中文摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
目录 | 第4-7页 |
符号说明 | 第7-8页 |
文献综述 | 第8-20页 |
1. 非洲猪瘟病毒 | 第8-11页 |
1.1 病毒分类 | 第8页 |
1.2 病毒粒子的形态和结构 | 第8-9页 |
1.3 病毒基因组 | 第9页 |
1.4 基因组编码的蛋白 | 第9-10页 |
1.5 非洲猪瘟病毒的感染机制 | 第10-11页 |
2. 非洲猪瘟的流行病学特点 | 第11-12页 |
3. 非洲猪瘟病的临床症状与病理变化 | 第12-13页 |
3.1 非洲猪瘟病的临床症状 | 第12-13页 |
3.2 非洲猪瘟病的剖检变化 | 第13页 |
4. 非洲猪瘟病毒的诊断 | 第13-15页 |
4.1 血细胞吸附试验(HAD) | 第13页 |
4.2 ASFV抗原检测 | 第13-14页 |
4.3 病毒抗体试验 | 第14-15页 |
5. 非洲猪瘟病的防治措施 | 第15页 |
参考文献 | 第15-20页 |
研究内容一:非洲猪癌病毒p54重组蛋白的原核表达及纯化 | 第20-36页 |
摘要 | 第20页 |
1. 材料 | 第20-22页 |
1.1 菌株和质粒 | 第20页 |
1.2 工具酶和试剂 | 第20页 |
1.3 培养基 | 第20-21页 |
1.4 引物 | 第21页 |
1.5 常用溶液 | 第21-22页 |
1.6 主要仪器 | 第22页 |
2. 方法 | 第22-29页 |
2.1 非洲猪瘟病毒p54基因的扩增 | 第22-23页 |
2.2 PCR产物的回收 | 第23-24页 |
2.3 验证载体pMD18T-p54的构建 | 第24-25页 |
2.4 表达载体pET-P54的构建 | 第25-27页 |
2.5 重组蛋白诱导表达及分析 | 第27-29页 |
2.6 重组蛋白的纯化 | 第29页 |
2.7 重组蛋白免疫原性检测 | 第29页 |
3. 结果 | 第29-33页 |
3.1 p54基因的扩增 | 第29-30页 |
3.2 重组载体的鉴定 | 第30页 |
3.3 表达载体鉴定 | 第30-31页 |
3.4 重组蛋白诱导表达及分析 | 第31-32页 |
3.5 重组蛋白纯化结果 | 第32页 |
3.6 重组蛋白免疫原性检测结果 | 第32-33页 |
4. 讨论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-36页 |
研究内容二 非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体的制备 | 第36-47页 |
摘要 | 第36页 |
1. 材料 | 第36-37页 |
1.1 细胞和实验动物 | 第36页 |
1.2 主要试剂 | 第36页 |
1.3 培养基 | 第36-37页 |
1.4 主要仪器 | 第37页 |
2. 方法 | 第37-42页 |
2.1 小鼠的免疫 | 第37页 |
2.2 饲养细胞的采集 | 第37-38页 |
2.3 骨髓瘤细胞S/P20的准备 | 第38页 |
2.4 脾细胞的采集 | 第38页 |
2.5 细胞融合 | 第38-39页 |
2.6 阳性克隆的筛选 | 第39-40页 |
2.7 阳性杂交瘤细胞的亚克隆 | 第40页 |
2.8 腹水的制备 | 第40页 |
2.9 单克隆抗体的亚类鉴定 | 第40-41页 |
2.10 单克隆抗体的特异性检测 | 第41-42页 |
2.11 单克隆抗体效价的检测 | 第42页 |
3. 结果 | 第42-45页 |
3.1 抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释倍数的确定 | 第42-43页 |
3.2 杂交瘤细胞筛选及亚克隆 | 第43页 |
3.3 单克隆抗体亚类的鉴定 | 第43页 |
3.4 单克隆抗体特异性检测 | 第43-45页 |
3.5 腹水单克隆抗体的效价测定 | 第45页 |
4. 讨论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |