 |
| 六、抗 PSMA 适配子 | 第22-24页 |
| 七、源于核孤儿受体 Nur77 的小肽 NuBCP-9 对凋亡的作用 | 第24-25页 |
| 第一部分 构建原核表达载体 SA-beclin1 | 第25-40页 |
| 引言 | 第25页 |
| 1 实验材料 | 第25-27页 |
| 1.1 细胞和菌株来源 | 第25页 |
| 1.2 质粒载体 | 第25-26页 |
| 1.3 主要试剂 | 第26页 |
| 1.4 常用试剂、缓冲液及培养基 | 第26-27页 |
| 1.5 主要仪器 | 第27页 |
| 2 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.1 E.coli DH5α感受态的制备 | 第27-28页 |
| 2.2 目的基因的准备 | 第28-30页 |
| 2.3 载体的准备 | 第30-32页 |
| 2.4 载体与目的基因连接 | 第32-33页 |
| 2.5 重组质粒鉴定 | 第33-34页 |
| 3 实验结果 | 第34-38页 |
| 3.1 PCR 得到基因 SA 基因片段 | 第34页 |
| 3.2 质粒 pQE80L-beclin1 单酶切 | 第34-35页 |
| 3.3 pQE80L-SA-beclin1 双酶切鉴定 | 第35页 |
| 3.4 重组质粒的测序结果及测序序列与已知理论序列的比对结果 | 第35-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 第二部分 融合蛋白 SA-beclin1 的原核表达、纯化以及小肽 NUBCP-9 的设计合成 | 第40-60页 |
| 1 试验材料 | 第40-45页 |
| 1.1 菌种 | 第40页 |
| 1.2 主要试剂、缓冲液及培养基 | 第40-45页 |
| 2 实验方法 | 第45-52页 |
| 2.1 E.coli Rosetta-gami 感受态的制备 | 第45-46页 |
| 2.2 融合蛋白 SA-beclin1 的表达 | 第46页 |
| 2.3 融合蛋白 SA-beclin1 的鉴定 | 第46-49页 |
| 2.4 大量诱导表达融合蛋白 SA-beclin1 | 第49页 |
| 2.5 纯化融合蛋白 SA-beclin1 | 第49页 |
| 2.6 包涵体的变性及复性 | 第49-51页 |
| 2.7 设计并合成小肽 NuBCP-9 | 第51-52页 |
| 3 实验结果 | 第52-58页 |
| 3.1 融合蛋白 SA-beclin1 的表达条件摸索 | 第52-53页 |
| 3.2 少量诱导融合蛋白 SA-beclin1 及其鉴定 | 第53页 |
| 3.3 融合蛋白 SA-beclin1 的纯化 | 第53-54页 |
| 3.4 融合蛋白包涵体的变性复性 | 第54-55页 |
| 3.5 融合蛋白包涵体的复性后活性鉴定 | 第55页 |
| 3.6 小肽 NuBCP-9 合成后质谱图 | 第55-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 小结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 个人简历和研究成果 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
