| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 文献综述 | 第10-16页 |
| 第一章 奶牛乳腺炎及长链非编码RNA的研究进展 | 第10-16页 |
| 1.1 奶牛乳腺炎研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 奶牛乳腺炎概况 | 第10-11页 |
| 1.1.2 奶牛乳腺炎的细胞免疫机制 | 第11-12页 |
| 1.2 LncRNA在炎症中的研究进展 | 第12-16页 |
| 1.2.1 NF-κB通路中的lncRNAs | 第13页 |
| 1.2.2 JAK-STAT通路中的lncRNAs | 第13-14页 |
| 1.2.3 MAPK通路中的lncRNA | 第14-16页 |
| 实验研究 | 第16-42页 |
| 第二章 奶牛乳腺炎相关lncRNA的鉴定和功能验证 | 第16-42页 |
| 2.1 材料 | 第16页 |
| 2.2 仪器设备 | 第16-17页 |
| 2.3 实验试剂 | 第17页 |
| 2.4 方法 | 第17-24页 |
| 2.4.1 实验中溶液的配制 | 第17页 |
| 2.4.2 乳腺上皮细胞的复苏 | 第17-18页 |
| 2.4.3 乳腺上皮细胞的培养 | 第18页 |
| 2.4.4 乳腺上皮细胞的冻存 | 第18页 |
| 2.4.5 细菌处理的炎性细胞模型的建立 | 第18页 |
| 2.4.6 高通量测序 | 第18-20页 |
| 2.4.7 靶基因预测 | 第20页 |
| 2.4.8 反转录PCR验证测序数据 | 第20-21页 |
| 2.4.9 荧光定量PCR | 第21-22页 |
| 2.4.10 酶联免疫吸附测定 | 第22页 |
| 2.4.11 细胞核质分离 | 第22页 |
| 2.4.12 电转染siRNA干扰lncRNA-TUB | 第22-23页 |
| 2.4.13 敲除质粒的构建及阳性克隆的筛选 | 第23页 |
| 2.4.14 免疫荧光 | 第23页 |
| 2.4.15 细胞增殖测定 | 第23-24页 |
| 2.4.16 细胞迁移 | 第24页 |
| 2.4.17 统计分析 | 第24页 |
| 2.5 结果 | 第24-40页 |
| 2.5.1 高通量测序数据处理 | 第24-25页 |
| 2.5.2 鉴定预测的lncRNA | 第25-26页 |
| 2.5.3 差异表达的lncRNA和mRNA的比较分析 | 第26-27页 |
| 2.5.4 差异表达mRNA的GO和KEGG分析—lncRNA作用的炎症背景 | 第27-30页 |
| 2.5.5 预测lncRNA的特征 | 第30-31页 |
| 2.5.6 LncRNAs的功能预测 | 第31-33页 |
| 2.5.7 验证随机选择的新lncRNA | 第33-35页 |
| 2.5.8 LncRNA-TUB的敲除导致MAC-T细胞发生明显的形态学变化 | 第35-36页 |
| 2.5.9 lncRNA-TUB的敲除影响了细胞增殖,迁移以及β-酪蛋白的分泌 | 第36-37页 |
| 2.5.10 lncRNA-TUB的敲除干扰了MAC-T的免疫应答 | 第37-38页 |
| 2.5.11 LncRNA-TUB的敲除导致TUBA1C的下调和TGF-β1的上调 | 第38-40页 |
| 2.6 讨论 | 第40-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
