| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-12页 |
| 前言 | 第12页 |
| 1. 文献综述 | 第12-19页 |
| 1.1 植物叶色白化机理研究 | 第12-15页 |
| 1.1.1 叶绿素合成途径及相关编码基因概述 | 第12-13页 |
| 1.1.2 影响植物叶色白化的环境因素 | 第13-14页 |
| 1.1.3 影响植物叶色白化的内在因素 | 第14-15页 |
| 1.2 植物基因表达谱测序技术 | 第15-16页 |
| 1.2.1 数字基因表达谱(DGE)测序 | 第15-16页 |
| 1.2.2 数字基因表达谱测序技术的应用 | 第16页 |
| 1.3 hemC基因研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3.1 PBGD的生化性质 | 第16-17页 |
| 1.3.2 PBGD的蛋白质结构 | 第17页 |
| 1.3.3 PBGD的催化机理 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 2. 红苞凤梨叶片叶绿素合成代谢关键步骤的确定及白化关键基因的筛选 | 第19-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第19页 |
| 2.2 仪器试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.3 试验方法 | 第20-26页 |
| 2.3.1 红苞凤梨全白、全绿植株表达谱测序分析 | 第20-21页 |
| 2.3.2 红苞凤梨叶片叶绿含量及其合成代谢相关指标的测定 | 第21-24页 |
| 2.3.3 叶绿素合成相关基因的荧光定量表达 | 第24-26页 |
| 2.4 结果分析 | 第26-36页 |
| 2.4.1 红苞凤梨全绿、全白植株表达谱测序结果分析 | 第26-32页 |
| 2.4.2 红苞凤梨叶绿素含量及合成代谢相关指标的分析 | 第32-35页 |
| 2.4.3 叶绿素合成相关基因的荧光定量表达分析 | 第35-36页 |
| 3. 红苞凤梨AbhemC基因的克隆及序列分析 | 第36-48页 |
| 3.1 试验材料 | 第36页 |
| 3.2 仪器试剂 | 第36-37页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第36页 |
| 3.2.2 主要试剂及配方 | 第36-37页 |
| 3.3 试验方法 | 第37-41页 |
| 3.3.1 红苞凤梨总RNA的提取 | 第37-38页 |
| 3.3.2 cDNA第一链合成 | 第38页 |
| 3.3.3 AbhemC基因全长的扩增和测序 | 第38-41页 |
| 3.4 结果分析 | 第41-48页 |
| 3.4.1 红苞凤梨总RNA的质量检测 | 第41-42页 |
| 3.4.2 AbhemC基因全长的克隆 | 第42-43页 |
| 3.4.3 AbhemC基因的生物信息学分析 | 第43-48页 |
| 4. 农杆菌介导的pFGC5941-AbhemC-RNAi对烟草的遗传转化 | 第48-61页 |
| 4.1 试验材料 | 第48-49页 |
| 4.2 仪器试剂 | 第49-50页 |
| 4.2.1 主要仪器 | 第49页 |
| 4.2.2 主要试剂及配方 | 第49-50页 |
| 4.3 试验方法 | 第50-57页 |
| 4.3.1 红苞凤梨AbhemC干扰载体的构建 | 第50-53页 |
| 4.3.2 表达载体质粒冻融法转化农杆菌感受态 | 第53-54页 |
| 4.3.3 农杆菌介导的烟草转化 | 第54-57页 |
| 4.4 结果分析 | 第57-61页 |
| 4.4.1 干扰载体的构建 | 第57页 |
| 4.4.2 表达载体质粒冻融法转化农杆菌 | 第57-58页 |
| 4.4.3 农杆菌介导及转基因烟草的筛选 | 第58-60页 |
| 4.4.4 转基因烟草的PCR鉴定 | 第60-61页 |
| 5. AbhemC基因的功能验证 | 第61-67页 |
| 5.1 试验材料 | 第61页 |
| 5.2 仪器试剂 | 第61页 |
| 5.2.1 土要仪器 | 第61页 |
| 5.2.2 主要试剂及配方 | 第61页 |
| 5.3 试验方法 | 第61-63页 |
| 5.3.1 烟草叶绿素含量及合成代谢相关指标的测定 | 第61-62页 |
| 5.3.2 烟草hemC基因荧光定量表达 | 第62-63页 |
| 5.4 结果分析 | 第63-67页 |
| 5.4.1 烟草叶绿素含量及合成代谢相关指标的分析 | 第63-66页 |
| 5.4.2 烟草hemC基因荧光定量表达分析 | 第66-67页 |
| 6. AbhemC基因的原核表达及酶活分析 | 第67-70页 |
| 6.1 试验材料 | 第67-68页 |
| 6.2 仪器试剂 | 第68页 |
| 6.2.1 主要仪器 | 第68页 |
| 6.2.2 主要试剂及配方 | 第68页 |
| 6.3 试验方法 | 第68-69页 |
| 6.3.1 AbhemC基因的原核表达 | 第68-69页 |
| 6.3.2 原核表达蛋白的酶活测定 | 第69页 |
| 6.4 结果分析 | 第69-70页 |
| 6.4.1 AbhemC基因的原核表达分析 | 第69-70页 |
| 6.4.2 AbhemC基因原核表达蛋白的酶活分析 | 第70页 |
| 7. 结论与讨论 | 第70-75页 |
| 7.1 红苞凤梨叶片白化关键基因的筛选 | 第70-72页 |
| 7.2 AbhemC基因的序列特征及所编码的蛋白质基本性质 | 第72-73页 |
| 7.3 表达载体pFGC5941-AbhemC-RNAi对烟草的遗传转化 | 第73-74页 |
| 7.4 AbhemC基因的功能分析 | 第74页 |
| 7.5 AbhemC基因的原核表达蛋白活性分析 | 第74-75页 |
| 8. 研究展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 攻读硕士研究生期间发表的论文 | 第85页 |
