摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
目录 | 第7-9页 |
第1章 引言 | 第9-18页 |
1.1 基因治疗的研究现状 | 第9-11页 |
1.1.1 基因治疗概况 | 第9-10页 |
1.1.2 基因载体 | 第10页 |
1.1.3 基因治疗药物 | 第10-11页 |
1.2 rAAV 与基因治疗 | 第11-13页 |
1.2.1 rAAV 概况 | 第11-12页 |
1.2.2 rAAV 基因药物临床试验进展 | 第12-13页 |
1.2.3 rAAV 基因药物存在的问题及隐患 | 第13页 |
1.3 RNAi 与基因治疗 | 第13-17页 |
1.3.1 RNAi | 第13-15页 |
1.3.2 RNAi 临床实验进展 | 第15页 |
1.3.3 miRNA 与肺癌 | 第15-17页 |
1.4 RNAi 与 AAV | 第17-18页 |
第2章 促进 rAAV 在肺癌细胞中高表达的 miRNA 筛选及统计学分析 | 第18-44页 |
2.1 引言 | 第18-19页 |
2.2 实验材料、试剂和仪器 | 第19-22页 |
2.2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.2.2 实验试剂 | 第20页 |
2.2.3 实验仪器 | 第20-21页 |
2.2.4 试剂配制 | 第21-22页 |
2.3 实验方法 | 第22-27页 |
2.3.1 实验过程中无菌操作的要求 | 第22-23页 |
2.3.2 细胞复苏、培养、传代和冻存 | 第23-25页 |
2.3.2.1 细胞的传代培养 | 第23页 |
2.3.2.2 细胞冻存 | 第23-24页 |
2.3.2.3 细胞复苏 | 第24-25页 |
2.3.3 脂质体转染 miRNA、siRNA 及 EGFP 质粒 | 第25-26页 |
2.3.4 转染 rAAV-GLUC 病毒 | 第26页 |
2.3.5 rAAV-GLUC 荧光检测 | 第26页 |
2.3.6 MTT 检测 | 第26-27页 |
2.4 实验结果及分析 | 第27-43页 |
2.4.1 EGFP siRNA 转染预实验 | 第27-29页 |
2.4.2 促进 rAAV 载体表达的 miRNA 筛选及统计学分析 | 第29-41页 |
2.4.3 促进 rAAV 载体表达的 miRNA 的验证 | 第41-43页 |
2.5 小结 | 第43-44页 |
第3章 miRNA 生物信息学预测 | 第44-66页 |
3.1 引言 | 第44-45页 |
3.2 miRNA 靶基因预测生物信息学原理与方法 | 第45-49页 |
3.3 结果与分析 | 第49-65页 |
3.3.1 rAAV 的转染途径 | 第49-50页 |
3.3.2 miRNA 的靶基因预测 | 第50-56页 |
3.3.2.1 小结 | 第56页 |
3.3.3 miRNA 信号通路的预测 | 第56-62页 |
3.3.3.1 以 miRNA 预测信号通路 | 第56-62页 |
3.3.3.2 小结 | 第62页 |
3.3.4 单个 miRNA 分析 | 第62-65页 |
3.4 小结 | 第65-66页 |
第4章 结论与展望 | 第66-68页 |
4.1 结论 | 第66页 |
4.2 展望 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
致谢 | 第74-76页 |
附录A 1719 个 miRNA 统计数据 | 第76-120页 |
附录B miRNA 数据库 | 第120-122页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第122页 |