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非洲猪瘟病毒p54重组蛋白的原核表达及其单克隆抗体制备

中文摘要第2-3页
Abstract第3页
目录第4-7页
符号说明第7-8页
文献综述第8-20页
    1. 非洲猪瘟病毒第8-11页
        1.1 病毒分类第8页
        1.2 病毒粒子的形态和结构第8-9页
        1.3 病毒基因组第9页
        1.4 基因组编码的蛋白第9-10页
        1.5 非洲猪瘟病毒的感染机制第10-11页
    2. 非洲猪瘟的流行病学特点第11-12页
    3. 非洲猪瘟病的临床症状与病理变化第12-13页
        3.1 非洲猪瘟病的临床症状第12-13页
        3.2 非洲猪瘟病的剖检变化第13页
    4. 非洲猪瘟病毒的诊断第13-15页
        4.1 血细胞吸附试验(HAD)第13页
        4.2 ASFV抗原检测第13-14页
        4.3 病毒抗体试验第14-15页
    5. 非洲猪瘟病的防治措施第15页
    参考文献第15-20页
研究内容一:非洲猪癌病毒p54重组蛋白的原核表达及纯化第20-36页
    摘要第20页
    1. 材料第20-22页
        1.1 菌株和质粒第20页
        1.2 工具酶和试剂第20页
        1.3 培养基第20-21页
        1.4 引物第21页
        1.5 常用溶液第21-22页
        1.6 主要仪器第22页
    2. 方法第22-29页
        2.1 非洲猪瘟病毒p54基因的扩增第22-23页
        2.2 PCR产物的回收第23-24页
        2.3 验证载体pMD18T-p54的构建第24-25页
        2.4 表达载体pET-P54的构建第25-27页
        2.5 重组蛋白诱导表达及分析第27-29页
        2.6 重组蛋白的纯化第29页
        2.7 重组蛋白免疫原性检测第29页
    3. 结果第29-33页
        3.1 p54基因的扩增第29-30页
        3.2 重组载体的鉴定第30页
        3.3 表达载体鉴定第30-31页
        3.4 重组蛋白诱导表达及分析第31-32页
        3.5 重组蛋白纯化结果第32页
        3.6 重组蛋白免疫原性检测结果第32-33页
    4. 讨论第33-34页
    参考文献第34-36页
研究内容二 非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体的制备第36-47页
    摘要第36页
    1. 材料第36-37页
        1.1 细胞和实验动物第36页
        1.2 主要试剂第36页
        1.3 培养基第36-37页
        1.4 主要仪器第37页
    2. 方法第37-42页
        2.1 小鼠的免疫第37页
        2.2 饲养细胞的采集第37-38页
        2.3 骨髓瘤细胞S/P20的准备第38页
        2.4 脾细胞的采集第38页
        2.5 细胞融合第38-39页
        2.6 阳性克隆的筛选第39-40页
        2.7 阳性杂交瘤细胞的亚克隆第40页
        2.8 腹水的制备第40页
        2.9 单克隆抗体的亚类鉴定第40-41页
        2.10 单克隆抗体的特异性检测第41-42页
        2.11 单克隆抗体效价的检测第42页
    3. 结果第42-45页
        3.1 抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释倍数的确定第42-43页
        3.2 杂交瘤细胞筛选及亚克隆第43页
        3.3 单克隆抗体亚类的鉴定第43页
        3.4 单克隆抗体特异性检测第43-45页
        3.5 腹水单克隆抗体的效价测定第45页
    4. 讨论第45-46页
    参考文献第46-47页
致谢第47-48页

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